慢性肝病患者血清ICAM-1和炎性细胞因子测定

1、    慢性肝病患者血清ICAM-1和炎性细胞因子测定        摘 要 采用双抗体夹心ELISA方法对64例慢性肝炎患者、43例肝硬化患者和28例正常人血清细胞间粘附分子（ICAM-1）、白细胞介素-6（IL-6）、IL-8、肿瘤坏死因子（TNF-）水平进行测定。结果：慢性肝炎及肝硬化患者血清ICAM-1及细胞因子水平均明显高于正常（P001），且病情越重其升高越明显。慢性肝炎重度中度轻度（P005001）；肝硬化患者高于慢性肝炎患者；失代偿期肝硬化患者高于代偿期肝炎患

2、者（P005）。提示慢性肝病患者血清ICAM-1及炎症相关性细胞因子水平测定可用于判断病情程度及其预后。关键词 细胞间粘附分子 细胞因子 慢性肝炎 肝硬化中号 575.2 DETECTION OF SERUM INTERCELLULAR ADHESIONMOLECULE-1 AND CTOKINES IN CHRONIC LIVER DISEASESSun Ziqin， Wang Yaojun， Quan Qizhen， Qi Feng， Jiang Xueliang（General Hospital of Jinan Military Region， Jinan 250031）Abstrac

3、t To investigate the changes and the relationship between the development of diseases of serum intercellular adhesion molecule-1（ICAM-1） and some proinflammatory cytokines in chronic hepatitis and cirrhosis， we examined serum ICAM-1， interleukin-6（IL-6）， interleukin-8 （IL-8） and tumor necrosis facto

4、r-（TNF-） in 64 cases of chronic hepatitis， 43 cases of cirrhosis and 28 normal persons by double antibody sandwish ELISA method The results showed that serum levels of ICAM-1 and cytokines in patients with chronic hepatitis and cirrhosis were significantly higher than that in normal persons The more

5、 severe the disease， the higher the serum levels Much higher serum concentrations were tested in patients with cirrhosis Moreover， serum ICAM-1 and the cytokines in incompensatory cirrhosis were higher than that in compensatory one It is suggested that the detection of serum ICAM-1 and some proinfla

6、mmatory cytokines in chronic liver diseases can be used to judge the patients condition and prognosisKeywords Chronic hepatitis， Cirrhosis， Intercellular adhesion molecule， Cytokine目前研究发现，细胞粘附分子，特别是细胞间粘附分子-1（ICAM-1）和血管细胞粘附分子-1（VCAM-1）等与炎细胞的粘附、浸润、跨内皮移动等过程关系密切1。有关ICAM-1和细胞因子与肝脏疾病的研究已引起国内外学者的关注。本研究通过对慢

7、性肝炎、肝硬化患者血清中ICAM-1和白细胞介素-6（IL-6）、IL-8及肿瘤坏死因子（TNF-）等与炎症相关的细胞因子的检测，探讨其在慢性肝病中的意义。1 材料与方法1.1 病人 参照1995年第五次北京全国传染病与寄生虫病会议修订的肝炎临床诊断标准，选择慢性肝炎64例，男49例，女15例，年龄35±13岁。其中轻度21例，中度24例，重度19例。肝炎后肝硬化43例，男34例，女9例，年龄41±10岁。其中失代偿期肝硬化23例，代偿期肝硬化20例。正常对照组为体检正常的28名志愿者，男21例，女7例，年龄36±12岁。1.2 试剂与方法 ICAM-1药盒为英国

8、R D公司产品，IL-6、IL-8、TNF-药盒为美国 Genzyme公司产品。血清ICAM-1、IL-6、IL-8及TNF-活性测定均采用ELISA双抗体夹心法，操作按试剂盒说明书进行。1.3 统计学处理 实验结果用均数±标准差（x±s）表示，样本均数两组间比较用t检验、多组间用单因素F检验作统计学处理，P005为相差有显著性。2 结果慢性肝炎与肝硬化患者血清ICAM-1、IL-6、IL-8及TNF-水平与健康对照组相比均显著升高（P001），且肝炎患者病情越重，其血清ICAM-1及细胞因子水平越高。肝硬化患者失代偿期比代偿期高。见表13。表1 慢性肝炎、肝硬化患者血清I

9、CAM-1与细胞因子的水平Tab 1 Levels of serum ICAM-1 and cytokines in patients with chronic hepatitis and cirrhosisGroupnICAM-1（gL）IL-6（gL）IL-8（gL）TNF-（gL）NormalControl2823325±60630148±00700110±00420189±0095ChronicHepatitis6475184±384320346±01600338±01340509±0242Cirrhosi

10、s4310076±338070556±01750345±01510871±0239表2 不同病情慢性肝炎患者ICAM-1与细胞因子水平Tab 2 Levels of serum ICAM-1 and cytokines in patients with chronic hepatitis in different severityGroupnICAM-1（gL）IL-6（gL）IL-8（gL）TNF-（gL）Light2146519±162090243±01010206±00890282±0097Moderate2

