心肌标志物的快速诊断和临床价值

1、心肌标志物的快速诊断 和临床价值 床边诊断（ POCT）在心脏病诊断中重要性 心血管疾病是目前危害人类健康的重要疾病之一， 仅中国每 年因该疾病入院病人在三百多万， 死于该疾病的有五十多万人， 而且每年在上升。因此，对心血管疾病的诊断、治疗和康复已 成为一个引起全球性重视的话题。心脏病的诊断是整个心血管医学领域的 “瓶颈” 学科， 只有 在尽可能短的时间内诊断才能减少死亡。 欧洲和美国心脏学会， 在 2007 年就建议：检验部门对心肌标志物的检测从标本采集到 报告结果应在 1 小时内完成。传统的检测方法虽然精细， 但是耗时太长， 一般的从标本采 集到出结果，需要 1-2 小时左右，而急性心肌梗

2、死病人可能会 在 1 小时死亡，容易延误抢救机会。床边诊断，又称 POCT技术的应用，大大的改善了传统的诊 断速度和方法， 它直接检测心脏标志物， 较传统方法更为准确， POCT技术能够在二十分钟内出具报告结果，又更具时效性。 普朗 FIA8000 定量分析仪的特点和应用由普朗医疗研发的 FIA8000 型定量分析仪，是一款专门用 于心脏标志物检测的仪器， 也是国内自主研发的首款用于诊断该类标志物检测的设备，它具有以下特点：1、按国际标准控制质量，产品稳定可靠。2、便携、体积小、操作简单、样本量少、随时可以检测。3、10-20 分钟快速出结果，提高效率，为病人争取更多时间。4、自动测试，可以储

3、存 10000 多个病历，可自动打印，也可 以和医院系统连接。5、一机适用多种检测项目 该仪器在医院能够应用的科室较多，具体为： 心内科：门诊、病房、 CCU、手术室 急诊科： ICU、急救车 其它：检验科、肿瘤科、肾内科、内分泌科、儿科、老年 科、呼吸科、胸外科等配套试剂：1、心肌肌钙白 I 检测试剂盒（胶体金法）2、N-端脑利钠肽前体检测试剂盒（胶体金法）3、N-端脑利钠肽前体 / 心肌肌钙蛋白 I 二合一检测试 剂盒（胶体金法）4、肌酸激酶同工酶 / 心肌肌钙蛋白 I/ 肌红蛋白三合一 检测试剂盒（胶体金法）5、高敏 C 反应蛋白检测试剂盒（胶体金法）三、仪器各检测指标的临床应用及意义1

4、、心肌肌钙蛋白 I 检测试剂盒( cTnI ) 对心肌细胞发生特异性坏死的标志物检测 2006 年美国心脏学会将 cTnI 定为心肌损伤金标准，迅速在 全球得到认同和推广。它主要用于：急性心肌梗死，不稳定性 心绞痛，急性心肌炎， 急性冠脉综合症等的临床早期辅助诊断。2、肌酸激酶同工酶 / 心肌肌钙蛋白 I/ 肌红蛋白三合一试剂盒 (CK-MB/cTnl/Myo)临床应用：有助于早期急性心肌梗死的诊断，不稳定性心绞痛的 早期诊断，检测心脏手术造成的心肌损伤程度，心肌梗死面积预 估，急性心肌梗死后溶检和介入治疗的指示物。3、N-端脑利钠肽前体 (NT-proBNP) 是心脏功能检测指标的国际“金标

5、准” 。主要临床应用为：1. 早期发现心衰病人2. 对心衰病人进行危险分层3. 监测心衰治疗4. 判断心衰病人的预后5. 监测心衰药物的疗效评估6. 急性冠脉综合症的风险评估7. 非心源性心衰病人的筛选和诊断8. 区分心衰及其他原因引起的呼吸困难该款试剂在医院各科室的应用如下：临床医生患者临床应用急诊室医生急性呼吸困难患者快速诊断 / 排除心衰，使诊断更快速和 可靠急性患者的预后和危险分层 BNP药物治疗的最佳监测手段外科医生进行非心脏手术患者围手术期后的心血管风险筛查儿科医生先天性心脏病患者帮助诊断儿童先天性心脏病先天性心脏病的预后心内科医生急性呼吸困难患者心衰 患者体检或超声波检查无法诊断

