动物细胞融合与单克隆抗体(新)

1、(1)(1)(2)(3)(4)(5)植物体细胞杂交过程示意图A细胞细胞B细胞细胞人工诱导人工诱导1.1.动物动物细胞融合的概念细胞融合的概念杂交细胞杂交细胞 动物细胞融合（也称细胞杂动物细胞融合（也称细胞杂交）：是指交）：是指两个或多个动物细两个或多个动物细胞结合胞结合形成一个形成一个细胞细胞的过程。的过程。一、动物细胞融合一、动物细胞融合2.2.原理：原理：_。3.3.融合方法：聚乙二醇融合方法：聚乙二醇(PEG)(PEG)、_、电激等。、电激等。4.4.意义：突破了意义：突破了_的局限，使的局限，使_成为可能，也为制造成为可能，也为制造_开辟了新途径。开辟了新途径。细胞膜的流动性细胞膜的流

2、动性灭活的病毒灭活的病毒有性杂交方法有性杂交方法远缘杂交远缘杂交单克隆抗体单克隆抗体灭活的病毒颗粒黏附于细胞表面灭活的病毒颗粒黏附于细胞表面细胞膜被病毒颗粒穿通细胞膜被病毒颗粒穿通细胞膜连接细胞膜连接细胞融合，形成杂种细细胞融合，形成杂种细胞（细胞膜具有一定的胞（细胞膜具有一定的流动性）流动性）灭活的病毒诱导细胞融合的过程灭活的病毒诱导细胞融合的过程 比较动、植物细胞杂交技术比较动、植物细胞杂交技术抗体：能够与抗原发生特抗体：能够与抗原发生特异性结合的异性结合的免疫球蛋白免疫球蛋白。能产生抗体的细胞是能产生抗体的细胞是浆细浆细胞（即效应胞（即效应B细胞）。细胞）。二、单克隆抗体二、单克隆抗体抗

3、体的传统生产方法抗体的传统生产方法抗原抗原 反复注射动物反复注射动物从动物的从动物的血清血清中分离抗体中分离抗体该法制备抗体的缺点：该法制备抗体的缺点：产量低、纯度低，且抗产量低、纯度低，且抗体的特异性差、灵敏度体的特异性差、灵敏度低。低。二、单克隆抗体的概念二、单克隆抗体的概念 由由单个单个B B淋巴细胞经过淋巴细胞经过无性繁殖无性繁殖（克隆），（克隆），形成基因型相同的细胞群，这一细胞群所产形成基因型相同的细胞群，这一细胞群所产生的生的化学性质单一、特异性强化学性质单一、特异性强的抗体称为单的抗体称为单克隆抗体。克隆抗体。 B B淋巴细胞受抗原刺激后，可以产生特异性淋巴细胞受抗原刺激后，可

4、以产生特异性抗体。抗体。动物在免疫反应过程中，体内产生特异性动物在免疫反应过程中，体内产生特异性抗体种类可达百万种以上，每种抗体对特定的抗抗体种类可达百万种以上，每种抗体对特定的抗原具有特异性免疫作用。原具有特异性免疫作用。每一个淋巴细胞只分泌一种特异性抗体每一个淋巴细胞只分泌一种特异性抗体。分析：分析： B B淋巴细胞与抗体的关系？淋巴细胞与抗体的关系？一个一个B B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体淋巴细胞只分泌一种特异性抗体 骨髓瘤细胞能无限增殖骨髓瘤细胞能无限增殖杂交瘤细胞杂交瘤细胞动物细胞培养技术动物细胞培养技术动物细胞融合技术动物细胞融合技术单克隆单克隆抗体抗体 既能产生特异性抗体，既能

5、产生特异性抗体， 又能大量增殖的细胞又能大量增殖的细胞2.2单克隆抗体的制备设计思路单克隆抗体的制备设计思路BB 、B瘤 、瘤瘤 （B、瘤）（一选）选择性培养基：只有杂交瘤细胞才能存活获得产生相应抗体的B细胞（二选）：选能产生所需专一抗体的杂交瘤细胞单抗制备过程分哪几步？单抗制备过程分哪几步？请用箭头把以下代表单克隆抗请用箭头把以下代表单克隆抗体制备过程步骤的图解的字母按正确顺序连接起来。顺体制备过程步骤的图解的字母按正确顺序连接起来。顺序是？序是？ 2.3单克隆抗体的应用单克隆抗体的应用诊断试剂诊断试剂最广泛应用最广泛应用准确、高效、简易、快速准确、高效、简易、快速单克隆抗体最主要的优点：单克隆抗体最主要的优点：特异性强，灵敏特异性强，灵敏度高，并能大量制备。度高，并能大量制备。“生物导弹生物导弹” 单克隆抗体放射性同位素单克隆抗体放射性同位素+化化学药物或细胞毒素学药物或细胞毒素 借助单克隆抗体的导向作用，能将药物定借助单克隆抗体的导向作用，能将药物定向带到癌细胞所在位置，在原位杀死癌细胞。向带到癌细胞所在位置，在原位杀死癌细胞。 主要用于治疗癌症治疗，单克隆抗体作为载体，主要用于治疗癌症治疗，单克隆抗体作为载体，运载抗癌药物，形成运载抗癌药物，形成“生物导弹生物导弹”，准确杀