健脾养胃方及其拆方对BGC8235-Fu细胞增长抑制作用的研究

1、健脾养胃方及其拆方对BGC823/5-Fu 细胞增长抑制作用的研究目的1.耐药细胞株BGC823/5-FU的耐药性鉴定2.观察健脾养胃方拆方对BGC823/5-FU细胞的生长抑制作用3.观察健脾养胃方含药血清对BGC823/5-Fu细胞的生长抑制作用4.观察健脾养胃方及其拆方对BGC823/5-FU细胞移植裸鼠的抑瘤率方法1.复苏前期小剂量冲击诱导建立的人胃癌耐药细胞BGC823/5-Fu,并用MTT法检测耐药系数RI,鉴定其耐药性。2.用MTM检测不同浓度健脾养胃方拆方（砂仁-木香药对、陈皮-法半夏药对、三棱莪术-石见穿药对）分别作用于耐药细胞BGC823/5-FU和普通细胞BGC82q8h

2、后的生长抑制的情况，并通过绘制生长抑制曲线，计算各拆方的IC50,并与普通细胞BGC823勺IC50进行比较。3 .用Hoechst染色法观察健脾养胃方拆方对诱导耐药细胞BGC823/5-FUW亡的情况。每组分别予以砂仁-木香药对（2mg/ml、4mg/ml、6mg/ml）、陈皮-法半夏药对（5mg/ml、15mg/ml、25mg/ml）、三棱-莪术-石见穿药对（0.25mg/ml、0.5mg/ml、lmg/ml）、空白组（不加药）,作用时间为48h。4 .取雄性SD大鼠予以不同浓度健脾养胃方（2.4、1.2、0.6g/ml）连续灌胃14天，采用股动脉取血后制备含药血清。用MTM检测不同浓度健

3、脾养胃方含药血清对耐药细胞BGC823/5-FU生长抑制的情况，并与普通BGC823a胞比较。5 .采用皮下成瘤实验，将BALB/C裸鼠腋下接种BGC823/5-FU细胞后，随机分为空白组（生理盐水）、5-Fu组（20mg/kg,腹腔注射）、健脾养胃方组（28g/kg）、砂仁-木香组（2.4g/kg）、健脾养胃方联合5-Fu组（健脾养胃方:28g/kg,5-Fu:20mg/kg）、砂仁-木香组联合5-Fu（砂仁-木香:2.4g/kg,5-Fu:20mg/kg）连续灌胃14天，观察健脾养胃方、砂仁-木香药对及结果 1. 重与5-Fu联合使用对BGC823/5-FU细胞移植裸鼠瘤体大小的抑制作用新

4、复苏的耐药细胞BGC823/5-FU,耐药系数为10.45。2.健脾养胃方拆方作用于耐药细胞BGC823/5-FU和普通BGC823l8h后，对其生长具有抑制作用,陈皮-法半夏药对两株细胞的IC50分别为(22.18±0.94)mg/ml和(21.48±0.47)mg/ml,砂仁-木香药对对两株细胞的IC50分别为(6.69±0.12)mg/ml和(6.46±0.15)mg/ml,三棱-莪术-石见穿药对对两株细胞的IC50分别为(1.98±0.13)和(1.48±0.13)mg/ml,通过比较发现陈皮-法半夏与砂仁-木香药对对耐药细胞

5、BGC823/5-FU和普通BGC823勺IC50无统计学差异(P>0.05),三棱-莪术-石见穿药对对BGC823/5-FU细胞的IC50与对BGC823细胞的IC50相比,虽有统计学差异(P<0.05),但差异较小。3.Hoechst染色法实验显示,药物刺激耐药细胞BGC823/5-Fu48h后,空白组见细胞核呈蓝色,砂仁-木香药对(2mg/ml、4mg/ml、6mg/ml)、陈皮-法半夏药对(5mg/ml、15mg/ml、25mg/ml)、三棱-莪术-石见穿药对(0.25mg/ml、0.5mg/ml、1mg/ml)作用后的细胞核呈致密浓染,或呈碎块状致密浓染。

6、随着陈皮-法半夏与砂仁-木香药对浓度增高而BGC823/5-FU细胞的细胞核呈致密浓染的数量越多,但三棱-莪术-石见穿药对虽可以使细胞核呈致密浓染,但并未随浓度的升高而使致密浓染的细胞核增多。4.健脾养胃方含药血清对耐药细胞BGC823/5-FU和普通BGC82的生长均具有抑制作用，且抑制率随浓度增加而增高。健脾养胃方中浓度、高浓度含药血清对耐药细胞BGC823/5-FU和普通细胞BGC823勺抑制率无统计学差异(P>0.05)。5.动物结果：健脾养胃方与砂仁木香药对均可以抑制BGC823/5-FU细胞移植裸鼠的瘤体生长，抑瘤率为36.3%?口32.35%,抑制率高于单用5-Fu组(抑瘤率19.01%),中药与5-Fu联合使用后,可以提高抑瘤率（健脾养胃方+5-Fu组:55.19%;砂仁木香+5-Fu组:48.72%）结论复苏前期诱导建立的胃癌耐药细胞系BGC823/5-FU,再次检测其耐药系数为10.45,耐药细胞依旧具有耐药性。陈皮-法半夏药对、砂仁-木香药对可以引起BGC823/5-FU细胞的凋亡,药物对细胞的抑制作用与其是否对5-Fu耐药无关,三棱-莪术-石见穿药对对BGC823/5-FU细胞的抑制作用与其是否对5-Fu耐药无关，但药物并没有引起细胞凋亡。通过MTM发现健脾养胃方含