6、的心衰的 诊断（如肥胖或老年患者、儿童） 心衰患者的预后和危险分层 BNP药物治疗的最佳监测手段急性充血性心衰患者的长期治疗监测内科医生高危人群（糖尿病患者、 高血压患者、冠心病患 者） 急性呼吸困难患者 心衰患者高危人群的心血管风险早期发现 （肥胖 人群，糖尿病人，高血压患者，冠心病患 者，肾损害患者）诊断和排除心衰更加有效精确检测各种阶段的心衰 （轻微症状或 者无症状者）区分心衰和其他疾病心衰严重程度评估急性充血性心衰患者的长期监测内分泌医生糖尿病患者早期发现肥胖人群或者糖尿病人心血管疾病风险肾内科医生肾损害患者早期发现肾损害患者的心血管疾病肿瘤科医生大剂量化疗患者大剂量化疗患者治疗后期的

7、心血管疾 病风险评估， 化疗药物引起的心脏毒性的 预后大剂量化疗患者心血管心血管疾病风 险再评估的风险评估4、N-端脑利钠肽前体 / 心肌肌钙蛋白 I 试剂盒 （cTnI/NT-proBNP）该试剂盒是目前在全球范围内首款推出的将心脏功能和心肌损伤用于同一块版子检测的试剂，临床意义非常重要。5、高敏 C反应蛋白 (hs-CRP)是用于心管炎症指标检测的试剂，通过对炎症程度的判断， 从而对急性冠脉综合症患者稳定和不稳定性心绞痛及支架置入 患者进行预后分析，并可以冠心病发生的危险性进行预测。四、该仪器的运用能够给医院带来的好处1、提高检测速度，使更多的心脏疾病患者赢取救治时间。2、多科室可使用、应

8、用广。3、减少医患矛盾和不必要的损失。传统的该类疾病检测方法存在很多缺陷，特别是发病早 期，容易漏诊，因此出现医疗事故，非常棘手。4、扩大医院收益POCT 产品从方法学或国家规定的收费标准中可以看出， 收费相对较高，同时因为它的应用较广，使用后收益多，普 朗产品，相对于进口产品，成本上有较大优势，可以为院方 带来更大的收益。五、临床对比实验报告仪器名称： FIA8000 系列免疫定量分析仪配套试剂通用名：心肌肌钙蛋白 I 检测试剂盒（胶体金法） N-端脑利钠肽前体检测试剂盒（胶体金法） 高敏 C 反应蛋白检测试剂盒（胶体金法） N-端脑利钠肽前体 / 心肌肌钙蛋白 I 二合一检测试剂盒（胶体金

9、法） 肌酸激酶同工酶 /心肌肌钙蛋白 I / 肌红蛋白三合一检测试剂盒 （胶体金法）1.5. 临床研究结果及分析1.5.1 心肌肌钙蛋白 I 检测试剂盒（胶体金法）试验结果及分析诊断符合率cTnI 测试所用对比仪器为 SIEMENS IMMULITE 2000，按照仪器的判断标准：测试值 >1 ng/ml 的值定义为阳性，测试值 <1 ng/ml 的值定义为阴性，检测范围为0.2180 ng/ml 。FIA8000 系列免疫定量分析仪及配套检测试剂盒的检测范围为 150 ng/ml ，阴性测试结果显 示为 <1 ng/ml ，当测试值 >50 ng/ml 时，显示 &g

10、t;50 ng/ml 。临床试验中所选阳性样本为 30 例，阴性样本为 70 例。表 1. SIEMENS IMMULITE 2000 与 FIA8000 检测 cTnI 的结果对照表对比系统合计试验系统阳性阴性阳性30030阴性07070合计3070100诊断符合率 = (30+70)/( 30+0+0+70) ×100%=100%阳性符合率 =30/(30+0) ×100% =100%阴性符合率 =70/(70+0) ×100%=100%假阳性率 =0/(0+70) ×100%=0假阴性率 =0/(30+0) ×100%=0通过对比临床样本

