不同有机肥处理对水芹产量及其黄酮合成的影响毕业论文定稿.

1、 专业代码：070401 学 号：090903030069贵 州 师 范 大 学（本 科）毕 业 论 文 题 目：不同有机肥处理对水芹产量及其黄酮合成的影响 学 院：生命科学学院 专 业：生物科学 年 级：2009级 姓 名：xx 指导教师： xxx（教授） 完成时间：2012年4月23日不同有机肥处理对水芹产量及其黄酮合成的影响 杨琴摘要：以大叶水芹为试验材料，设置了不同的有机肥处理，测定了其最终的产量、黄酮含量及苯丙氨酸解氨酶活性的变化。结果表明：8号处理（施有机肥945g）水芹的产量和黄酮含量均明显高于其它处理。水芹苯丙氨酸解氨酶活性随着有机肥用量的增加而增加，当达到945/g以后，开始

2、下降，与水芹中黄酮含量的变化趋势一致，说明苯丙氨酸解氨酶活性与水芹黄酮的合成密切相关。关键词：水芹；有机肥；产量；黄酮含量；苯丙氨酸解氨酶Effect of different organic fertilizer treatments on yield and flavonoid synthesis of water dropwortYang QinAbstract: Used Daye water dropwort as the material, the yield, flavonoid content and activity of PAL had been studied with

3、different treatment of organic fertilizer. The results show that, yield and flavonoid content were marked higher when treated with 945g every flowerpot than the others. The activity of PAL increased with increasing the concentration of organic fertilizer of water dropwort, which had the same trend w

4、ith flavonoid content. It was concluded that the activity of PAL and flavonoid content were closely related. Keyword: Water dropwort; organic fertilizer; yield; flavonoid; PAL引言：水芹（Oenanthe javanica D.C.），伞形花科水芹菜属草本植物，别名水英、牛草、楚葵、刀芹、蜀芹、野芹菜等，是我国传统特色水生蔬菜的重要种类1。水芹原产我国和东南亚，在我国栽培已有2000多年的历史2。同时，水芹也是一种古老的草

5、药，根据国内对水芹属植物的调查表明：水芹有5种1变种，大多数为水芹、中华水芹和西南水芹，广泛分布于我国河南、安徽、江苏、浙江、湖北、湖南、广东、广西和台湾等地3。以其嫩茎和叶柄供食用4，多作鲜菜炒食，其味鲜美而清香，营养较好。此外，水芹可以吸附油脂和胆固醇，是优质的保健蔬菜5。传统医学和现代医学研究都证明水芹具有减肥、利尿、防癌、降低血压和血脂等多种食疗功效6-7。它经肠内消化作用产生一种木质素或肠内脂的物质，可以减少粪便在肠内的运转时间，减少致癌物与结肠粘膜的接触达到预防结肠癌的目的。水芹植株内含有黄酮、甾醇类物质而具有抗肝炎、抗心律失常以及降血压、降血脂等保健功能，因为脂质过氧化反应（LP

6、O）是导致人体疾病（如肝炎、肝硬化、动脉硬化、脑溢血等）的主要原因，而黄酮类化合物是一类很强的过氧化反应抑制剂8。生物类黄酮主要成分是芦丁，主要功效是软化血管，改善微循环9。黄酮是水芹主要的药用活性物质，目前也有部分学者报道了水芹中的黄酮含量10，但是如何进一步提高水芹中的黄酮含量，提高其药用保健价值的报道较少，因此，本试验以本单位选育出的“大叶水芹”为试验材料，设置了不同的有机肥处理，测定了其产量和黄酮含量，以期为水芹的高产优质栽培提供部分理论依据。1. 材料与方法1.1 材料及种植管理本试验所用的水芹材料是由贵州师范大学生命科学学院植物遗传育种研究所选育的“大叶水芹”。供试肥料：有机肥（贝

7、施特牌，贵州贵源磷化有限公司）。样品于2012年4月30日移栽于贵州师范大学生命科学学院植物遗传育种研究所。移栽时统一施一次基肥，设置不同的浓度梯度，即1-10号盆分别施入有机肥21g、36g、51g、66g、81g、96g、111g、126g、141g、156g。每隔2个月采收1次，采收后分别追施肥有机肥0g、30g、60g、90g、120g、150g、180g、210g、240g、270g，采收4次。施肥情况见下表：表 1 水芹施肥情况（有机肥g）Table 1 Water celery fertilization（organic fertilizer g）处理Treatment基肥bas

