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文档简介
1、实验四、五、六实验四、五、六 果蝇的杂交果蝇的杂交o一、实验目的一、实验目的 1 1、掌握果蝇的杂交技术;、掌握果蝇的杂交技术; 2 2、记录交配结果和掌握统计处理方、记录交配结果和掌握统计处理方法;法; 3 3、验证和加深理解遗传的基本规律。、验证和加深理解遗传的基本规律。二、实验内容及方法二、实验内容及方法 o实验杂交的雌蝇应为处女蝇实验杂交的雌蝇应为处女蝇 获得处女蝇的方法:将已孵化出的果蝇从获得处女蝇的方法:将已孵化出的果蝇从培养瓶中全部移出,以后培养瓶中全部移出,以后1212小时内孵化出的小时内孵化出的雌蝇为处女蝇,可分别收集作杂交亲本用。雌蝇为处女蝇,可分别收集作杂交亲本用。 如能
2、在如能在1010小时内收集更可靠;一般于前一小时内收集更可靠;一般于前一晚晚8 8点将所有果蝇从培养瓶中移出,第二天点将所有果蝇从培养瓶中移出,第二天早上早上8 8点收集到的雌蝇均为处女蝇。点收集到的雌蝇均为处女蝇。 ( (一一) )分离规律的验证分离规律的验证一对因子的杂一对因子的杂 交和测交实验交和测交实验 o 选取具有一对相对性状的果蝇,如长翅与残翅选取具有一对相对性状的果蝇,如长翅与残翅杂交,观察后代中这一对相对性状的遗传表现,杂交,观察后代中这一对相对性状的遗传表现,从而验证孟德尔分离规律。从而验证孟德尔分离规律。o F2: 理论比数 长翅:残翅长翅:残翅=3=3:1 1 实际比数符
3、合程度需实际比数符合程度需X X2 2测验测验实验步骤实验步骤 (1)(1)选取残翅处女蝇与野生型雄蝇各选取残翅处女蝇与野生型雄蝇各3 35 5只作为亲本,放只作为亲本,放入培养基瓶中,贴好标签(注明杂交组合、日期及实入培养基瓶中,贴好标签(注明杂交组合、日期及实验者姓名)。第二天检查亲本的情况,如有死亡给予验者姓名)。第二天检查亲本的情况,如有死亡给予补充处理。补充处理。(2)7(2)78 8天后移出全部亲本,观察核对亲本的性状。天后移出全部亲本,观察核对亲本的性状。 (3) (3) 待培养瓶中成蝇孵出后,检查待培养瓶中成蝇孵出后,检查F1F1代的有关性状。每代的有关性状。每2 23 3天检
4、查一次,并作记录,共检查天检查一次,并作记录,共检查3 3次,约次,约4040100100只,检查后的果蝇移去处理。只,检查后的果蝇移去处理。(4)(4)选取选取F1F1代果蝇代果蝇3 35 5对移入新培养瓶中,进行兄妹交配对移入新培养瓶中,进行兄妹交配繁殖。繁殖。( (此时不一定用处女蝇,为什么此时不一定用处女蝇,为什么?)?) 同时选同时选F1F1代的处女蝇与隐性亲本的雄蝇代的处女蝇与隐性亲本的雄蝇( (残翅型残翅型) )各各3 35 5只,移入另一个新培养瓶中,进行测交实验。只,移入另一个新培养瓶中,进行测交实验。 (5)75)78 8天后,从以上两组杂交的培养瓶中分天后,从以上两组杂交
5、的培养瓶中分别移出亲蝇,然后对各瓶中孵出的别移出亲蝇,然后对各瓶中孵出的F2F2代果蝇代果蝇记录不同类型的数目,每隔记录不同类型的数目,每隔1 1天检查一次,天检查一次,检查计数的果蝇应立即移去处理,如此连续检查计数的果蝇应立即移去处理,如此连续统计统计3 34 4次,约需次,约需6060120120只。只。 将统计的将统计的F1F1和和F2F2代个体数目,填写入下列代个体数目,填写入下列表内:表内: ( (二二) )自由组合规律的验证自由组合规律的验证两对因子的两对因子的杂交实验杂交实验o 选取具有非同一连锁群的两对相对性状的果蝇,如长翅选取具有非同一连锁群的两对相对性状的果蝇,如长翅黑擅体