11、试验的试验数据，计算得出其相关系数 r=0.957 ，然后用 t 检验对数 值进行分析，得出 P=0.33。因此， P>0.05 。有 95% 可信度，认为两种方法的检测结果无显 著性差异。心肌肌钙蛋白 I 检测试剂盒(胶体金法)的定性相对诊断符合率为100%，能够将 100例临床样本阴性阳性全部区分开来。cTnI 临床样本试验对比数据如附件 4 表 1 所示。1.5.2 N- 端脑利钠肽前体检测试剂盒(胶体金法)试验结果及分析诊断符合率根据罗氏仪器的判断标准当 NT-proBNP 值低于 300 pg/ml ，可以排除心衰的可能， 所以当低于 300 pg/ ml 时定义为阴性。所以我

12、们选取测试值 >300 pg/ml 的临床样本为入选 标本。对比试验所用罗氏 E170 化学发光仪配套 N-端脑利钠肽前体检测试剂盒的测试范围为 5 35000 pg/ml 。 FIA8000 系列免疫定量分析仪及配套检测试剂盒的检测范围为 300 15000 pg/ml ，阴性测试结果显示为 <300 pg/ml ，当测试值 >15000 pg/ml 时，显示 >15000 pg/ml 。 临床所选阳性样本为 32 例，阴性样本为 68例。表 2. 罗氏 E170 化学发光仪与 FIA8000 检测 NT-proBNP 结果对照表试验系统对比系统合计阳性阴性阳性321

13、33阴性06767合计 32 68 100诊断符合率 = (32+67)/( 32+0+1+67) ×100%=99%阳性符合率 =32/(32+0) ×100%=100%阴性符合率 =67/(1+67) ×100%=98.5%假阳性率 =1/(1+67) ×100%=1.5%假阴性率 =0/(32+0) ×100%=0通过对比临床样本试验的试验数据，计算得出其相关系数 r=0.957 ，然后用 t 检验对数 值进行分析，得出 P=0.40。因此， P>0.05 ，我们有 95% 可信度认为两种方法的检测结果无 显著性差异。N-端脑利钠肽

14、前体检测试剂盒(胶体金法)的定性相对诊断符合率为99%， 100 例临床样本中出现 1 例假阳性。N-端脑利钠肽前体检测试剂盒(胶体金法)临床样本试验对比数据如附件4表 2所示 。1.5.3 N- 端脑利钠肽前体 / 心肌肌钙蛋白 I 二合一检测试剂盒(胶体金法) 试验结果及分析诊断符合率根据 、中所述，cTnI 的阳性取值 >1 ng/ml ，阴性取值范围为 <1 ng/ml ；NT-proBNP 的阳性样本入选标准为 >300 pg/ml ，阴性取值范围为 <300 pg/ml 。NT-proBNP 的线性范围较 单联的 NT-proBNP试剂盒有所不同，为 300

15、 12000 pg/ml 。临床试验 cTnI 阳性样本为 17例 ，阴性样本为 83 例； NT-proBNP阳性样本为 15 例，阴 性样本为 85例。N-端脑利钠肽前体 /心肌肌钙蛋白 I二合一检测试剂盒 (胶体金法) 的阳性 样本累计为 30 例。表 3. SIEMENS IMMULITE 2000 与 FIA8000 检测 cTnI 的结果对照表对比系统试验系统阳性阴性合计阳性18018阴性08282合计1882100诊断符合率 = (18+82)/( 18+0+0+82) ×100%=100 %阳性符合率 =18/(18+0) ×100%=100% 阴性符合率