8、e fertilizer追肥 recovery fertilizer2012.5.30追肥recovery fertilizer2012.7.30追肥recovery fertilizer2012.9.30追肥recovery fertilizer2013.11.30合计Total121000021236303030301353516060606027046690909090405581120120120120540696150150150150675711118018018018081081262102102102109459141240240240240108010156270270270

9、27012151.2 材料采集及原料制备 将每次采收的水芹编号后称重并依次记录，在最后一次采收时，还需将采收的水芹于105烘箱中杀青30min，恒温（60）烘干至恒重。用粉碎机粉碎，放入干燥器中保存备用。测定前再于60烘箱中烘至恒重。1.3 试验器材和试剂1.3.1 实验器材：试管，水浴锅，漏斗，烧杯，容量瓶，玻璃棒，离心机，烘箱，pH试纸，剪刀，直尺，量筒，电子天平，研钵，分光光度计。1.3.2 试剂：石英砂，磷酸缓冲液(pH 7.0），70甲醇，0.1mol/L氯化铝，1.0mol/L醋酸钾，苯丙氨酸。1.4测定方法1.4.1 黄酮的测定参考黄云华11的方法，称样品0.5g，取15mL70

10、甲醇恒温（60）水浴2h后，过滤。取0.5ml溶液加1ml氯化铝（0.1mol/L），再加1.5mLKAc(1.0mol/L)，用甲醇定容25ml，作样品。另取0.5ml溶液，加甲醇定容25ml，作空白。在波长420nm测吸光度。总黄酮含量(x)：x=(A-0.0105)/0.0315×N/M×100。 A样品的吸光度；N稀释倍数； M样品质量1.4.2苯丙氨酸解氨酶的酶活性测定 参考宾金华等(2000)的方法12，称取酶液提取原料1.0g，剪成小段，加预冷的pH7.2磷酸缓冲液5mL，于冰浴上研钵研磨。将已匀浆的酶液用三层滤纸过滤，滤液转入离心管，在10000×

11、g离心30min，弃沉淀。获上清液用磷酸缓冲液稀释5倍，作为酶测定的粗提液，取1mL粗提液加1mL苯丙氨酸和2mL蒸馏水，总体积4mL；对照不加底物，多加1mL蒸馏水。反应液置恒温水浴三十摄氏度中保温，0.5小时后用紫外线分光光度计在290nm处测定吸光度。以每小时在290nm处吸光度变化0.01所需酶量为一单位。1.4.3产量的测定 分别于2012年7月30日、2012年9月30日、2012年11月30日、2013年1月30日采收各处理盆内的水芹。将采收的水芹用蒸馏水洗净后擦干，称量其鲜重，统计每盆每次采收的产量，折合成亩产，以kg计算。1.4.4 数据分析采用Excel 2003软件进行数

12、据处理。2. 结果与分析2.1 不同有机肥处理对水芹产量的影响 表2 不同有机肥处理对水芹产量的影响（kg/666.7m2）Table 2 Effect of different organic fertilizer treatment on the yield of water drop处理1Treatment1处理2Treatment2处理3Treatment3处理4Treatment4处理5Treatment5处理6Treatment6处理7Treatment7处理8Treatment8处理9Treatment9处理10Treatment102012年7月469.4537.4594.76

13、09.4606.7676.0685.4808.1760.0748.02012年9月449.4549.4580.0598.7584.0642.7677.4796.0732.0733.42012年11月450.7516.0600.0574.7613.4638.7688.0785.4754.7738.72013年1月460.0532.0589.4600.0602.7649.4665.4814.7764.0745.4合计1829.52134.82364.12382.82406.82606.82716.23204.23010.72965.5由表2可以看出，不同有机肥量处理对水芹的产量存在一定影响。以4次

14、采收的总和来计算，产量最高的是处理8（施有机肥126kg/亩），亩产量达3204.2kg，最低的是空白对照组，亩产量仅1829.5kg。产量从高到低的顺序为处理8处理9处理10处理7处理6号处理5号处理4号处理3处理2处理1，说明种植水芹时适当追施一定量的有机肥能在一定程度上增加水芹的产量。不同采收时间相比，总体以7月份采收时的产量较高。2.2 不同有机肥处理对水芹黄酮含量的影响 表3 不同有机肥处理对水芹黄酮含量的影响（%）Table 3 Effect of different organic fertilizer treatment on the flavonoid content of

15、water dropwort处理1Treatment1处理2Treatment2处理3Treatment3处理4Treatment4处理5Treatment5处理6Treatment6处理7Treatment7处理8Treatment8处理9Treatment9处理10Treatment102012年7月0.451.131.201.331.431.531.652.302.122.002012年9月0.390.951.221.291.361.491.581.841.581.762012年11月0.331.090.971.311.401.501.552.291.501.672013年1月0.440

