section 2 蛋白质成熟和周转

1、Section 2 蛋白质的成熟和周转蛋白质的成熟和周转Mature and Turn- over of Proteino 中心法则表述了遗传信中心法则表述了遗传信息从息从DNA，到，到RNA，最，最后翻译成新生肽链的过后翻译成新生肽链的过程，但蛋白质肽链合成程，但蛋白质肽链合成之后还需要经历折叠、之后还需要经历折叠、修饰、组装以及分拣、修饰、组装以及分拣、运输和在细胞内定位等运输和在细胞内定位等过程，却是中心法则未过程，却是中心法则未能描绘的内容，也是目能描绘的内容，也是目前研究的热点。前研究的热点。一、蛋白质折叠、组装和修饰；一、蛋白质折叠、组装和修饰；二、蛋白质分拣、投送、定位；二、蛋白

2、质分拣、投送、定位；三、蛋白质寿命和限制性降解体系三、蛋白质寿命和限制性降解体系 未折叠蛋白（未折叠蛋白（U）快快 折叠中间体折叠中间体 慢慢 成熟蛋白（成熟蛋白（N）1。蛋白折叠的动力学：。蛋白折叠的动力学： 折叠的起始：自由能降低过程，为自发性折叠的起始：自由能降低过程，为自发性 折叠中间态：折叠中间态： 熔球态熔球态(molten globule state)； 前熔球态前熔球态(pro-molten globule state) 限速步骤：二硫键的形成；限速步骤：二硫键的形成；Pro的顺反异构化过程的顺反异构化过程2。蛋白折叠及装配的热力学蛋白折叠及装配的热力学辅助因子：辅助因子： 分

3、子伴侣分子伴侣 (molecular chaperones)； 折叠酶（折叠酶（foldase）一、蛋白质折叠、组装和修饰：一、蛋白质折叠、组装和修饰：o 新生肽链的剪切：新生肽链的剪切： N-端信号肽的切除：信号肽酶端信号肽的切除：信号肽酶 前体激活：原肽切除前体激活：原肽切除 新生肽链的自剪接：内含肽、外显肽新生肽链的自剪接：内含肽、外显肽o 新生肽链翻译后修饰：新生肽链翻译后修饰： 糖基化：糖基化：N-连接、连接、O-连接等连接等 脂质修饰：豆蔻酰化；异戊二烯化；棕榈酰化；法尼基化脂质修饰：豆蔻酰化；异戊二烯化；棕榈酰化；法尼基化 糖基磷脂酰肌醇化：肽链糖基磷脂酰肌醇化：肽链C-端接上端

4、接上GPI锚钩锚钩 末端修饰：如末端修饰：如N-端端S、A、M乙酰基和甲酰基保护、环化、乙酰基和甲酰基保护、环化、 E焦谷氨酸化；焦谷氨酸化； 豆蔻酰化；豆蔻酰化；C-端连接端连接GPI等等 动态可逆修饰：如蛋白磷酸化、乙酰化、甲基化、动态可逆修饰：如蛋白磷酸化、乙酰化、甲基化、 泛肽化、泛肽化、ADP核糖基化等核糖基化等3 3。蛋白质剪切和修饰：。蛋白质剪切和修饰：二、蛋白质分拣、投送、定位：二、蛋白质分拣、投送、定位： 蛋白质运送有三种形式：蛋白质运送有三种形式： 跨膜运送、跨膜运送、 核孔运输、核孔运输、 囊泡运送囊泡运送2c2a2b进入内质网进入内质网（一）（一） 蛋白质进入内质网：蛋

5、白质进入内质网：1. 边合成边跨边合成边跨ER膜：膜： 细胞内相当部分的蛋白质，包括分泌蛋白、溶酶体细胞内相当部分的蛋白质，包括分泌蛋白、溶酶体蛋白、膜蛋白等，必须要先进入内质网蛋白、膜蛋白等，必须要先进入内质网(ER)。 此类蛋白主要是由附着于此类蛋白主要是由附着于ER上的核糖体合成，边上的核糖体合成，边合成边跨跃合成边跨跃ER。1.1 进入内质网的信号序列：进入内质网的信号序列：新生肽链的信号肽新生肽链的信号肽1.2 载体载体：SRP、SRP受体（受体（SR）、）、ER上的转位器、上的转位器、 信号肽酶复合物（信号肽酶复合物（SPC）等。）等。1.2.1 SPR：o SPR构成：构成： 7

6、S RNA + 6条肽链（条肽链（9、14、19、54、68、72kDa）o 功能：功能： p54: 识别结合信号肽；介导与识别结合信号肽；介导与SR的结合的结合 p68: 高度碱性蛋白，与高度碱性蛋白，与p72形成异二聚体；与形成异二聚体；与SR的结合的结合 p72：与：与p68形成异二聚体，是肽链转位所必须的形成异二聚体，是肽链转位所必须的 p9/p14：形成异二聚体，与：形成异二聚体，与RNA末端结合；末端结合； 与核糖体作用，中止肽链跨膜前的合成与核糖体作用，中止肽链跨膜前的合成 p19：帮助：帮助p54与与7SRNA结合，其他功能不清。结合，其他功能不清。SPR结构结构o P54亚基

7、分为亚基分为N、G、M三三个结构域：个结构域：N：位于：位于N-端端G：结合：结合GTP，具，具GTP酶活性酶活性M：在：在C-端，因含多个端，因含多个Met而而得名，易于形成两亲螺旋，得名，易于形成两亲螺旋， 提供与疏水信号肽结合位提供与疏水信号肽结合位点点o P9和和p14结构以及与结构以及与RNA的结合的结合 革兰氏阴性菌和支原体革兰氏阴性菌和支原体SRP：o 其其RNA为为4.5S，只含有一个称为，只含有一个称为Ffh的的 p48类似物。类似物。1.2.2 SR(SRP受体）：受体）：o SR的结构：的结构： 是是ER上的一个内在蛋白，由上的一个内在蛋白，由 和和 两个亚基构成：两个亚

8、基构成： 亚基：亚基：69kDa，含多个疏水区，其一带大量正电荷，与，含多个疏水区，其一带大量正电荷，与 SRP的的p68/p72作用。作用。 亚基：亚基：30kDa，与，与 亚基亚基1：1结合。结合。o SR功能：引导功能：引导SPR和新生肽链正确结合到和新生肽链正确结合到ER上；上； 一旦结合完成，促使一旦结合完成，促使SRP解离解离1.2.3 ER上的转位器：上的转位器：o 新生肽链通过新生肽链通过ER上的特定通道，跨膜转运到上的特定通道，跨膜转运到ER腔内，腔内，这一通道，连同核糖体受体和信号肽受体在内，现这一通道，连同核糖体受体和信号肽受体在内，现统称为统称为转位器（转位器（Tran