16、=82/(0+82) ×100%=100% 假阳性率 =0/(0+82) ×100%=0 假阴性率 =0/(18+0) ×100%=0表 4. 罗氏 E170 化学发光仪与 FIA8000 检测 NT-proBNP 的结果对照表试验系统对比系统合计阳性阴性阳性23023阴性07777合计2377100诊断符合率=( 23+77)/( 23+0+0+77)×100%=100%阳性符合率 =23/(23+0) × 100%=100%阴性符合率 =77/(0+77) ×100%=100%假阳性率 =0/(0+77) ×100%=0

17、假阴性率 =0/(23+0) ×100%=0通过对比临床样本试验的试验数据，计算得出 NT-proBNP 相关系数 R=0.955，然后用 t 检验对数值进行分析，得出 P=0.45 ； cTnI 相关系数 R=0.947 ，然后用 t 检验对数值进行分 析，得出 P=0.42 。因此 P>0.05 ，我们有 95%可信度认为两种方法的检测结果无显著性差异。N-端脑利钠肽前体 / 心肌肌钙蛋白 I 二合一检测试剂盒(胶体金法)的定性相对诊断符 合率为 100%，能够将 100 例临床样本阴性阳性全部区分开来。NT-proBNP/cTnI 临床样本试验对比数据如附件 4 表 3

18、所示 。1.5.4 肌酸激酶同工酶 / 心肌肌钙蛋白 I/ 肌红蛋白三合一检测试剂盒 (胶体 金法)试验结果及分析CK-MB由于测试结果表示方法不一样，生化分析仪SIEMENS IMMULITE 2000 测试 CK-MB为酶活性测定，测量值单位为 U/L ，而 FIA8000 系列免疫定量分析仪的测量为质量测定，测 量单位为 ng/ml 。国内目前没有质量测定方面的生化分析仪，所以无法做 P 值的计算。对于CK-MB的测定结果只做相关系数计算。如果考虑到CK-MB在 SIEMENS IMMULITE 2000 上当测试值 >24U/L 时为阳性，而 FIA8000>5 ng/ml

19、 时为阳性，将值 24 U/L 与 5 ng/ml 做一个 对比，得出一个系数 4.8 ，将系数 4.8 考虑在内时，得出 P=0.45. ，所以 P>0.05 ，说明两者 无明显差异。诊断符合率CK-MB在 SIEMENS IMMULITE 2000上当测试值 >24 U/L 时为阳性，最低检测限位 2 U/L ； FIA8000 系列免疫定量分析仪测试值 >5 ng/ml 时为阳性，当测量值 >100 ng/ml 时，显示 >100 ng/ml ，测试值 <5 ng/ml 时显示 <5 ng/ml 。 cTnI 如 5.1 中所述，阳性值 >

20、1 ng/ml ，阴性值均 <1 ng/ml 。Myo在 SIEMENS IMMULITE 2000上的阳性分界 =70 ng/ml ，测试值 >70 ng/ml 为阳 性，测试值 <70 ng/ml 为阴性，但是对于 FIA8000 系列免疫定量分析仪及配套肌酸激酶同工 酶/ 心肌肌钙蛋白 I/ 肌红蛋白三合一检测试剂盒（胶体金法）而言当测试值 >50 ng/ml 时有 具体数值显示，当测试数值 >600 ng/ml 时，显示 >600 ng/ml 。临床试验中 CK-MB阳性样本为 27 例，阴性样本为 73 例；cTnI 的阳性样本为 17 例，阴 性

21、样本为 83例； Myo阳性样本为 17例，阴性样本为 83例。肌酸激酶同工酶 / 心肌肌钙蛋白 I/ 肌红蛋白三合一检测试剂盒（胶体金法）的阳性样本累计为30 例。表 5. SIEMENS IMMULITE 2000 与 FIA8000 检测 CK-MB结果对照表试验系统对比系统合计阳性阴性阳性27128阴性07373合计2774101诊断符合率 =(27+73)/( 27+1+0+73)×100%=99%阳性符合率 =27/(27+0) ×100%=100% 阴性符合率 =73/(1+73) ×100%=98.6% 假阳性率 =1/(1+73) ×1

