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文档简介
1、实验九、饲料中粗纤维的测定一、实验目的使学生掌握用饲料中粗纤维的测定方法,了解粗纤维测定方法中存在问题及解决的方案。二、实验原理用固定量的酸和碱,在特定条件下消煮样品,再用乙醚、乙醇除去醚溶物, 经高温灼烧扣除矿物质的量,所余量称为粗纤维。它不是一个确切的化学实体, 只是在公认强制规定的条件下,测出的概略养分。其中以纤维素为主,还有少量 半纤维素和木质素。三、实验设备1实验室用样品粉碎机或研钵;2、分样筛:孔径0.45mm(40 目);3、分析天平:感量 0.0001g ;4、电热恒温箱:可控制温度在 130°C;5、高温炉:电加热,可控制温度在 550600 C;6、古氏坩埚:30
2、ml,预先加入30ml酸洗石棉悬浮液。再抽干,以石棉厚度 均匀,不透光为宜;7、消煮器:由冷凝球的高型烧杯(50ml )或有冷凝管的锥形瓶;8锅滤装置:抽真空装置,吸滤瓶及漏斗;9、滤器:200目不锈钢网和尼龙网,或 G2号玻璃滤器;10、干燥器:用氯化钙(干燥试剂)或变色硅胶作干燥剂。四、实验内容1、称样:称取12g试样,准确至0.0002g,如果脂肪1新不脱脂,110% 可不必脱脂,但建议脱脂,脂肪10%、须脱脂,或用测脂肪后残渣。2、酸煮:加入0.255 ± 0.005mol/L煮沸的硫酸200ml和1滴正辛醇,使其 在2min沸腾,且连续微沸30± 1min。注意保
3、持硫酸浓度不变,样品不可损失。3、过滤:用沸蒸馏水洗至不含酸。4、 碱煮:将酸洗不溶物放入原容器中,加浓度准确为0.313 ± 0.005mol/L且已沸的氢氧化钠溶液200ml,同样微沸30min5、过滤:先用25ml0.255mol/L硫酸洗涤,再用沸蒸馏水洗至中性,用乙醇 15ml洗残渣。6、 烘干灰化:取下坩埚,130C烘干至恒重。550± 25C灼烧30min,冷却 称重至恒重。7、计算结果:粗纤维() = m 一 m2100mmi :130C烘干后坩埚 亠样残渣重(g)m2 :550C灼烧后坩埚-样残渣重(g)m :风干样重(g)1976年Van Soet提出了
4、中性洗涤纤维、酸性洗涤纤维、酸性洗涤木质素作 为评价饲草纤维类物质的指标。軒!I索和残兪矿鞫喷K质素置比揭比纤堆素技感解木Oft矿物质采分木荒鳶就燃愷NDF木质素、纤维素、二氧化硅、半纤维素、细胞壁的成分如镶嵌微量的蛋白质ADE木质素、纤维素、二氧化硅4-中性抚谦环耋(NDF)ADF-NDF半纤维素ADF-ADL纤维素该法可以分别测出纤维素,半纤维素、木质素和硅酸盐,这量一大进步,但 该法提取出的纤维物质中残留含氮尚有 2050%(有可能不消化),在NDF还有淀 粉残留,使准确性下降,该法不适于纤维量低的精料(蛋白质或淀粉多的试样), 因此也叫饲草分析方案。Fonnesback (冯列士贝克)于19701974年提出冯氏法。(1)先用蛋白酶将饲料进行消化(pH=3.5),然后用酸性洗涤剂煮沸 1h,使原饲料中95%以上的蛋白质被消化。(2) 将上步分离出的细胞壁用 40僦酸煮1h,使半纤维素水解,过滤残渣 为纤维素和木质素,酸不溶灰分,1步-2步二半纤维素含量。(3) 将上步所得的残渣用72僦酸处理3h,过滤洗涤残渣,105土2C烘干, 称重,然后灼烧称重,木质素逸失,剩余为二氧化硅。试样pH=3.5蛋白前消化蛋白质细胞壁酸性洗涤剂煮勢升水中含15克十二烷硫験钠+12rnl
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