9、slocon）o 在去污剂和脂质体中，分离出来的最小的转位器为在去污剂和脂质体中，分离出来的最小的转位器为圆柱形的亲水通道寡聚体，外径圆柱形的亲水通道寡聚体，外径=85，内径，内径= 20，由由SRP受体、受体、Sec61复合物和一个转位链相关膜蛋白复合物和一个转位链相关膜蛋白（TRAM）组成。）组成。o 转位器中部分蛋白转位器中部分蛋白的结构特征：的结构特征：1.3 1.3 信号肽酶信号肽酶o 大多数新生肽链进入大多数新生肽链进入ER后，信号肽将由信号肽后，信号肽将由信号肽酶切除。酶切除。真核细胞信号肽酶真核细胞信号肽酶1.4 1.4 新生肽链的转位过程：新生肽链的转位过程：o 部分内质网蛋

10、白还可通过不依赖部分内质网蛋白还可通过不依赖SPR的途径，进入的途径，进入ER，尤其是酵母，比高等的真核细胞更多地使用该途径。尤其是酵母，比高等的真核细胞更多地使用该途径。o 不依赖不依赖SRP的跨的跨ER膜转运是一种翻译后运送方式。膜转运是一种翻译后运送方式。o 过程：过程： 肽链在细胞质合成后，以不完全折叠状态与分子肽链在细胞质合成后，以不完全折叠状态与分子伴侣（如伴侣（如Hsp70等）结合，然后在等）结合，然后在Sec61p以及以及Ydilp（功（功能类似于能类似于DnaJ）的帮助下跨越）的帮助下跨越ER膜。在膜。在ER腔内，再由腔内，再由Bip等其它分子伴侣帮助完成折叠。等其它分子伴侣

11、帮助完成折叠。o 此运送方式具有方向性，因为，与此运送方式具有方向性，因为，与ATP结合而尚未与底结合而尚未与底物结合的物结合的Bip，可以封闭，可以封闭ER转位器的转位器的ER侧。侧。2。不依赖。不依赖SRP的跨的跨ER膜转运：膜转运：3。ER滞留信号：滞留信号： 3.1 常见常见ER滞留信号：滞留信号：BiP、grp94和蛋白质二硫键异构酶都是滞留在和蛋白质二硫键异构酶都是滞留在ER中的，在它们的中的，在它们的C-末端有同样的四肽末端有同样的四肽KDEL 。如果除。如果除去去BiP C-端的端的KDEL四肽，四肽，BiP就被分泌；溶菌酶的就被分泌；溶菌酶的C-端接上了这一四肽，也被保留在端

12、接上了这一四肽，也被保留在ER中，不再被分泌。中，不再被分泌。o 这两个实验证明：这两个实验证明：KDEL四肽四肽是将蛋白质滞留在是将蛋白质滞留在ER中中的一种信号。的一种信号。o 在酵母中也有类似的情况，只是四肽的序列为在酵母中也有类似的情况，只是四肽的序列为HDEL。含有含有KDEL的蛋白质约十多个，它们的作用可能和的蛋白质约十多个，它们的作用可能和BiP相同，起相同，起“质量监督质量监督”作用。使折叠不正确新生肽作用。使折叠不正确新生肽链和没有装配好的单体链和没有装配好的单体(亚基亚基)不能通过不能通过ER，进入高尔基，进入高尔基体体o ER膜蛋白分为膜蛋白分为I型和型和II型，型，I型

13、肽链的型肽链的N-端在端在ER腔内，腔内，而而C-端在细胞质中；端在细胞质中；II型则相反。其中型则相反。其中I型肽链的型肽链的C-端端有一个序列为有一个序列为KKXX或或KXKXX的信号序列与定位方式的信号序列与定位方式有关。有关。o 此外，腺病毒中有一种此外，腺病毒中有一种E19膜糖蛋白，它出现于病毒感膜糖蛋白，它出现于病毒感染的早期，是染的早期，是I型型ER膜整合蛋白，其细胞质内的肽段较膜整合蛋白，其细胞质内的肽段较短，短，C-端端15肽是定位在肽是定位在ER上所必需的，如果除去这肽上所必需的，如果除去这肽段中的段中的8个氨基酸残基，个氨基酸残基，E19就被送到细胞表面。就被送到细胞表面

14、。这种滞留信号如何起作用？目前还不清楚，很可能这种滞留信号如何起作用？目前还不清楚，很可能是通过在细胞质内的肽段和微管等细胞骨架相互作用。是通过在细胞质内的肽段和微管等细胞骨架相互作用。3.2 ER膜上滞留信号：膜上滞留信号：1。高尔基体的转运属于囊泡转运：。高尔基体的转运属于囊泡转运：o 高尔基体是肽链加工过程中不可或缺的细胞器。高尔基体是肽链加工过程中不可或缺的细胞器。o 一种小的一种小的GTP结合蛋白结合蛋白ras相关相关GTP结合蛋白结合蛋白（Rab）家族（约）家族（约30种）引导高尔基体囊泡到达正确的种）引导高尔基体囊泡到达正确的目的地。目的地。o Rab蛋白都是小分子的蛋白都是小分

15、子的GTP酶酶 ，分子量大约都在，分子量大约都在200aa左右，差异在于左右，差异在于C-端序列不同，并决定了它们在细胞端序列不同，并决定了它们在细胞内的分布特征。其中：内的分布特征。其中：Rab1定位在内质网和高尔基体；定位在内质网和高尔基体；Rab2在近侧高尔基体；在近侧高尔基体；Rab6在中间高尔基体；在中间高尔基体；Rab9和和10 在远侧高尔基体等。在远侧高尔基体等。（二）蛋白质在高尔基体内的分拣和定位：（二）蛋白质在高尔基体内的分拣和定位：v Ras Ras：是原癌基因是原癌基因rasras的编码产物，的编码产物，分子量分子量21kDa21kDa的一条的一条肽链，作用机理类似肽链，