6、与残翅灰身杂交,观察后代中这两对相对性状的黑擅体与残翅灰身杂交,观察后代中这两对相对性状的遗传表现,从而验证孟德尔自由组合规律。遗传表现,从而验证孟德尔自由组合规律。 实验步骤实验步骤 (1)(1)选取灰身长翅的处女蝇与黑擅体残翅的雄蝇各选取灰身长翅的处女蝇与黑擅体残翅的雄蝇各4 45 5只,放入装好饲料的培养瓶中,瓶外贴好标签,注只,放入装好饲料的培养瓶中,瓶外贴好标签,注明杂交组合、日期及实验者姓名等,第二天要检查明杂交组合、日期及实验者姓名等,第二天要检查亲本成活的情况。亲本成活的情况。(2)7(2)78 8天后移出亲本,并观察核对亲本的性状。天后移出亲本,并观察核对亲本的性状。(3)(
7、3)待出现待出现F2F2成蝇后,观察有关性状的表现及数量。以成蝇后,观察有关性状的表现及数量。以后每隔两天统计记录一次,要求达到后每隔两天统计记录一次,要求达到6060120120只。只。检查记录过的果蝇要及时移去处理。检查记录过的果蝇要及时移去处理。(4)(4)取取F1F1雌雄蝇雌雄蝇4 45 5对移入一个新培养瓶中,使其交配对移入一个新培养瓶中,使其交配繁殖。繁殖。 ( (5)75)78 8天后移出天后移出F1F1雌雄蝇,待雌雄蝇,待F2F2成蝇孵出后,每隔两天成蝇孵出后,每隔两天观察统计记录一次,要求统计到观察统计记录一次,要求统计到6060150150只,将结果填只,将结果填写入下表:
8、写入下表:(6)(6)用用2 2卡平方法检测实验结果卡平方法检测实验结果 ( (三三) ) 伴性遗传实验伴性遗传实验a a正交正交 (1)(1)选取野生型处女蝇与白眼雄蝇各选取野生型处女蝇与白眼雄蝇各3 35 5只,放入新培只,放入新培养瓶中,贴好标签,注明杂交组合、日期和实验者姓养瓶中,贴好标签,注明杂交组合、日期和实验者姓名。名。 (2) 7(2) 78 8天后移去亲本蝇,并核对其性状。天后移去亲本蝇,并核对其性状。 (3) (3) 待待F1F1成蝇孵出后,成蝇孵出后, 每隔两天取出观察与统计一每隔两天取出观察与统计一次,共次,共4 45 5次。统计过的果蝇移去处理。次。统计过的果蝇移去处
9、理。 (4) (4) 另取另取3 35 5对对FlFl雌、雄蝇放入新培养瓶中,使其繁雌、雄蝇放入新培养瓶中,使其繁殖。同时选取殖。同时选取FlFl红眼处女蝇与亲本白眼雄蝇各红眼处女蝇与亲本白眼雄蝇各3 35 5只,只,放入另一新培养瓶中进行回交。放入另一新培养瓶中进行回交。 (5) (5) 检查检查F2F2及及BF1BF1的果蝇表现型,按性别及眼色的红白的果蝇表现型,按性别及眼色的红白分别鉴定,将统计数字填写入下列表中:分别鉴定,将统计数字填写入下列表中: b b反交反交 选用白眼处女蝇与野生型雄蝇做亲本,采取选用白眼处女蝇与野生型雄蝇做亲本,采取和上述相同的步骤进行杂交、兄妹交与回交,和上述
10、相同的步骤进行杂交、兄妹交与回交,观察并统计其结果,与正交的结果作一比较观察并统计其结果,与正交的结果作一比较和说明。和说明。 “三隐三隐”果蝇新品系的应用果蝇新品系的应用 果蝇用于遗传学实验教学,但原有的果果蝇用于遗传学实验教学,但原有的果蝇品系只具有单个隐性性状的个体,因蝇品系只具有单个隐性性状的个体,因此用来做杂交实验需要做数个杂交组合,此用来做杂交实验需要做数个杂交组合,费时费事。费时费事。 为了解决这个问题,我们通过杂交选为了解决这个问题,我们通过杂交选育,培育出育,培育出“三隐三隐”果蝇新品系果蝇新品系。“三三隐隐”果蝇品系具有集三个隐性性状于一果蝇品系具有集三个隐性性状于一身的特