22、00%=1.35% 假阴性率 =0/(30+0) ×100%=0表 6. SIEMENS IMMULITE 2000 与 FIA8000 检测 cTnI 的结果对照表试验系统对比系统合计阳性阴性阳性17017阴性08383合计1783100诊断符合率 = (1 7+83)/( 17+0+0+83) ×100%=100%阳性符合率 =17/(17+0) ×100%=100%阴性符合率 =83/(0+83) ×100%=100%假阳性率 =0/(0+83) ×100%=0假阴性率 =0/(17+0) ×100%=0表 7. SIEMENS

23、 IMMULITE 2000 与 FIA8000 检测 Myo 的结果对照表试验系统对比系统合计阳性阴性阳性17017阴性08383合计1783100诊断符合率 = (17+83)/( 17+0+0 +83) ×100%=100%阳性符合率 =17/(17+0) ×100%=100%阴性符合率 =83/(0+83) ×100%=100%假阳性率 =0/(0+83) ×100%=0假阴性率 =0/(17+0) ×100%=0通过临床样本对比试验的试验数据， 计算得出 CK-MB相关系数 r=0.943 ；cTnI 的相关系 数 r=0.964 ，

24、然后用 t 检验对数值进行分析，得出 P=0.42 ； Myo的相关系数为 R=0.931 ，然 后用 t 检验对数值进行分析，得出 P=0.48。因此， P>0.05 ，有 95% 可信度，认为两种方法的检测结果无显著性差异肌酸激酶同工酶 / 心肌肌钙蛋白 I/ 肌红蛋白三合一检测试剂盒（胶体金法）定性相对诊 断符合率为 99%，其中 100 例临床样本 CK-MB出现 1 例假阳性。肌酸激酶同工酶 / 心肌肌钙蛋白 I/ 肌红蛋白三合一检测试剂盒（胶体金法）临床样本试 验对比数据如附件 4表 4所示。1.5.5 高敏 C 反应蛋白检测试剂盒（胶体金法）试验结果及分析诊断符合率日立 7

25、600 全自动生化仪配套 hs-CRP 检测试剂盒的临床测试标准为 > 3 mg/l 时 hs-CRP 为阳性， < 3mg/l 为阴性。由于我们重点测试的是 hs-CRP 在心血管方面的应用， 所以我们的临床样本取 1mg/l 。 FIA8000 系列免疫定量分析仪配套 hs-CRP检测试剂盒的 测试范围为 0.564 mg/l ，当测试值 < 0.5 mg/l 时显示 <0.5mg/l ，>64 mg/l 时显示 > 64mg/l 。临床所取阳性样本为 30例，阴性样本为 70例。表8. 日立 7600 全自动生化仪与 FIA8000 检测 hs-CRP

26、 的结果对照表试验系统对比系统合计阳性阴性阳性29231阴性16869合计3070100诊断符合率 = (29+68)/( 30+70) ×100%=97%阳性符合率 =29/(29+1) ×100%=96.7% 阴性符合率 =68/(68+2) ×100%=97% 假阳性率 =2/(2+68) ×100%=2.8%假阴性率 =1/(29+1) ×100%=3.3%通过对比临床样本试验的试验数据，计算得出其相关系数 r=0.954 ，然后用 t 检验对数 值进行分析，得出 P=0.32。因此， P>0.05 ，有 95%可信度，认为两种方

27、法的检测结果无显著 性差异。97%，100 例临床样本高敏 C 反应蛋白检测试剂盒（胶体金法）定性相对诊断符合率为中出现了 2 例假阳性，1 例假阴性。4表 5 所示。高敏 C反应蛋白检测试剂盒（胶体金法）临床样本试验对比数据如附件1.6. 讨论和结论通过临床试验得出心肌肌钙蛋白 I 检测试剂盒 （胶体金法） 的临床样本的测试数据的相 关系数 r=0.957 ， 定性相对诊断符合率为 100%。N-端脑利钠肽前体检测试剂盒 （胶体金法） 的临床样本的测试数据的相关系数 r=0.957 ， 定性相对诊断符合率为 99%。100 例临床样本中出现 1 例假阳性。N- 端脑利钠肽前体 / 心肌肌钙蛋白 I 二合一