16、作用机理类似G G , , 故又称故又称P21P21蛋白蛋白或或小小G G蛋白蛋白。几乎几乎1/3人类肿瘤中发现有人类肿瘤中发现有Ras突变，它对细胞分化至关重要。突变，它对细胞分化至关重要。Rab1Rab2Rab3Rab6Rab10Rab9Rab7Rab4Rab5Rab蛋白在胞浆蛋白在胞浆中可将结合的中可将结合的GDP换成换成GTP，并结合到特定的并结合到特定的出芽囊泡表面，出芽囊泡表面，促使其与正确受促使其与正确受体融合后，将体融合后，将GTP水解为水解为GDP，Rab-GDP复合体复合体从囊泡上脱落，从囊泡上脱落，完成一个完成一个Rab循循环。环。2。高尔基体中蛋白质的定位信号：。高尔基

17、体中蛋白质的定位信号：o 位于肽链位于肽链C-端的端的YQRL被认为是蛋白质定位于高尔基体被认为是蛋白质定位于高尔基体的一个信号肽。的一个信号肽。3。高尔基体内蛋白质向胞外的分泌：。高尔基体内蛋白质向胞外的分泌：o 肽链经肽链经ER进入高尔基体后，除了部分定位于进入高尔基体后，除了部分定位于ER和高尔和高尔基体外，其余的将被以囊泡形式进一步转运到胞外或溶基体外，其余的将被以囊泡形式进一步转运到胞外或溶酶体等其它细胞器。酶体等其它细胞器。o 囊泡的形式有两种：囊泡的形式有两种： 笼形蛋白包被小泡（如：从高尔基体到溶酶体）笼形蛋白包被小泡（如：从高尔基体到溶酶体） 非笼形蛋白包被小泡（如：从非笼形

18、蛋白包被小泡（如：从ER到高尔基体）到高尔基体） 高尔基体高尔基体中的蛋白通过两种方式分泌到胞外中的蛋白通过两种方式分泌到胞外o连续分泌连续分泌：或固有分泌、组成型分泌，指通过转运小泡：或固有分泌、组成型分泌，指通过转运小泡/颗粒，非颗粒，非选择性地将蛋白连续投送到细胞膜或分泌到胞外的分泌方式。例选择性地将蛋白连续投送到细胞膜或分泌到胞外的分泌方式。例如：免疫球蛋白、白蛋白、大多数糖蛋白和间质蛋白等基体组成如：免疫球蛋白、白蛋白、大多数糖蛋白和间质蛋白等基体组成型分子。型分子。o调节性分泌调节性分泌：指某些特殊的分泌细胞可以将一些分泌蛋白储存于：指某些特殊的分泌细胞可以将一些分泌蛋白储存于囊泡

19、中，在特定的刺激下再分泌出去的分泌方式。一般调节性分囊泡中，在特定的刺激下再分泌出去的分泌方式。一般调节性分泌的蛋白都属于激素、酶原和神经递质等具有特定生物活性的蛋泌的蛋白都属于激素、酶原和神经递质等具有特定生物活性的蛋白。白。o调节性分泌囊泡中带有色颗粒蛋白（调节性分泌囊泡中带有色颗粒蛋白（chromogranin)和分泌颗粒素和分泌颗粒素（secretogranin)两种蛋白，在两种蛋白，在pH6.5和钙离子浓度和钙离子浓度1mmol/L条件下条件下(通常在通常在TGN内），可彼此聚集，并选择性介导蛋白质之间的相互内），可彼此聚集，并选择性介导蛋白质之间的相互聚集，聚集蛋白将进入调节性分泌

20、囊泡，否则将被连续分泌。聚集，聚集蛋白将进入调节性分泌囊泡，否则将被连续分泌。 高尔基体内蛋白的两种分泌方式高尔基体内蛋白的两种分泌方式笼形蛋白笼形蛋白（三）蛋白质向溶酶体的分拣和投送：（三）蛋白质向溶酶体的分拣和投送：o 溶酶体本身不能合成蛋白质，所有的酶都是输入的，以溶酶体本身不能合成蛋白质，所有的酶都是输入的，以补充这些酶的代谢更新以及细胞分裂时溶酶体的膨胀之补充这些酶的代谢更新以及细胞分裂时溶酶体的膨胀之用。同时这些溶酶体酶又不能流失到细胞外或细胞内的用。同时这些溶酶体酶又不能流失到细胞外或细胞内的其它部位，以免产生有害的水解作用。其它部位，以免产生有害的水解作用。o 进入溶酶体的蛋白

21、大致可分为两类：一类是溶酶体固有进入溶酶体的蛋白大致可分为两类：一类是溶酶体固有的蛋白，包括多达的蛋白，包括多达50种的可溶性水解酶和凝集素等。另种的可溶性水解酶和凝集素等。另一类是需要在溶酶体内被降解的蛋白。它们带有不同的一类是需要在溶酶体内被降解的蛋白。它们带有不同的信号。信号。1 1。溶酶体蛋白质进入的信号：。溶酶体蛋白质进入的信号：o 溶酶体蛋白质溶酶体蛋白质 绝大多数为水解酶类，因此它们的分拣信绝大多数为水解酶类，因此它们的分拣信号明显区别于其它蛋白，采用的是特殊的糖信号号明显区别于其它蛋白，采用的是特殊的糖信号Man-6-P。o 高尔基体膜的腔面一侧存在着高尔基体膜的腔面一侧存在着

22、6-P-甘露糖的结合蛋白受甘露糖的结合蛋白受体（体（P型动物凝集素型动物凝集素P-selectin)能够特异结合能够特异结合N-寡糖寡糖末端带有末端带有6个磷酸甘露糖的标记的溶酶体蛋白，并与其形个磷酸甘露糖的标记的溶酶体蛋白，并与其形成复合物。成复合物。o 复合物从高尔基体上出芽并被引入笼形蛋白包被的囊泡复合物从高尔基体上出芽并被引入笼形蛋白包被的囊泡中，形成早期内吞体，后者很快除去笼形蛋白后与晚期中，形成早期内吞体，后者很快除去笼形蛋白后与晚期内吞体结合，内部内吞体结合，内部PH降为降为5.5，导致复合物解体，磷酸化，导致复合物解体，磷酸化的酶与其受体分离。的酶与其受体分离。o 晚期内吞体分

