抗体APC荧光素标记操作流程记录_第1页
抗体APC荧光素标记操作流程记录_第2页
抗体APC荧光素标记操作流程记录_第3页
抗体APC荧光素标记操作流程记录_第4页
全文预览已结束

下载本文档

版权说明：本文档由用户提供并上传，收益归属内容提供方，若内容存在侵权，请进行举报或认领

文档简介

1、巴德生物科技有限公司1. 目的 规范单克隆抗体标记荧光APC (快速标记法）标准操作程序2. 适用范围 适用于本公司抗体标记荧光APC (快速标记法）操作3. 术语和定义 别藻蓝蛋白（allophycocyanin ，APC ）由藻蓝胆素与蛋白质结合而成，APC具有荧光性，伴随着非常高的光吸收和高量子效率。4. 职责和权限 实验员负责实施本规范，主管负责人监督执行。5. 实验试剂.5.1 溶液配制0.01mol/L PBS溶液配制0.01 mol/L Phosphate Buffered Saline，pH 7.40试剂名称配方量批号用量Water1LNaCl（MW 58.44）0.799gK

2、H2PO4（MW 136.09）0.2gKCl（MW 74.55）0.2gNa2HPO4·12H2O（MW 358.14）2.89g调节pH 7.40后，加水定容至1.0L，再调节pH至7.40，过滤备用。Storage Buffer，pH 7.40试剂名称配方量批号用量0.01mol/L PBS/BSA0.5%NaN30.1%调节pH 7.40后，加水定容至1.0L，再调节至pH 7.40。5.2 其他试剂试剂名称厂家批号活化液（modifier）淬灭剂（quencher）APC荧光素6. 操作流程6.1 抗体活化 将抗体用0.01mol/L PBS稀释为1mg/mL，加入 mL

3、活化液(体积比为抗体溶液：反应活化液=10:1），旋涡振荡器混匀后，室温避光反应10min。6.2 与APC反应形成共轭物 将抗体混合液（步骤6.1）加入 mg APC荧光素中（加入量：抗体与荧光素质量比为1:1），在室温条件下避光反应3小时，反应开始时间 ： 至结束时间 ： ；（或2-8度条件下避光过夜）。6.3 荧光淬灭 向共轭物（步骤6.2）中加入 mL 淬灭剂（淬灭剂添加量按抗体体积：淬灭剂体积=10:1添加）。混匀后，室温孵育30分钟，去除游离的荧光素的荧光效应。淬灭开始时间 ： 至结束时间 ： 。6.4 层析 将共轭物（步骤6.3）层析柱分离，进一步去除游离的荧光素或抗体。6.5 保存收集得到的标记抗体（步骤6.4），上机测试后根据效

人人文库> 全部分类> 教育资料 > 课设设计

温馨提示

  • 1. 本站所有资源如无特殊说明，都需要本地电脑安装OFFICE2007和PDF阅读器。图纸软件为CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
  • 2. 本站的文档不包含任何第三方提供的附件图纸等，如果需要附件，请联系上传者。文件的所有权益归上传用户所有。
  • 3. 本站RAR压缩包中若带图纸，网页内容里面会有图纸预览，若没有图纸预览就没有图纸。
  • 4. 未经权益所有人同意不得将文件中的内容挪作商业或盈利用途。
  • 5. 人人文库网仅提供信息存储空间，仅对用户上传内容的表现方式做保护处理，对用户上传分享的文档内容本身不做任何修改或编辑，并不能对任何下载内容负责。
  • 6. 下载文件中如有侵权或不适当内容，请与我们联系，我们立即纠正。
  • 7. 本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。

最新文档

评论

0/150

提交评论