沉降菌碟暴露时间验证方案

1、1沉降菌碟暴露时间验证文件沉降菌碟暴露时间验证文件验证项目验证项目沉降菌碟暴露时间沉降菌碟暴露时间验证文件验证文件验证方案编号验证方案编号验证报告编号验证报告编号验证证书编号验证证书编号0目录目录一、验证方案起草、审批一、验证方案起草、审批.1二、验证报告起草审查及会审二、验证报告起草审查及会审.1三、验证证书的批准三、验证证书的批准.1四、引言四、引言.2五、菌种及培养基五、菌种及培养基.2六、菌液制备六、菌液制备.2七、验证方法七、验证方法.2八、回收率计算八、回收率计算.3九、结果判断九、结果判断.3十、验证结果和记录（附后）十、验证结果和记录（附后）.3十一、验证报告（附后）十一、验证

2、报告（附后）.3十二、验证证书（附后）十二、验证证书（附后）.30沉降碟暴露时间验证方案沉降碟暴露时间验证方案一、验证方案起草、审批 1、验证方案起草、验证方案起草 验证项目沉降碟暴露时间验证 使用部门中心检验室 验证方案编号 YZ-13580-1 起草部门中心检验室 起草人签名 日 期 2、验证方案会审、验证方案会审 审核人 日 期3、验证方案批准、验证方案批准批准人验证委员会主任签名日 期二、验证报告起草审查及会审1、验证报告起草、验证报告起草验证项目沉降碟暴露时间验证使用部门中心化验室 验证报告编号 起草部门 中心化验室 起草人签名日 期2、验证报告会审、验证报告会审审核人日 期 三、验

3、证证书的批准验证项目沉降碟暴露时间验证使用部门中心化验室 验证证书编号 批准人验证委员会主任签名日 期1四、引言1、验证目的：验证我公司沉降碟的暴露时间为 4 小时，依据中国药典2010 年版附录无菌检查法和微生物限度检查法下灵敏度检查项进行验证，以证明沉降碟中培养基在空气暴露时间可以达到 4 小时。2、概述：我公司沉降碟为普通的培养皿（90mm15mm） ，所采用的培养基为大豆酪蛋白琼脂培养基（TSA） ，每个培养皿含培养基 20ml，根据培养基特性制订检验方法，按制定的方法进行试验，根据验证结果判断是否符合验证标准。3、验证组织组长：彭伟添组员：陈杰辉，黄玉妍五、菌种及培养基1、菌种金黄色

4、葡萄球菌【CMCC（B）26003】 、铜绿假单胞菌【CMCC（B）10104】 、枯草芽孢杆菌【CMCC（B）63501】 、生孢梭菌【CMCC（B）64941】 、白色念珠菌【CMCC（F）98001】 。2、培养基营养肉汤培养基、改良马丁培养基、硫乙醇酸盐流体培养基、大豆酪蛋白琼脂培养基3、无菌检验仪器及相关设备 无菌室、净化工作台、恒温培养箱（3035） 、生化培养箱（2328） 、高压蒸汽灭菌器、电子天平、电冰箱、电热干燥箱、玻璃器皿。六、菌液制备接种金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌的新鲜培养物至营养肉汤培养基中培养 1824 小时；接种生孢梭菌的新鲜培养物至硫乙醇酸盐流体

5、培养基中培养1824 小时；接种白色念珠菌的新鲜培养物至改良马丁培养基中，培养 2448 小时；上述培养物用 0.9%无菌氯化钠溶液制成每 1ml 含菌数小于 100cfu 的菌悬液。菌液制备后若在室温下放置，应在 2 小时内使用；若保存在 28，可在 24 小时内使用。七、验证方法1、取配制好的沉降碟 32 个，同时灭菌后，取 16 个沉降碟，每 3 个分别接种小于100 cfu 的金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌、生孢梭菌、白色念珠菌，2另一个不接种作为空白对照，置 3035培养 3 天，逐日观察结果。2、把灭菌后的沉降碟 16 个放置在无菌检查时的超净洁净台上暴露 4 小时后，

6、每3 个分别接种小于 100 cfu 的金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌、生孢梭菌、白色念珠菌，另一个不接种作为空白对照，置 3035培养 3 天，逐日观察结果。八、回收率计算供试品组各的菌回收率（%）=100%验证加菌数样品本底菌数供试品组菌数-九、结果判断1、暴露前试验组的菌回收率应不低于 70%。暴露 4 小时后试验组的菌回收率应不低于 70%。2、若暴露前试验组的菌回收率应不低于 70%，说明加入的培养基能满足微生物生长，若暴露后试验组的菌回收率应不低于 70%，说明培养皿暴露 4 小时后，培养基仍能满足微生物生长，3、若任一次试验中试验组的菌回收率低于 70%，应采用增加培

7、养基，降低暴露时间，并重新进行方法验证，使试验组菌回收率大于 70%。十、验证结果和记录（附后）十一、验证报告（附后）十二、验证证书（附后）3沉降碟暴露时间验证报告沉降碟暴露时间验证报告 编号：20 年 月 日至 20 年 月 日，验证小组根据批准的 “YZ-13580-1 号”验证方案，对沉降碟的暴露时间进行验证，结果试验组的菌回收率均符合规定。通过验证，证明沉降碟的暴露时间可以达到 4 小时。验证小组： 20 年 月 日4沉降碟暴露时间验证合格证书沉降碟暴露时间验证合格证书 编号： 经审核， “xxx”验证方案合理，验证结果符合规定要求，特此发给验证合格证书，沉降碟的暴露时间可以达到 4

8、小时。 XX 药业股份有限公司 验证委员会（盖章）20 年 月 日5沉沉降降碟碟暴暴露露时时间间验验证证记记录录细菌数、霉菌和酵母菌数检品名称沉降碟配制部门中心检验室检验依据中国药典2010 年版附录检验日期：20 年 月 日报告日期20 年 月 日验证方法取 16 个沉降碟，每 3 个分别接种小于 100 cfu 的金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌、生孢梭菌、白色念珠菌，另一个不接种作为空白对照，置 3035培养 3 天。菌种名称菌种代数验证加菌数（cfu）样品本底菌数试验组（样品+验证加菌数）回收率（%）金黄色葡萄球菌 1金黄色葡萄球菌 2金黄色葡萄球菌 3铜绿假单胞菌 1铜绿假

9、单胞菌 2铜绿假单胞菌 3枯草芽孢杆菌 1枯草芽孢杆菌 2枯草芽孢杆菌 3生孢梭菌 1生孢梭菌 2生孢梭菌 3白色念珠菌 1白色念珠菌 2白色念珠菌 3供试品组各的菌回收率（%）=100%验证加菌数样品本底菌数供试品组菌数-6 检验人：复核人：沉沉降降碟碟暴暴露露时时间间验验证证记记录录细菌数、霉菌和酵母菌数检品名称沉降碟配制部门中心检验室检验依据中国药典2010 年版附录检验日期：20 年 月 日报告日期20 年 月 日验证方法取 16 个沉降碟，暴露 4 小时后，每 3 个分别接种小于 100 cfu 的金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌、生孢梭菌、白色念珠菌，另一个不接种作为空白对照，置 3035培养 3天。菌种名称菌种代数验证加菌数（cfu）样品本底菌数试验组（样品+验证加菌数）回收率（%）金黄色葡萄球菌 1金黄色葡萄球