MPN法检测结果的不确定度及其评定

1、 一、测定方法一、测定方法 MPNMPN法:最（大）可能数,应用概率理论来估算细菌浓度的方法 应用现状 食品：大肠菌群、金黄色葡萄球菌、阪崎肠杆菌的 定量检测 生活饮用水：总大肠菌群、耐热大肠菌群和大肠埃 希氏菌的定量检测 粪便无害化：粪大肠菌值 质检、农业、环保等部门的标准方法 检测过程流程图 样品受理取样稀释均质/混匀加样 _ 混匀 加样混匀培养观察转种培养观察确认阳性管查MPN检索表并计算报告 Y= C1/C2MPN （1） Y为样品的大肠菌群含量，其单位为MPN/g(mL)； C1 即国家标准检验方法中MPN检索表的样品加入量： 30.1g(mL)+30.01g(mL)+30.001g

2、(mL) C1=0.333g(mL) C2为检测时的样品加入量,通常为： 31g(mL)+30.1g(mL)+30.01g C2(mL)=3.33g(mL) Y= 0.333/C2MPN （2） 1.MPN检索表中每个MPN值本身的不确定度分量 2.C2的不确定度分量 加样仪器（10 mL和1 mL）的不确定度 3.3.其他其他未能呈现在公式中的不确定度分量不确定度分量 样品的不确定度 称量25g（mL）样品的仪器的不确定度 连续两次（10倍和100倍）稀释引起的不确定度 均质/混匀引起的不确定度 培养引起的不确定度 结果观察产生的不确定度 1.MPN值本身的不确定度 MPN检索表在每个MPN

3、值后附带的该MPN值95%可信限的下限值和上限值 95%的可信限=1.96（为标准偏差或标准不确定度） 扩展不确定度=k标准不确定度(包含因子k通常取值为2) MPN值的95%可信限（上、下限值）就是该MPN值的扩展不确定度（范围值）（k=1.96）例: 样品加入量3.33g（31g+30.1g+30.01g），确认的大肠菌群阳性管组合为3-2-1，则查得其MPN值为150,该MPN值对应的95%可信限的下限值和上限值分别为37和420。 注：相关数据来源于GB 4789.3-2010 食品安全国家标准 食品微生物学检验 大肠菌群计数 UL(下限值)=0.333/C2MPN的95%可信限的下限

4、值 =0.333/3.3337=3.7 UU(上限值)=0.333/C2MPN的95%可信限的上限值 =0.333/3.33420=42 Y=0.333/C2MPN =0.333/3.333150=15 2.C2的不确定度分量 由C2贡献的不确定度分量主要来源于加样仪器（10 mL和1 mL）的不确定度，可按B类评定方法评定，根据以往的评定情况，均比MPN本身的不确定度小很多（小于最大分量的不确定度的1/3），均可忽略不计 3.3.其他其他未能呈现在公式中的不确定度分量不确定度分量 样品的不确定度 称量25g（mL）样品的仪器的不确定度 连续两次（10倍和100倍）稀释引起的不确定度 均质/混匀引起的不确定度 培养引起的不确定度 结果观察产生的不确定度 均可用A类评定的方法，只要操作人员的操作规范，根据以往的评定情况，均比MPN本身的不确定度小很多，均可忽略不计。 U=kuc=2uc MPN值95%的可信限=1.96（标准偏差或标准不确定度） 忽略C2和其它因素引起的不确定度 MPN值的95%可信限可表达为MPN法检测结果的扩展不确定