11、点,使得遗传实验操作简单化。身的特点,使得遗传实验操作简单化。果蝇用于验证基因的遗传规律:果蝇单因子果蝇用于验证基因的遗传规律:果蝇单因子杂交实验;双因子杂交实验;伴性遗传实验杂交实验;双因子杂交实验;伴性遗传实验 如果用单个隐性性状的果蝇做亲本进行上如果用单个隐性性状的果蝇做亲本进行上述实验,要做三个杂交组合实验:述实验,要做三个杂交组合实验:(1 1)长翅)长翅残翅;残翅;(2 2)灰体、长翅)灰体、长翅黑檀体、残翅;黑檀体、残翅;(3 3)红眼)红眼白眼。白眼。 在近两个月的实验时间内观察在近两个月的实验时间内观察3 3个实验现象,个实验现象,很费时费事,同时还会导致培养设备资源的很费时
12、费事,同时还会导致培养设备资源的不足。不足。 如果用如果用“三隐三隐”果蝇品系做上述那些实验,只需果蝇品系做上述那些实验,只需做一个杂交组合:做一个杂交组合:正交:红眼、灰体、长翅正交:红眼、灰体、长翅 白眼、黑檀体、残翅白眼、黑檀体、残翅或反交:红眼、灰体、长翅或反交:红眼、灰体、长翅白眼、黑檀体、残翅白眼、黑檀体、残翅 通过这一个实验同时进行上述通过这一个实验同时进行上述3 3个实验的观察(个实验的观察(各取所需各取所需):): 当做单因子杂交实验时,只看残翅和长翅这对性状的表当做单因子杂交实验时,只看残翅和长翅这对性状的表现,忽视白眼、红眼和黑檀体、灰体性状的存在;现,忽视白眼、红眼和黑
13、檀体、灰体性状的存在; 当做双因子实验时,只看黑檀体、灰体和残翅、长翅这当做双因子实验时,只看黑檀体、灰体和残翅、长翅这两对性状的表现,忽视白眼、红眼性状的存在;两对性状的表现,忽视白眼、红眼性状的存在; 当做伴性遗传实验时,只看红眼、白眼这对性状的表现,当做伴性遗传实验时,只看红眼、白眼这对性状的表现,忽视残翅、长翅和黑檀体、灰体性状的存在。忽视残翅、长翅和黑檀体、灰体性状的存在。 o 由于只做一个杂交组合,只需观察一个由于只做一个杂交组合,只需观察一个实验,相对省时省事;还节省实验材料,实验,相对省时省事;还节省实验材料,解决培养设备资源紧缺的问题解决培养设备资源紧缺的问题。作业:作业:
14、一、实验分组进行,一、实验分组进行,1010人一组,两人做一个杂交组人一组,两人做一个杂交组合。每人要参加全部实验过程,但均有自己侧重负责的合。每人要参加全部实验过程,但均有自己侧重负责的内容,既要充分发挥个人的能力,又要实现同学间的互内容,既要充分发挥个人的能力,又要实现同学间的互补,培养团队精神。实验数据资源共享补,培养团队精神。实验数据资源共享. .组长负责安排、组长负责安排、检查和督促。检查和督促。 在组长安排协调下,每人的实验报告选写上述在组长安排协调下,每人的实验报告选写上述3 3个课个课题中的题中的1 1项项. . 二、各人做好观察记录,根据观察结果写出自己项二、各人做好观察记录
15、,根据观察结果写出自己项目的实验报告。实验报告内容包括实验原理、实验内容、目的实验报告。实验报告内容包括实验原理、实验内容、实验步骤、预期实验结果、实验实得值和统计分析。实验步骤、预期实验结果、实验实得值和统计分析。 三、实验结束后以小组为单位,进行一次三、实验结束后以小组为单位,进行一次PPTPPT交流报交流报告。告。 实验室提供的亲本:实验室提供的亲本:正交:长翅正交:长翅 、灰体、白眼、灰体、白眼 残翅、黑檀体、红眼残翅、黑檀体、红眼反交:长翅反交:长翅 、灰体、白眼、灰体、白眼 残翅、黑檀体、红眼残翅、黑檀体、红眼通过这一个实验同时进行上述通过这一个实验同时进行上述3 3个实验的观察(个实验的观察(各取所需各取所需):): 当做单因子杂交实验时,只看残翅和长翅这对性状的表当做单因子杂交实验时,
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