精制抗蛇毒血清制造及检定规程

1、精制抗蛇毒血清制造及检定规程 本品系蛇毒或脱毒蛇毒免疫马的血浆， 经胃酶消化后用硫酸铵盐析法制成的抗蛇 毒球蛋白制剂，能中和相应蛇毒，用于治疗被相应毒蛇咬伤之患者。1 制造对血浆的要求用于制造精制抗蛇毒血清的血浆应符合附录 1抗蛇毒血清生产用马匹免疫方 法的规定。对血浆效价的最低要求如下：血浆种类 每瓶血浆效价（ U/ml ）蝮蛇 150五步蛇 50银环蛇 200眼镜蛇 12制造程序按精制抗毒素制造及检定规程中项进行。对制造工艺的要求及规定按精制抗毒素制造及检定规程中项进行。半成品检定由制造部位进行理化检定、 无菌试验、安全试验、热原质试验、 类 A 血型物质测 定及效力试验。热原质试验、类

2、A 血型物质测定及效力试验可与质量检定部门会 同进行。检定方法及要求同成品检定。2 成品检定由质量检定部门进行全面检定，半成品已会同检定的项目可抽检。鉴别试验 按精制抗毒素制造及检定规程项进行理化检定按精制抗毒素制造及检定规程中项进行无菌试验按生物制品无菌试验规程进行。安全试验按精制抗毒素制造及检定规程项进行。热原质试验按生物制品热原质试验规程进行。注射剂量为 3ml/kg 。判定标准按该规程项 要求进行。类 A 血型物质测定按精制抗毒素制造及检定规程项进行。效价测定效价测定方法见附录 2。对各种抗蛇毒血清成品的最低效价要求如下：抗血清种类 血清效价（ U/ml ）蝮蛇 500五步蛇 180银

3、环蛇 800眼镜蛇 1003 保存与效期保存在28C。自效价测定合格之日起，液体血清效期为 3年，冻干血清效期 为 5 年。附录 1 抗蛇毒血清生产用马匹免疫方法1 马匹用于免疫采血之马匹必须符合 生物制品生产用马匹检疫及管理规程 的规定马匹开始免疫前可做破伤风预防注射。抗蛇毒血清生产用马匹，如解剖确诊为蛇毒中毒死亡者，应将尸体焚毁或深埋。2 抗原与佐剂免疫用蛇毒抗原选用蛇毒或脱毒蛇毒。用作免疫之蛇毒毒素必须经除菌处理。蛇毒应于28C真空干燥保存。免疫抗原为配制稀释成一定浓度的蛇毒液。凡接触蛇毒之用具， 用前用后都应煮沸消毒， 手有创伤者，操作时应有保护措施。 免疫用佐剂应符合精制抗毒素制造及

4、检定规程附录 1 中的有关要求。3 免疫与采血马匹免疫采血按抗毒素生产马匹免疫方法中的要求及规定进行。基础免疫、超免疫根据基础免疫情况， 制定超免疫计划。 免疫注射量应逐渐递增， 可视注射反应而 定。采血经试血效力试验合格之马匹可进行采血， 其血清的效价不得低于下列要求。 分离 之血浆加适宜防腐剂（如 %苯酚）。抗血清种类 采血要求最低效价（ U/ml ）抗蝮蛇毒 180抗五步蛇毒 60抗银环蛇毒 300抗眼镜蛇毒 154 效价测定效价测定方法见附录 2。附录 2 抗蛇毒血清效价测定方法（小 白鼠试验法）1 试剂标准抗蛇毒血清由中国药品生物制品检定所分发。标准抗蛇毒血清应保存于28C。蛇毒由检

5、定所分发。 试验用的蛇毒须以检定所分发的标准抗蛇毒血清准确标定其试验 量（蝮蛇、眼镜蛇及银环蛇1个L+,五步蛇2个L+）。使用干毒时，须以精确 的分析天平称取，每次称取量不得少于5mg,溶解后应在3天内（保存于28C） 用完。干毒应封存于装有干燥剂的真空器皿中。亦可将干毒制成液体甘油蛇毒， 即干毒溶解液与中性甘油（经116C 10分钟灭菌）等量混合，每 ml至少含50 个试验量，保存于28C暗处。稀释液硼酸盐缓冲盐水，灭菌后pH应为。配方为：氯化钠硼酸硼砂加蒸馏水至1000ml,过滤。2 用具吸管、容量瓶、注射器应经标化。吸管、试管、容量瓶应洁净干燥，其他用具应 灭菌。3 试验动物体重 18