11、477083±222480344±01100425±00770540±0187Severe1910546±474640462±01900373±01220720±0204表3 失代偿期与代偿期肝硬化患者血清ICAM-1和细胞因子水平Tab 3 Levels of serum ICAM-1 and cytokines in patients with incompensatory and compensatory cirrhosisGroupnICAM-1（gL）IL-6（gL）IL-8（gL）TNF-（gL）Com

12、pensatory2089040±259790489±01200294±01090786±0213Incompensatory2311096±369500615±01960390±01700945±02413 讨论 ICAM-1具有与淋巴细胞功能相关抗原-1（LFA-1）结合的能力，它们的结合有利于免疫介导肝疾病炎细胞的聚集并促进细胞从血管内移入狄氏间隙1。肝脏是T细胞分化的重要场所，肝脏内的T细胞比外周血T细胞表达更多的LFA-1抗原，而且LFA-1ICAM-1相互作用有利于T细胞在肝脏的分化。肝脏疾病时，除致病

13、因子所致的肝细胞变性坏死外，淋巴细胞与靶细胞之间复杂的相互作用尤为重要，包括细胞毒淋巴细胞（CTL）与被感染的肝细胞之间的相互作用，CTL在发挥其细胞毒作用时，细胞膜上的LFA-1必须与靶细胞膜所表达的ICAM-1结合才能发挥作用。在各类肝炎、肝硬化组织，不管其病因如何，ICAM-1表达增加，且肝细胞、胆管上皮细胞、淋巴细胞、成纤维细胞均表达阳性24。ICAM-1在肝细胞内的表达为以CTL为主的免疫细胞和靶细胞的粘附提供了重要的分子基础。CTL在发挥其抗细胞毒功能时，细胞膜上LFA-1与靶细胞上的ICAM-1结合是不可缺少的过程。因此，ICAM-1表达增强可能是慢性肝病时病变持续与病变活动的重

14、要原因之一。本研究显示，慢性肝病患者血清ICAM-1水平较正常明显升高，且其升高程度与慢性肝病严重程度及肝炎的活动性有密切关系，肝损害越重，血清ICAM-1水平越高。其原因可能是由于肝内多种细胞大量产生ICAM-1及肝脏对其清除功能受损有关5。我们认为，临床上动态观察其血清水平的变化，可望对病情作出评估。本研究还发现：慢性肝病时血清IL-6、IL-8、TNF-水平均显著高于正常人，提示这些细胞因子与肝脏的损害也有密切关系，也在一定程度上反映了肝脏的受损情况。并且这些细胞因子水平与血清ICAM-1水平有显著相关性。IL-6、IL-8及TNF-等由多个细胞合成，均为致炎细胞因子，是炎症的重要介质。

15、现已知道，IL-1刺激单核细胞趋化肽-1（MCP-1），而后者有明显促进ICAM-1合成的作用6。IL-6具有细胞分化及抗体产生等多种免疫调节作用；IL-8主要发挥趋化、激活细胞的作用；TNF-可致局部炎症反应及多器官损害。慢性肝病时，这些炎性细胞因子可能间接或直接诱导ICAM-1的表达7。体内持续存在的肝炎病毒感染、免疫复合物或内毒素血症等因素均可刺激单核细胞、淋巴细胞、枯否细胞、储脂细胞及内皮细胞等产生炎性细胞因子，这些细胞因子增多又可刺激肝内多种细胞表达ICAM-1。同样，ICAM-1也能影响细胞因子的合成与分泌。ICAM-1与炎性细胞因子之间构成了复杂的分子网络，它们在肝脏疾病的发生与

16、发展过程中和肝功能变化方面可能起着重要作用。第一作者：男，40岁，硕士，副主任医师作者单位：济南军区总医院消化内科，济南 250031参考文献1  王要军，孙自勤，权启镇.部分粘附分子与慢性肝病.临床肝胆病杂志，1997，13：682  Malizia G， Dino O， Pisa R， et al Expression of leukocyte adhesion molecules in the liver of patients with chrongic hepatitis B virus infection Gastroenterology， 1991， 100：

17、7493  Volpes R， Joost J， Oord VD Hepatic expression of intercellular adhesion molecule-1（ICAM-1） in viral hepatitis B Hepatology， 1990，12：1484  Doi T， Yamada G， Mizuno M， et al Immunohistochemical study of the distribution of intercellular adhesion molecule-1 and lymphocyte function associ

18、ated charonic type B hepatitis J Gastroenterol， 1990，85：1645  Zohrens G， Armbrust， T， Pirzer U， et al Intercellular adhesion molecule-1 concentration in serum of patients with acute and chronic liver desease： relationship to disease activity and cirrhosis Hepatology， 1993， 18：7986  Yamaguchi Y， Matsumura F， Takeya M， et al Monocyte chemoattractant protein-1 enhances expression of intercelluar adhesion molecule-1 fo