16、.871.130.991.381.471.602.251.711.50平均0.411.011.131.231.391.501.602.171.731.73由表3可以看出，不同有机肥处理对水芹黄酮含量存在明显影响。参照四次采收测量的平均值，以处理8水芹的黄酮含量最高，达2.17%，空白对照处理最低，为0.41%。水芹的黄酮含量随有机肥用量的增加而增加，当用量达945g后（处理8）有所下降，说明在一定程度内增施有机肥能促进水芹黄酮含量的增加。2.3不同有机肥处理对水芹内苯丙氨酸解氨酶的酶活性的影响 表4不同有机肥处理对水芹苯丙氨酸解氨酶酶活性的影响（0.1nmg-1FWh-1）Table 4 Ef

17、fect of different organic fertilizer treatment on the Phenylalanine ammonia enzyme activity of enzymes of water dropwort处理1Treatment1处理2Treatment2处理3Treatment3处理4Treatment4处理5Treatment5处理6Treatment6处理7Treatment7处理8Treatment8处理9Treatment9处理10Treatment102012年7月16.120.324.625.025.627.326.228.625.526.42

18、012年9月15.820.019.324.623.827.025.524.423.026.02012年11月17.118.522.018.926.025.523.127.023.323.12013年1月16.018.721.624.319.623.925.227.325.824.6平均16.319.421.923.223.825.925.026.724.425.0由表4可以看出，不同有机肥处理对水芹苯丙氨酸解氨酶的酶活性存在明显影响。参照四次采收测量的平均值，不同有机肥处理下，施有机肥945g（8号处理）时水芹内苯丙氨酸解氨酶的酶活性最高，空白对照处理（1号盆处理）时最低。每盆施有机肥低于94

19、5g时，酶活性随有机肥施肥量增加而增加。8号处理时的苯丙氨酸解氨酶酶活性为对照处理时的1-2倍，说明种植水芹时适当追有机肥能在一定程度上增加水芹内苯丙氨酸解氨酶的酶活性。3. 小结与讨论 水芹的产量较高，一般为3000-4000kg/亩，但仍有较大的可提高的空间。李会合等（2003）13认为施用猪粪(PM)可使芹菜显著增产，其余有机肥处理的产量差异不显著。从本试验的研究结果可以看出，不同有机肥处理对水芹产量的影响较大，以每盆施有机肥945g（126kg/亩）时产量最高，是不追肥处理时的1-2倍，说明适当追施有机肥能明显增加水芹的产量，与张继舟等（2012）14的研究结果一致。苯丙氨酸解氨酶(P

20、AL)是苯丙氨酸代谢途径的进入点酶，也是异黄酮合成的关键酶之一15。赵则海等（2011）16认为攀援型和矮生型的四棱豆PAL活性和总黄酮含量之间均呈显著正相关。房建军等（2006）17 发现在银杏叶幼苗茎段内黄酮积累的过程中PAL活性也呈增加趋势。从本试验的研究结果可以看出，不同有机肥施肥量处理对水芹黄酮含量和苯丙氨酸解氨酶的酶活性有较大影响，在一定范围内与施肥量呈正相关，而且黄酮含量的变化趋势与PAL酶活性的变化趋势相似，与上述研究结果一致。当然如何进一步提高水芹的PAL酶活性，增加产品器官中的黄酮含量，提高水芹的药用保健价值，则有待于进一步的试验。参考文献1赵有为.中国水生蔬菜M北京：中国

21、农业出版社，1999.2周火强.度春淡绿色水生蔬菜水芹J辣椒杂志，2012，3（1）:37-37.3黄正明，焦振宇.水芹的研究概况J.现代药物与临床杂志，1996，3（3）：103-105.4何顺志，徐文芬贵州中草药资源研究M贵州：贵州科技出版社，20075时 政，黄凯丰.水芹对油脂和胆固醇吸附作用研究J.北方园艺. 2011，(19)：29-31.6黄正明有关中草药水芹现代研究的若干探讨J世界华人消化杂志，2001，9(1)：1-57何照范，张迪清保健食品化学及其检测技术M北京：中国轻工业出版社，l9978张福根，周瀚洋，彭静，吴季兰. 黄酮类化合物与-羟乙基过氧自由基反应的脉冲辐解研究N物理化学学报，2013，29（1）:199-204.9瞿继忠，全圣.苦荞麦的药用价值及其高产栽培技术J农业科学通讯，2009.10黄凯丰，时政，欧腾，宋毓雪.水芹的营养保健成分分析J.江苏农业科学, 2011 39（5）：434-435.11黄云华. 不