23、裂为小的转运体，溶酶体酶失去磷酸基并晚期内吞体分裂为小的转运体，溶酶体酶失去磷酸基并被运送到溶酶体；而被运送到溶酶体；而P-selectin 被送回高尔基体循环使用。被送回高尔基体循环使用。o 除了溶酶体酶以外，还有一些蛋白质也含有除了溶酶体酶以外，还有一些蛋白质也含有Man-6-P糖链，糖链，如甲状腺球蛋白、某些病毒外壳的糖蛋白，可能如甲状腺球蛋白、某些病毒外壳的糖蛋白，可能Man-6-P受受体还有鲜为人知的生物学意义。体还有鲜为人知的生物学意义。2 2。溶酶体膜蛋白的定位信号：。溶酶体膜蛋白的定位信号：o 定位于溶酶体膜上的蛋白信号是其某一肽段，而不是糖信号。定位于溶酶体膜上的蛋白信号是其

24、某一肽段，而不是糖信号。例如例如I型溶酶体蛋白型溶酶体蛋白gp120：其在细胞质中的：其在细胞质中的C-端的氨基酸残端的氨基酸残基序列中的基序列中的GY（Gly-Tyr)是其定位于溶酶体膜的关键，否是其定位于溶酶体膜的关键，否则将被转移到质膜上。则将被转移到质膜上。o 溶酶体膜蛋白的溶酶体膜蛋白的C-端常具有和质膜蛋白类似的端常具有和质膜蛋白类似的YXX 和和L （ 为疏水为疏水aa）序列，说明它们可能是利用相似的序列插入）序列，说明它们可能是利用相似的序列插入膜内，通过内吞体进入溶酶体的。膜内，通过内吞体进入溶酶体的。3 3。待降解蛋白进入溶酶体信号：。待降解蛋白进入溶酶体信号：o 蛋白质降

25、解是细胞内的重要事件，溶酶体是一个重要的蛋白质降解是细胞内的重要事件，溶酶体是一个重要的承担者。承担者。o 需要进入溶酶体降解的蛋白质具有的特定信号序列是：需要进入溶酶体降解的蛋白质具有的特定信号序列是：KFERQ或或RIDKQ。o 细胞中带有上述序列的蛋白质约占总量的细胞中带有上述序列的蛋白质约占总量的1/3，新生蛋，新生蛋白质结构致密，该序列处于掩蔽状态；而老化蛋白会出白质结构致密，该序列处于掩蔽状态；而老化蛋白会出现结构变化而使现结构变化而使KFERQ序列暴露，细胞质内序列暴露，细胞质内Hsp70家家族的族的prp73，能与带有，能与带有KFERQ序列的蛋白结合，并介序列的蛋白结合，并介

26、导细胞质老化蛋白进入溶酶体。导细胞质老化蛋白进入溶酶体。o 有实验显示：细胞中蛋白质选择性进入哺乳动物溶酶体有实验显示：细胞中蛋白质选择性进入哺乳动物溶酶体和酵母液泡，是在饥饿条件下诱导产生的。和酵母液泡，是在饥饿条件下诱导产生的。4 4。酵母中液泡蛋白的定位信号：。酵母中液泡蛋白的定位信号：o 酵母液泡与溶酶体有类似的功能，也存在大量的水解酶，酵母液泡与溶酶体有类似的功能，也存在大量的水解酶，包括羧肽酶包括羧肽酶Y（CPY）、蛋白酶）、蛋白酶A和和B、二氨肽酶等，、二氨肽酶等，他们的定位信号不是他们的定位信号不是Man-6-P，而是一些亲水性的肽段，而是一些亲水性的肽段介导。介导。o 例如：

27、例如： CPY的定位与原肽区域内的肽段的定位与原肽区域内的肽段QRPL有关，有关，进入液泡后，该序列将因为相应的原肽被切除而激活。进入液泡后，该序列将因为相应的原肽被切除而激活。（四）线粒体蛋白质的分拣和投送（四）线粒体蛋白质的分拣和投送o 线粒体线粒体90以以上的蛋白质是上的蛋白质是先在细胞质内先在细胞质内以前体形式合以前体形式合成，再通过特成，再通过特定方式投送入定方式投送入线粒体的。线粒体的。（折叠和解折（折叠和解折叠）叠）1 1。线粒体蛋白的投送：。线粒体蛋白的投送：o 线粒体的蛋白质是在核糖体上合成之后，在分子伴侣线粒体的蛋白质是在核糖体上合成之后，在分子伴侣Hsp70、MSF 等的

28、帮助下，识别线粒体表面受体，并等的帮助下，识别线粒体表面受体，并以近似伸展状态跨越线粒体膜孔道。以近似伸展状态跨越线粒体膜孔道。o 其中其中Hsp70和和MSF的机制不同：的机制不同：Hsp70直接与直接与Tom20/22接触，然后与外膜孔道接触，然后与外膜孔道Tom40作用，使蛋白在内外膜接作用，使蛋白在内外膜接触点跨膜；而触点跨膜；而MSF则先与则先与Tom31/70结合，然后再转给结合，然后再转给Tom20/22。o 接触点处外膜的孔道是接触点处外膜的孔道是Tom20/22诱导的诱导的 Tom40，而内，而内膜孔道是膜孔道是Tim44结合的结合的Tim23/17。MSFMSFMSF1a1

29、b3b23a452 2。有三类不同的线粒体蛋白以不同的方式被转送：。有三类不同的线粒体蛋白以不同的方式被转送：2.1 P类蛋白类蛋白： 是可溶性的、定位于基质或内外膜间隙的线粒体蛋白。是可溶性的、定位于基质或内外膜间隙的线粒体蛋白。它们的前体的它们的前体的N-端具有信号肽段，称为端具有信号肽段，称为前序列前序列(presequence)，也曾被称为，也曾被称为导肽导肽（leading peptide）。）。o 定位于基质的蛋白定位于基质的蛋白：属其中一个亚类。如啤酒酵母中的：属其中一个亚类。如啤酒酵母中的细胞色素氧化酶的亚基细胞色素氧化酶的亚基IV（COX IV）。）。o 定位于内、外膜的间隙

30、的蛋白定位于内、外膜的间隙的蛋白：是另一亚类，除了有前：是另一亚类，除了有前序列，紧接着还有一段被认为是分拣信号的疏水的肽段。序列，紧接着还有一段被认为是分拣信号的疏水的肽段。如细胞色素如细胞色素C1、细胞色素、细胞色素b2、F0ATP酶的亚基酶的亚基9等。分等。分拣信号在蛋白质正确定位后也被切除。拣信号在蛋白质正确定位后也被切除。o P类蛋白质的前序列特征：类蛋白质的前序列特征： 都富含酸性残基和带羟基的氨基酸，倾向形成两亲螺都富含酸性残基和带羟基的氨基酸，倾向形成两亲螺旋。在两亲螺旋的一个侧面集中了肽段的所有正电荷。旋。在两亲螺旋的一个侧面集中了肽段的所有正电荷。这样的两亲螺旋具有一定的膜