6、20g 健康小白鼠。4 试验方法稀释标准抗蛇毒血清用稀释液稀释标准抗蛇毒血清使每 ml 含抗银环蛇、眼镜蛇或抗蝮蛇毒血清 5U、 或抗五步蛇毒血清10U，即与5个相应蛇毒试验量混合后每注射量中含 1U或2U。稀释蛇毒 用稀释液稀释蛇毒， 使其 5个试验量不超过， 在与抗蛇毒血清混合时补加稀释液 至 2ml ，即每注射量中含 1 个试验量。稀释待检抗蛇毒血清 用稀释液将待检抭蛇毒清稀释成数个稀释度，使每 ml 抗蝮蛇、眼镜蛇或银环蛇 毒血清约含5U或其上下：抗五步蛇毒血清约含 10U或其上下。各稀释度间隔 5% 10%。混合待检组定量吸取不同稀释度之待检抗蛇毒血清各 1ml，分别装入小试管中，每

7、管加入 5 个试验量与待检抗蛇毒血清相应的稀释蛇毒液，补加稀释液至2ml，混合均匀，加塞，置37C结合45分钟后立即注射小白鼠。对照组按下表定量吸取已稀释之待检抗蛇毒血清相应的标准抗蛇毒血清， 分别装入小试 管中：对照对照标准抗眼镜蛇毒血清 1ml每管加入5个试验量之相应稀释蛇毒液，补加稀释液至 2ml，混合均匀，加塞， 置37C结合45分钟后立即注射小白鼠。注射每个稀释度的待检抗蛇毒血清、对照 及对照 各注射小白习 4只，每只腹腔 注射。应注意勿使注射液流出。观察试验小白鼠每日观察 1 次，并记录发病及死亡情况， 抗银环蛇毒血清及抗五步蛇 毒血清之试验小白鼠观察 48 小时，抗腹蛇毒血清及抗

8、眼镜蛇毒血清之试验小白 鼠观察 72小时。结果判定对照小白鼠死亡50%以上,对照小白鼠应比对照死亡晚或不死亡。待检 抗蛇毒血清之效价应以与对照 小白鼠同时死亡之最高稀释度判定。精制抗蛇毒血清使用说明书 本品系用蛇毒免疫马匹后由马血浆精制而成， 供治疗蛇咬伤者之用， 其中蝮蛇抗 血清对竹叶青和烙铁头咬伤亦有疗效。咬伤后，应迅速注射本品，愈早愈好。 本品为无色或淡黄色的澄明液体，含防腐剂，久置可析出少量能摇散的沉淀。 用法1. 注射途径：通常采用静脉注射，也可做肌内或皮下注射。2. 剂量：一般蝮蛇咬伤注射抗蝮蛇毒血清 6000U;五步蛇咬伤注射抗五步蛇毒血 清8000U;银环蛇或眼镜蛇咬伤注射抗银

9、环蛇毒血清 10000U或抗眼镜蛇毒血清 2000U。以上剂量约可中和一条相应蛇的排毒量。视病情可酌量增减。3. 儿童用量应与成人相等，不应减少。4. 注射前必须先做过敏试验，阴性者才可全量注射。过敏试验方法取抗血清加氯化钠注射液，好20倍稀释。在前臂掌侧皮内注射，经2030分钟， 注射部位皮丘在2cm以内，且皮丘周围无红晕及蜘蛛足者为阴性，可直接注射。 若阳性可疑者，预先注射扑尔敏10mg （儿童剂量根据体重酌减），15分钟后再 注射本品。若阳性者应采用脱敏注射法。脱敏注射法用氯化钠注射液将抗血清稀释 20倍。分数次做皮下注射， 每次观察 1020分钟，第 1 次注射。如无反应，可酌情增量注射。注射观察 3 次以上，无异常反应者， 即可做静脉、肌内或皮下注射。注射前将制品在 37C水浴加温数分钟。注射时 速度应慢，开始每分钟不超过1ml，以后亦不宜超过4ml。注射时，如有异常反 应，应立即停止注射。注意事项1. 遇有血清过敏反应，即肌内注射扑尔敏。必要时，应用地塞米松5mg加