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文档简介

1、检测基因检测基因引物序列引物序列扩增片段长度扩增片段长度基因性质基因性质大豆 Lectin玉米玉米 IVRCaMV 35SNOSCP4 EPSPSp1：5-gcc ctc tac tcc acc ccc atc c-3p2：5-gcc cat ctg caa gcc ttt ttg tg-3(54 )p3：5-ccgctgtatcacaagggctggtacc-3p4：5-ggagcccgtgtagagcatgacgatc-3 (56)p5：5-gat agt ggg att gtg cgt ca-3p6：5-gct cct aca aat gcc atc a-3(54 )p7：5-gaa t

2、cc tgt tgc cgg tct tg-3p8：5-tta tcc tag ttt gcg cgg ta-3(54 )p9：5-ctt ctg tgc tgt agc cac tga tgc-3p10：5-cca cta tcc ttc gca aga ccc ttc c-3 (56 )118 bp226 bp195 bp180 bp320 bp内源基因内源基因内源基因内源基因外源基因外源基因外源基因外源基因外源基因外源基因PCR反应包括三个基本步骤变性、退火和延伸。外源启动子外源启动子(CaMV35S)特特异性扩增异性扩增 外源终止子外源终止子(NOS) 特异性扩增特异性扩增 内源基因内

3、源基因(Lectin)特异性扩增特异性扩增 外源基因外源基因( EPSPS)特异性扩增特异性扩增 12M 1 2 3 4 5 6 7M 1 2 3 4 5 6 7M 1 2 3 4 5 6 71 2 3 4 5 6 7 M1 未加模板对照未加模板对照 2 转基因大豆、玉米转基因大豆、玉米 37 非转基因大豆、玉米非转基因大豆、玉米 PCR假阳性结果假阳性结果1 引物设计不当，应调换引物2 循环参数不合适，导致非特异性扩增3 靶序列的交叉污染PCR假阴性结果假阴性结果1 模板问题2 试剂浓度不够3 标本中有Taq酶的抑制剂4 PCR产物检测系统灵敏度不够注意事项注意事项1 提取高质量的模板DNA是PCR成功的决定因素之一2 注

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