31、活性，易于插入脂双层中，这样的两亲螺旋具有一定的膜活性，易于插入脂双层中，并给脂双层一定的扰动并给脂双层一定的扰动。 线粒体线粒体P类蛋白的定位：类蛋白的定位：2.2 A2.2 A类蛋白质：类蛋白质：o 是定位在外膜或内膜上的线粒体蛋白，是定位在外膜或内膜上的线粒体蛋白， 如如ADP-ATP的的载体载体(AAC)、孔蛋白、孔蛋白(porin)等。等。o 没有前序列，分拣信号存在于肽链内部，可能是空间构没有前序列，分拣信号存在于肽链内部，可能是空间构象中的某一区域，构成这一区域的肽段分散在整个肽链象中的某一区域，构成这一区域的肽段分散在整个肽链不同地方。不同地方。o 这类蛋白质中存在多个可以穿越

32、膜的肽段，在受体和第这类蛋白质中存在多个可以穿越膜的肽段，在受体和第一个穿越膜的肽段结合后，就进一步促使了其余的肽段一个穿越膜的肽段结合后，就进一步促使了其余的肽段定位在膜上，加快了整个转送过程。定位在膜上，加快了整个转送过程。 2.3 C2.3 C类蛋白质：类蛋白质：o 线粒体线粒体C类蛋白即细胞色素类蛋白即细胞色素C。它和前两类不同，成熟的蛋白质含有血红素，而前它和前两类不同，成熟的蛋白质含有血红素，而前体蛋白质是脱辅基的蛋白质。体蛋白质是脱辅基的蛋白质。o 在线粒体的外膜上有一些和前体高度亲和的结合位点，在线粒体的外膜上有一些和前体高度亲和的结合位点，只要有脱辅基前体中的只要有脱辅基前体

33、中的l-38这段肽链，就能使肽链自发这段肽链，就能使肽链自发的插入并进入人造的膜，肽链其它部分都和转送活性无的插入并进入人造的膜，肽链其它部分都和转送活性无关。关。o 前体肽链的前体肽链的N-端，在前体通过线粒体外膜的过程或随端，在前体通过线粒体外膜的过程或随后就和血红素发生共价的结合，由存在于外膜内侧的细后就和血红素发生共价的结合，由存在于外膜内侧的细胞色素血红素裂合酶催化，这一结合有利于整个肽链穿胞色素血红素裂合酶催化，这一结合有利于整个肽链穿越线粒体外膜。如果缺少这个裂合酶，前体的进入就会越线粒体外膜。如果缺少这个裂合酶，前体的进入就会变得很慢。因此认为外膜上的受体和这裂合酶很接近，变得

34、很慢。因此认为外膜上的受体和这裂合酶很接近，很可能以某种方式与它偶联。很可能以某种方式与它偶联。 线粒体线粒体C类（类（a）和）和A类（类（b）蛋白的转运：）蛋白的转运：（五）叶绿体蛋白质的分拣和投送（五）叶绿体蛋白质的分拣和投送o 植物叶绿体的结构类似于线粒体，但更为复杂。植物叶绿体的结构类似于线粒体，但更为复杂。o 一些进入叶绿体类囊体膜的蛋白，采用与进入线粒体一些进入叶绿体类囊体膜的蛋白，采用与进入线粒体内外抹间隙的内外抹间隙的P类蛋白相似的机制：具有类蛋白相似的机制：具有2-3个信号肽个信号肽序列；在内外膜接触点处穿膜；进入基质后切除导向序列；在内外膜接触点处穿膜；进入基质后切除导向基

35、质序列，然后再利用第二段信号肽进入类囊体腔。基质序列，然后再利用第二段信号肽进入类囊体腔。o 但是蛋白进入类囊体膜的受体可能不相同但是蛋白进入类囊体膜的受体可能不相同 。例如质蓝。例如质蓝素和一种金属结合蛋白进入类囊体膜时，各有特点：素和一种金属结合蛋白进入类囊体膜时，各有特点： 不同蛋白质进不同蛋白质进入类囊体腔的示入类囊体腔的示意图意图前体蛋白前体蛋白Toc75通道通道基质蛋白基质蛋白类囊体类囊体膜蛋白膜蛋白multiple transmembranehelices in a single polypeptidehave only one transmembranehelix; the a

36、mino-terminal domain is outside the cell in typeI proteins and inside in type II.transmembranedomains of several different polypeptides assemble to forma channel through the membrane.Type V proteins are held to the bilayer primarily by covalently linked lipids； and typeVI proteins have both transmem

37、brane helices and lipid (GPI) anchors.（六）蛋白质在质膜上的定位（六）蛋白质在质膜上的定位 I型型：C端在胞质，端在胞质，N-端或在胞外，或者在细胞器前面一侧。端或在胞外，或者在细胞器前面一侧。 I II III IV V VI 1。穿膜蛋白质肽段的定位情况：。穿膜蛋白质肽段的定位情况：不同穿膜蛋白在膜上的定位过程：不同穿膜蛋白在膜上的定位过程：C端带较多端带较多正电荷正电荷I型型N端带较多端带较多正电荷正电荷II型型存在多个穿膜信号，存在多个穿膜信号，奇数疏水肽段为起始，奇数疏水肽段为起始，偶数为终止信号偶数为终止信号o 蛋白质的膜定位依赖于肽链内部的一

38、段或多个疏水序列，蛋白质的膜定位依赖于肽链内部的一段或多个疏水序列，根据序列存在的部位、数量不同，蛋白将以不同形式折根据序列存在的部位、数量不同，蛋白将以不同形式折叠于膜上。叠于膜上。o 存在多个穿膜信号时，疏水肽段中出现顺序为奇数的疏存在多个穿膜信号时，疏水肽段中出现顺序为奇数的疏水肽段为起始信号，偶数则为终止信号。水肽段为起始信号，偶数则为终止信号。o 几乎所有的膜蛋白最初都是在内质网膜内定位的，然后几乎所有的膜蛋白最初都是在内质网膜内定位的，然后通过小泡转运，在通过小泡转运，在Ran蛋白家族的引导下到达预定的细蛋白家族的引导下到达预定的细胞器或质膜，最后融合到需要的膜部位。胞器或质膜，最

