β2微球蛋白的检测及临床意义

1、2微球蛋白的检测及临床意义    【关键词】  蛋白    2微球蛋白（2-microglobulin，2-M）是一种相对分子量为11 800的蛋白质。2-M存在于除红细胞和胎盘滋养层细胞以外的所有有核细胞表面，特别是淋巴细胞和肿瘤细胞，在免疫应答中起重要作用。    1  生理与生化    2-M是人类白细胞抗原（HLA）类分子的链（轻链部分），因电泳时出现于2区带而得名。2-M是由100个氨基酸组成的单链多肽，它以非共价键与HLA类分子中的重

2、链结合，并参与维持三级结构。2-M分子内含有一对二硫键，不含糖基，等电点（pI）为5.7，半衰期约为107 min。在健康人中2-M以相对稳定的速率合成，约为150200 mg/d，随HLA的更新、代谢、降解释放入体液。因其相对分子量小且不与血浆蛋白结合，可自由地经肾小球滤入原尿，滤过的2-M在近端小管几乎全部被重吸收，吸收率达 99.9%，重吸收的2-M在肾小管上皮细胞中被分解破坏，因此，正常情况下仅有微量2-M向尿中排出。血清中2-M浓度与排泄率和合成两者相关，健康人群其血清浓度相对稳定。尿液中2-M排出量取决于肾小管的重吸收能力和血中2-M浓度。    2&

3、#160; 标本采集与分析前变异    2.1  血液标本  血清、血浆标本皆可，以血清标本为佳。在抽取血液标本后，应尽快分离血清或血浆，在室温不宜超过3 h，分离后的标本4 可保存1周，-20 下可较长时间稳定。    2.2  尿液标本分子量  尿液标本中2-M在pH6.0时很不稳定，2 h内发生变性，即使在膀胱内也是同样的。故尿液标本不宜采集清晨第一次尿（晨尿往往pH6.0），而通常收集在白天任意时间的尿样本。排尿后必须检测pH，必要时可以在盛器内加几滴2 mol/L NaOH使其碱化。如

4、收集24 h尿液标本，宜在采集尿液标本的前1天，给患者服用NaHCO3等碱性药物，使尿液pH6.0，按要求收集的尿液标本放4 可保存4周，-70 可稳定2年，但应避免反复冻融。    3  检测方法    主要采用免疫测定法，目前已报道的测定血清（血浆）及尿液中2-M的方法有多种：包括放射免疫分析法（RIA）、酶联免疫吸附法（ELISA）、时间分辨荧光免疫分析法、免疫透射比浊法、免疫散射比浊法、胶乳免疫散射比浊法、胶乳增强免疫比浊法等。以上方法国内外不少公司推出了商品化试剂盒，具体操作方法详见试剂盒使用说明。 &#

5、160;  4  检测法举例    胶乳增强免疫比浊法。    4.1  原理  2-M与包被在乳胶颗粒上的抗人2-M抗体结合产生浊度，其浊度与2-M浓度成正比。    4.2  试剂盒组成  （1）R1：Tris缓冲液（pH 8.2）。（2）R2：胶乳包被抗人2-M抗体。（3）标准液1瓶。    4.3  标本来源与保存  （1）血清：在2 8 可稳定7天，-20 可稳定3个月。（2）尿液：用K

6、2HPO4调整pH至78，在2 8 可稳定2天，在-20 可稳定2个月。    4.4  注意事项  （1）试剂中含有叠氮钠作保存剂，不要吞入，避免接触皮肤和黏膜。（2）高溶血及脂血样品不适于测定。（3）可适用于自动分析仪。    4.5  参考值范围  （1）血清（血浆）: 1.03.0 mg/L。（2）随机尿: 300 mg/L。 （3）24 h尿：33363 mg/L。    4.6  临床意义    4.6.1

7、0; 血清2-M浓度增高的意义  血清2-M浓度受体内合成速度与尿液排泄率的影响。一些导致2-M合成增加的疾病会使血清2-M浓度升高。肾功能异常导致2-M滤过减少时，血清2-M浓度也会增高。（1）肾功能是影响血清2-M浓度的主要因素。2-M可自由经肾小球滤入原尿，滤过的2-M在近端小管几乎全部被重吸收。在急性肾炎、慢性肾炎及慢性肾功能不全等疾病时，因肾小球滤过率（GFR）及肾血流量降低，导致2-M滤过减少，血清2-M浓度升高，2-M与GFR呈负相关。测定2-M血清能了解肾小球滤过功能。但由于其他疾病也可引起血清2-M升高，为此，血清2-M评价GFR的应用有一定局限性。肾衰竭患者血清2

8、-M显著升高。肾移植时如有排斥反应，一方面2-M合成增多，另一方面肾功能受影响，2-M滤过减少，血清2-M常升高，上升可先于临床诊断移植排斥27天，也较血清肌酐的增高早13天。对于同种骨髓移植的急、慢性排斥反应，监测2-M浓度是一项很好的指标。此外，高血压糖尿病等引起肾损伤亦可使血清2-M增高，具有早期诊断意义。（2）一些恶性肿瘤，如恶性淋巴瘤、慢性淋巴细胞白血病、非霍奇金淋巴瘤、霍奇金病、多发性骨髓瘤、肝癌、肺癌及胃癌病人血清2-M浓度可明显升高。血清2-M浓度还可用于评价骨髓瘤的预后及治疗效果。（3）病毒感染如巨细胞病毒、EB病毒、乙肝或丙肝病毒及HIV感染时，血清2-M可増高。血清2-M

9、可用来监测HIV感染者的发病过程。（4）自身免疫疾病时，尤其是系统性红斑狼疮（SLE）活动期，血清2-M往往升高。    4.6.2  尿液2-M增高的意义  尿2-M测定是反映近端肾小管重吸收功能受损的灵敏而特异的指标。由于肾小管重吸收2-M的阈值为6 mg/L，大量2-M从尿中排泄。因此，应同时检查血清2-M，只有血清2-M小于6 mg/L时，尿2-M增高才反映肾小管损伤。（1）肾移植后，如有排斥反应影响肾小管功能时，尿中2-M可升高。测定尿2-M可早期检测与肾移植相关的病毒感染。（2）急性肾小管肾炎、坏死、药物及毒物（如庆大霉素、丁胺卡那霉素、汞、镉、铬、金制剂等的肾毒性）引起肾小管损害，使得肾小管重吸收不良，尿中2-M升高。尿中2-M与白蛋白的比值，有助于区别肾小球与