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文档简介

1、水中细菌总数的测定生物制药二班 五组实验目的1、了解和学习水中细菌总数的测定原理和测定意义2、学习和掌握用稀释平板计数法测定水中细菌总数的方法实验仪器和用具1、纯净水、自来水样品，牛肉膏、蛋白胨、Nacl、琼脂、水、灭菌的锥形瓶、移液枪、枪头、烧杯、玻璃棒、试管、培养皿、瓷缸、微波炉、高压蒸汽灭菌锅、酒精灯实验原理 本实验应用平板计数计数测定水中细菌总数，由于水中细菌种类繁多，它们对营养和其他生长条件的要求差别很大，不可能找到一种培养基在一种条件下使水中所有的细菌均能生长繁殖。因此，从一定的培养基平板上生长出来的菌落计算出来的水中细菌总数仅是一种近似值，目前一般是采用普遍牛肉膏蛋白胨培养基实验

2、内容与步骤一、制备牛肉膏蛋白胨培养基：（1）称量：牛肉膏1g、蛋白胨2g、Nacl1g、琼脂4g、自来水500mL（2）溶解（3）加热煮沸：用瓷缸盛装溶解后的溶液，放在微波炉上加热，并不断搅拌，直至煮沸为止（4）装瓶：用锥形瓶盛培养基，用棉塞塞住瓶口，再用报纸包住瓶口（5）灭菌：将装好的培养基放入高压蒸汽灭菌锅内灭菌二、倍比稀释（1）编号：取4支灭菌试管分别标记纯净水原液、纯净水10倍、自来水原液、自来水10倍。另取12个培养皿分别标记纯净水原液、纯净水10倍、自来水原液、自来水10倍各三个培养皿。（2）取样：取10mL的纯净水放入纯净水原液的试管中，另取10mL的自来水放入自来水原液的试管中。（3）倍比稀释：用灭菌的移液枪吸取纯净水原液1mL,放入纯净水10倍的试管内（注：每吸取一次液体，需要更换移液枪的枪头）然后吸取无菌水9mL放入纯净水10倍的试管内。自来水的倍比稀释也是同理。（4）倒平板：分别取1mL纯净水原液、纯净水0.1、自来水原液、自来水0.1放入编号号的无菌平皿内，并混合均匀，每个稀释度做3个平板，然后在酒精灯周围往每个平皿内倒入融化后并冷却至4550左右的牛肉膏

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