39、后融合到需要的膜部位。2。利用。利用GPI锚钩定位的蛋白：锚钩定位的蛋白：o 此类蛋白一般在此类蛋白一般在C-端存在疏水的端存在疏水的GPI化信号序列，并化信号序列，并借此序列插在膜中，在借此序列插在膜中，在GPI转酰肽酶作用下，在信号序转酰肽酶作用下，在信号序列末端切断肽链并转移到已合成的列末端切断肽链并转移到已合成的GPI锚钩上。锚钩上。3。利用脂肪链定位：。利用脂肪链定位：o 相当一部分膜上蛋白是利用各种脂肪链修饰定位在膜上相当一部分膜上蛋白是利用各种脂肪链修饰定位在膜上o 脂肪链修饰方式何特征为：脂肪链修饰方式何特征为：o 豆蔻酰化：修饰部位一般在豆蔻酰化：修饰部位一般在N-端的端的G

40、ly上，修饰或定位上，修饰或定位序列为序列为MGXXS/T/G。o 异戊二烯化和甲酯化：修饰部位一般在肽链的异戊二烯化和甲酯化：修饰部位一般在肽链的C-端倒端倒数第四位的数第四位的Cys上，被接上异戊二烯后，上，被接上异戊二烯后，C-端三肽被切端三肽被切除，异戊二烯化的除，异戊二烯化的Cys羧基还将被甲酯化。羧基还将被甲酯化。o 棕榈酰化：一般是真核细胞或病毒中的蛋白，发生在棕榈酰化：一般是真核细胞或病毒中的蛋白，发生在蛋白质蛋白质C-端或端或N-端的端的Cys上。并且相当一部分是双重脂上。并且相当一部分是双重脂质化：质化：C-端附近的端附近的S-棕榈酰化和异戊二烯化；或棕榈酰化和异戊二烯化；

41、或N-端端附近附近S-棕榈酰化和棕榈酰化和N-豆蔻酰化，个别为豆蔻酰化，个别为N-端附近端附近S-棕棕榈酰化和榈酰化和N-棕榈酰化。棕榈酰化。4。原核细胞中蛋白质的膜定位：。原核细胞中蛋白质的膜定位：o 原核细胞中蛋白质的膜定位情况与真核不同：新生肽链原核细胞中蛋白质的膜定位情况与真核不同：新生肽链的信号肽倾向于转变为的信号肽倾向于转变为 结构，插入膜中则成为结构，插入膜中则成为 螺旋：螺旋：穿膜复合物穿膜复合物o 原核细胞没有内膜系统，但革兰氏阴性菌有内外两层膜，原核细胞没有内膜系统，但革兰氏阴性菌有内外两层膜，定位于外膜定位于外膜(OM)的蛋白质可能以三种不同方式定位：的蛋白质可能以三种不

42、同方式定位：A: 在细胞质中合成的蛋白，先形成转运小泡，进入内外膜在细胞质中合成的蛋白，先形成转运小泡，进入内外膜之间的周质后，再与外膜融合并定位其上；之间的周质后，再与外膜融合并定位其上；B：先穿越内膜到周质，：先穿越内膜到周质， 再定位于外膜；再定位于外膜；C：直接通过内外膜结：直接通过内外膜结 合部（合部（Bayer氏斑），氏斑）， 定位于外膜。定位于外膜。（七）蛋白质的核定位：（七）蛋白质的核定位：1.蛋白质进入核内的信号蛋白质进入核内的信号和定位：和定位：o 分子量小于分子量小于40kDa（至少（至少不大于不大于65kDa）、直径小）、直径小于于23nm的蛋白质可以扩的蛋白质可以扩散

43、的方式进入核内，迁移散的方式进入核内，迁移速度与大小成反比；速度与大小成反比；o 组蛋白组蛋白的进入需要专门受的进入需要专门受体介导；体介导；o 其它大分子量蛋白其它大分子量蛋白进入需进入需要有特定的要有特定的核定位序列核定位序列（NLS） 核孔复合物（核孔复合物（NPCNPC）：）：o NPC是核运输的孔道，总是核运输的孔道，总分子量约分子量约125MDa，外径，外径120nm，核孔有效直径和，核孔有效直径和长度都是长度都是50nm左右。左右。o 一些核孔蛋白的特征是富一些核孔蛋白的特征是富含含Phe和和Gly，序列为，序列为FXFG或或GLFG，称，称FG重重复复 序列序列，是，是 输入蛋

44、白的输入蛋白的 亚基等转运受体的结合位亚基等转运受体的结合位点。点。 NLS的基本特征的基本特征o 10个个aa左右；富含碱性左右；富含碱性aa（尤其是（尤其是Lys）和亲水）和亲水aa；o 末端常包含一个末端常包含一个Pro或或Gly，如如PKKKRKV（SV40病毒病毒大大T抗原）、抗原）、PKKARED或或VSRKRPR（多瘤病毒（多瘤病毒T抗原）；抗原）；o 提示该序列不一定位于末提示该序列不一定位于末端，通常应位于蛋白表面端，通常应位于蛋白表面或球蛋白的转角处。或球蛋白的转角处。 输入蛋白（输入蛋白（importinimportin）：）：o 是蛋白质输入的载体是蛋白质输入的载体o

45、由由 和和 两个亚基构成的两个亚基构成的异二聚体，异二聚体， 亚基识别入亚基识别入核蛋白的核蛋白的NLS， 亚基识亚基识别核孔胞质侧纤毛，以及别核孔胞质侧纤毛，以及核孔蛋白。核孔蛋白。o 入孔时的停靠位点是：入孔时的停靠位点是：大鼠：核孔蛋白大鼠：核孔蛋白p62/p54/p52酵母：酵母：Nup1和和Nsp1o 入核的过程：入核的过程： Pr- NLS 转运复合物转运复合物 转运转运Pr-亚基亚基 停泊在停泊在NPC纤毛上纤毛上 转运转运Pr- 亚基亚基 纤毛摆动纤毛摆动 核质核质 Ran - GTP 转运复合物解离转运复合物解离 Pr释放释放 NPCNPC Ran为为Ras相关核蛋白，是小的

46、相关核蛋白，是小的GTP酶。酶。Ran-GDP帮助蛋白入核；帮助蛋白入核；Ran-GTP介导空载介导空载 亚基出核。亚基出核。o 细胞核内也有部分物质需要被输出核外，包括核酸分子、细胞核内也有部分物质需要被输出核外，包括核酸分子、非蛋白类分子、蛋白质等。非蛋白类分子、蛋白质等。o 核输出蛋白质存在一些特定的核输出蛋白质存在一些特定的出核序列出核序列（NES），多数是），多数是含有含有Leu的模体的模体， 还要依赖还要依赖输出蛋白输出蛋白(exportin)的帮助。的帮助。o 从核内输出到细胞质的核酸（包括从核内输出到细胞质的核酸（包括tRNA、微小、微小RNA前体前体和小螺旋和小螺旋RNA等）

47、也具有出核信号，当与输出蛋白结合后，等）也具有出核信号，当与输出蛋白结合后，在在GDP-Ran的帮助下，完成通过核孔的过程。的帮助下，完成通过核孔的过程。o 核孔不仅是物质运输的通道，也参与基因表达、细胞凋亡核孔不仅是物质运输的通道，也参与基因表达、细胞凋亡和分泌等过程，使通过调节和分泌等过程，使通过调节NPC成分（成分（Nup153、CAN和和Nup38）的磷酸化）的磷酸化/去磷酸化，或被胱天蛋白酶降解等实现去磷酸化，或被胱天蛋白酶降解等实现的。的。2。核输出信号及其有关蛋白：。核输出信号及其有关蛋白：（八）蛋白质在过氧化体内的定位（八）蛋白质在过氧化体内的定位o 过氧化体是除去细胞过氧化氢

48、的细胞器，此外一些脂过氧化体是除去细胞过氧化氢的细胞器，此外一些脂质、固醇、嘌呤也在此降解。质、固醇、嘌呤也在此降解。o 进入过氧化体的肽链，其进入过氧化体的肽链，其C-端有特定序列，经常是端有特定序列，经常是SKL，尤其其中的尤其其中的Leu是不可取代的。是不可取代的。o 进入过氧化体的蛋白在核糖体合成之后，先折叠成为进入过氧化体的蛋白在核糖体合成之后，先折叠成为天然构象，其天然构象，其C-端的端的SKL信号肽被信号肽被过氧化体靶向序列过氧化体靶向序列1受体受体（PTS1R）专一性识别和结合，并将蛋白质牵引）专一性识别和结合，并将蛋白质牵引到过氧化体膜，与膜上的受体到过氧化体膜，与膜上的受体

49、Pex14p结合，复合物进结合，复合物进入细胞器内。随后复合物解离，结合蛋白入细胞器内。随后复合物解离，结合蛋白PTS1R返回返回细胞质，循环使用。细胞质，循环使用。o 除了除了Pex14p外，还有至少外，还有至少21种与过氧化体定位相关的种与过氧化体定位相关的蛋白，蛋白，Pex1p-22p.蛋白质在蛋白质在过氧化氢体过氧化氢体内的定位内的定位（九）蛋白质在细胞质内的滞留信号（九）蛋白质在细胞质内的滞留信号o 迄今为止，对何种序列决定了蛋白质滞留在细胞质内迄今为止，对何种序列决定了蛋白质滞留在细胞质内还知之甚少。有两种看法：还知之甚少。有两种看法：o 一是：不含任何信号序列的蛋白合成后留在胞质

50、；一是：不含任何信号序列的蛋白合成后留在胞质； 二是：相当多的细胞质滞留蛋白其二是：相当多的细胞质滞留蛋白其N-端是被酰化的，端是被酰化的，但酰化是否为细胞质滞留信号，还有待进一步确定。但酰化是否为细胞质滞留信号，还有待进一步确定。（十）蛋白质由胞外进入细胞内的途径（十）蛋白质由胞外进入细胞内的途径1。胞吞作用的不同途径：。胞吞作用的不同途径：1.1 胞吞作用（胞吞作用（endocytosis ): 细胞摄入大分子的作用细胞摄入大分子的作用 吞噬作用（吞噬作用（phagocytosis）：被吞物较大）：被吞物较大o 胞吞作用胞吞作用 吞饮作用（吞饮作用（pinocytosis）：被吞物较小）：

51、被吞物较小o 吞饮作用又有吞饮作用又有4种方式：种方式： 形成笼形蛋白包被小泡（形成笼形蛋白包被小泡（CV）；一般小窝；）；一般小窝； 无外被小泡或小窝（无外被小泡或小窝（NCV）；巨胞）；巨胞 饮体饮体o 研究较多的是笼形蛋白包被方式。研究较多的是笼形蛋白包被方式。循环内吞体循环内吞体内吞载体小泡内吞载体小泡（或多层小泡体）（或多层小泡体）早期内吞体早期内吞体晚期内吞体晚期内吞体12341.2.1 转铁蛋白受体介导的内转铁蛋白受体介导的内吞吞o 特点：特点：1. 为受体介导为受体介导2. 形成笼形蛋白包被小泡形成笼形蛋白包被小泡3. 受体随后释放回细胞表面受体随后释放回细胞表面4. 脱铁转铁

52、蛋白亦被释放脱铁转铁蛋白亦被释放和循环使用。和循环使用。1.2 进入细胞后的内吞体还进入细胞后的内吞体还 可经可经4种不同的方式处理：种不同的方式处理：1.2.2 LDL受体介导的内吞受体介导的内吞o 特点：特点：1. 为受体介导为受体介导2. 形成笼形蛋白包被小泡形成笼形蛋白包被小泡3. 受体随后释放回细胞表受体随后释放回细胞表面（受体中存在面（受体中存在FDNPVY序列负责受体序列负责受体的聚集和内化）的聚集和内化）笼形蛋白笼形蛋白1.2.3 重新定位方式重新定位方式o 特点：特点：1. 为受体介导为受体介导2. 内吞后，受体和配体内吞后，受体和配体一起被运到质膜的特一起被运到质膜的特定部

53、位，是配体重新定部位，是配体重新定位的过程。定位的过程。1.2.3 生长因子类受体介导的内吞生长因子类受体介导的内吞o 特点：特点：1. 受体和配体结合是信号转导的过程；受体和配体结合是信号转导的过程；2. 内吞后，受体和配体共同进入溶酶体，并均被降解。内吞后，受体和配体共同进入溶酶体，并均被降解。2。内吞后的分拣信号：。内吞后的分拣信号：o 细胞进入内吞体细胞进入内吞体-溶酶体途径的信号也有不同，大体分溶酶体途径的信号也有不同，大体分为为4类：类：（1）含）含Tyr模体：模体：NPXY和和YXX （2）含双）含双Leu型模体：型模体：D/EXXXL/I和和DXXLL（3）其它信号模体：多数为

54、）其它信号模体：多数为TGN和内吞体和内吞体 之间的往返蛋白之间的往返蛋白（4）泛肽信号：参与内吞时其）泛肽信号：参与内吞时其63号号Lys可被可被 多泛肽化；在蛋白体内降解时是多泛肽化；在蛋白体内降解时是 在第在第48号号Lys上。上。蛋白自身蛋白自身固有信号固有信号 标记信号标记信号APAP：衔接蛋白，指能识别泛肽并与之结合的蛋白。不同类型的：衔接蛋白，指能识别泛肽并与之结合的蛋白。不同类型的APAP蛋白都具有：蛋白都具有：3 3个相似的亚基个相似的亚基 、 和和 ；一个各自特有的亚基；一个各自特有的亚基 （AP2AP2）、）、 （AP1AP1）、）、 （AP3AP3）和和 （AP4AP4

55、）。这些）。这些APAP蛋白都和笼形蛋白相作用，以便打包和投送。蛋白都和笼形蛋白相作用，以便打包和投送。三、蛋白质寿命和限制性降解体系三、蛋白质寿命和限制性降解体系（一）蛋白质降解的基本概念：（一）蛋白质降解的基本概念：o 生物体内蛋白质的降解是重要的生理生化过程。生物体内蛋白质的降解是重要的生理生化过程。o 蛋白质降解包含的内容是多方面的，包括：蛋白质降解包含的内容是多方面的，包括：（1）食物的消化）食物的消化（2）细胞内蛋白质的新陈代谢（老化蛋白的降解）细胞内蛋白质的新陈代谢（老化蛋白的降解）（3）合成或加工过程中的）合成或加工过程中的“次品次品”的处理的处理质量控制质量控制（4）作为功能

56、调节的蛋白质限制性降解）作为功能调节的蛋白质限制性降解（二）蛋白质的寿命及相关规则：（二）蛋白质的寿命及相关规则：o 细胞内绝大多是蛋白质的降解服从一级反应动力学。细胞内绝大多是蛋白质的降解服从一级反应动力学。o 蛋白质半衰期介于几十秒到百余天之间，多数在蛋白质半衰期介于几十秒到百余天之间，多数在70-80天，天，但并不是恒定的，而是与细胞的生理状态相关。但并不是恒定的，而是与细胞的生理状态相关。o N-端规则端规则：蛋白质的寿命与蛋白质的：蛋白质的寿命与蛋白质的N-端残基性质有相端残基性质有相关性。关性。N-端端aa为：为：D、R、L、K和和F：半衰期为：半衰期为2-3分钟；分钟；A、G、M

57、和和V：半衰期超过：半衰期超过10 hr(原核原核)；超过；超过20 hr(真核）真核）o PEST假设假设：含该序列的蛋白质，在细胞中会很快被降解：含该序列的蛋白质，在细胞中会很快被降解 一些氨基酸脱一些氨基酸脱羧酶中的羧酶中的PETS模体定位模体定位（三）蛋白质的降解场所和降解体系：（三）蛋白质的降解场所和降解体系：1。溶酶体和组织蛋白酶（。溶酶体和组织蛋白酶（cathepsin)：1.1 溶酶体降解：溶酶体降解：胞外蛋白胞外蛋白：血浆蛋白、激素蛋白、质膜上的受体蛋白等，：血浆蛋白、激素蛋白、质膜上的受体蛋白等， 几乎几乎 都是通过胞吞方式进入溶酶体降解。都是通过胞吞方式进入溶酶体降解。

58、自体吞噬自体吞噬(autophgy): 内部组分吞噬内部组分吞噬 非选择性非选择性 分泌自噬分泌自噬(crinophy): 过剩分泌颗粒降解过剩分泌颗粒降解 胞内蛋白胞内蛋白 选择性：由选择性：由KFERQ信号介导，在营养充足细胞中信号介导，在营养充足细胞中 此途径关闭，只用非选择途径。此途径关闭，只用非选择途径。 溶酶体主要降解胞外和质膜蛋白，正常情况下在胞内蛋白溶酶体主要降解胞外和质膜蛋白，正常情况下在胞内蛋白 质周转过程中不起作用。质周转过程中不起作用。1.2 组织蛋白酶：组织蛋白酶：o 溶酶体内的蛋白酶通常被称为组织蛋白酶，但这些酶类溶酶体内的蛋白酶通常被称为组织蛋白酶，但这些酶类也可

59、能存在于其它组织中。包括两类：也可能存在于其它组织中。包括两类：o 酸性蛋白酶酸性蛋白酶：包括组织蛋白酶：包括组织蛋白酶D和和E等。等。 D型分布较广，多数以水溶形式存在于溶酶体，只型分布较广，多数以水溶形式存在于溶酶体，只有有20%为膜结合型；为膜结合型；E是二硫键结合的二聚体糖蛋白，是二硫键结合的二聚体糖蛋白，42kDa，仅存在于淋巴样组织、肠胃道、血细胞，溶酶，仅存在于淋巴样组织、肠胃道、血细胞，溶酶体内极少，不同组织中糖链结构不同体内极少，不同组织中糖链结构不同 。o 巯基蛋白酶巯基蛋白酶：包括组织蛋白酶：包括组织蛋白酶B（二肽羧肽酶）、（二肽羧肽酶）、H（氨肽酶）、（氨肽酶）、L和和

60、S（内肽酶）等。多数分子量为（内肽酶）等。多数分子量为24-35kDa，且分布较广，但组织蛋白酶，且分布较广，但组织蛋白酶S仅存于与仅存于与II类类MHC有关的抗原提呈细胞。有关的抗原提呈细胞。2。细胞质中的蛋白酶和有关体系：。细胞质中的蛋白酶和有关体系：2.1 蛋白体和细胞质内依赖于蛋白体和细胞质内依赖于ATP的蛋白酶的蛋白酶泛肽泛肽-蛋白蛋白连接酶连接酶（E1）（E2）（E3）真核真核26S：有盖的中空圆桶，有盖的中空圆桶，1116 19S帽含有帽含有6种不同的种不同的ATP酶，特异地识别被泛肽连接的蛋白；酶，特异地识别被泛肽连接的蛋白；20S核心中的两个核心中的两个 亚基环是蛋白降解的场