发光免疫分析仪

1、职业教育医学检验技术专业教学资源库发光免疫分析仪2 2第二节第二节 发光免疫分析仪发光免疫分析仪发光免疫技术是将发光系统发光免疫技术是将发光系统与免疫反应相结合，以检测与免疫反应相结合，以检测抗原或抗体的方法。既具有抗原或抗体的方法。既具有免疫反应的特异性，更兼有免疫反应的特异性，更兼有发光反应的高敏感性，在免发光反应的高敏感性，在免疫学检验中应用日趋广泛。疫学检验中应用日趋广泛。 返回目录3 3一、发光免疫分析仪的分型及特点一、发光免疫分析仪的分型及特点在常温下，某些特定的化学反应产生的能量使其产在常温下，某些特定的化学反应产生的能量使其产物或反应中间态分子激发，形成电子激发态分子；物或反应

2、中间态分子激发，形成电子激发态分子；当其衰退至基态时，释放出的化学能量以可见光的当其衰退至基态时，释放出的化学能量以可见光的形式发射，我们把这种现象称为形式发射，我们把这种现象称为化学发光化学发光（chemiluminescence，CL） 化学发光免疫根据标记物的不同，有化学发光免疫化学发光免疫根据标记物的不同，有化学发光免疫分析、电化学发光免疫分析、微粒子化学发光免疫分析、电化学发光免疫分析、微粒子化学发光免疫分析、化学发光酶免疫分析和生物发光免疫分析等分析、化学发光酶免疫分析和生物发光免疫分析等分析方法。现临床以前三者较为常用。分析方法。现临床以前三者较为常用。 返回目录4 4发光免疫分

3、析的基本种类及常用标记物发光免疫分析的基本种类及常用标记物种类种类常用标记物常用标记物化学发光免疫分析化学发光免疫分析氨基酰肼类及其衍生物，如氨基酰肼类及其衍生物，如5-5-氢基邻苯二氢基邻苯二甲酰肼甲酰肼( (鲁米诺鲁米诺) )等等电化学发光免疫分析电化学发光免疫分析三联吡啶钉钌三联吡啶钉钌微粒子化学发光免疫微粒子化学发光免疫分析分析二氧乙烷磷酸酯等二氧乙烷磷酸酯等化学发光酶免疫分析化学发光酶免疫分析辣根过氧化物酶辣根过氧化物酶生物发光免疫分析生物发光免疫分析荧光素荧光素返回目录5 5（二）常用的发光免疫分析仪的特点（二）常用的发光免疫分析仪的特点全自动化学发光全自动化学发光免疫分析仪免疫分

4、析仪采用化学发光技术和磁性微粒子分离技术采用化学发光技术和磁性微粒子分离技术相结合，是一个全自动、随机存取、软件相结合，是一个全自动、随机存取、软件控制的智能分析系统。控制的智能分析系统。全自动微粒子化学全自动微粒子化学发光免疫分析仪发光免疫分析仪 采用微粒子化学发光技术对人体内的微量采用微粒子化学发光技术对人体内的微量成分以及药物浓度进行定量测定成分以及药物浓度进行定量测定全自动电化学发光全自动电化学发光免疫分析仪免疫分析仪磁性微珠包被采用磁性微珠包被采用“链酶亲和素链酶亲和素- -生物素生物素”新型固相包被技术，使检测的灵敏度更高，新型固相包被技术，使检测的灵敏度更高，线性范围更宽，反应时

5、间更短。线性范围更宽，反应时间更短。返回目录6 6二、发光免疫分析的工作原理二、发光免疫分析的工作原理（一）全自动化学发光免疫分析仪（一）全自动化学发光免疫分析仪这种免疫分析技术又称为微量倍增技术，包括：这种免疫分析技术又称为微量倍增技术，包括：竞争法：多用于测定小分子抗原物质。竞争法：多用于测定小分子抗原物质。夹心法：多用于测定大分子的抗原物质。夹心法：多用于测定大分子的抗原物质。返回目录7 7（二）全自动微粒子化学发光免疫分析仪（二）全自动微粒子化学发光免疫分析仪 应用经典的免疫学原理，小分子物质采用竞争法或应用经典的免疫学原理，小分子物质采用竞争法或抗体捕获法进行测定，而大分子物质采用夹

6、心法抗体捕获法进行测定，而大分子物质采用夹心法。返回目录8 8（三）全自动电化学发光免疫分析仪（三）全自动电化学发光免疫分析仪 该类分析仪综合应用了免疫学、链酶亲合素生物该类分析仪综合应用了免疫学、链酶亲合素生物素包被技术及电化学发光标记技术，按照免疫学方素包被技术及电化学发光标记技术，按照免疫学方法的原理可应用三种抗原抗体反应方法：法的原理可应用三种抗原抗体反应方法： 检测小分子量蛋白抗原检测小分子量蛋白抗原抑制免疫法抑制免疫法夹心免疫法夹心免疫法桥联免疫法桥联免疫法检测抗体如检测抗体如IgG、IgM检测大分子量物质检测大分子量物质返回目录9 9 三联吡啶钌标记的三联吡啶钌标记的ECLIAE

7、CLIA反应原理（夹心法）反应原理（夹心法） 返回目录1010三、发光免疫分析的基本结构三、发光免疫分析的基本结构全自动化学发光全自动化学发光免疫分析仪免疫分析仪 主机主机微机微机仪器的运行反仪器的运行反应测定部分，应测定部分，包括原材料配包括原材料配备部分、液路备部分、液路部分、机械传部分、机械传动部分、光路动部分、光路检测部分检测部分。 仪器的核心部分，仪器的核心部分，是指挥控制中心。是指挥控制中心。其功能有程控操其功能有程控操作、自动监测、作、自动监测、指示判断、数据指示判断、数据处理、故障诊断处理、故障诊断等，并配有光盘。等，并配有光盘。 返回目录1111微电脑微电脑控制控制 传送舱传

8、送舱 主探针主探针系统系统 分析分析系统系统 流体流体系统系统 电子电子系统系统 全自全自动微动微粒子粒子化学化学发光发光免疫免疫分析分析仪仪 三、发光免疫分析的基本结构三、发光免疫分析的基本结构返回目录1212全自动电化学发全自动电化学发光免疫分析仪光免疫分析仪 三、发光免疫分析的基本结构三、发光免疫分析的基本结构就是一台完整的就是一台完整的计算机，并配有计算机，并配有支架及打印系统支架及打印系统。 是检测系统的核是检测系统的核心，主要包括预心，主要包括预清洗区、测量区清洗区、测量区、试剂区、耗品、试剂区、耗品区。区。 主要由条形码阅主要由条形码阅读器、标本舱位读器、标本舱位、标本架转盘、标

9、本架转盘、模块轨道等组成模块轨道等组成。 控制单元控制单元核心单元核心单元 分析模块分析模块返回目录1313四、性能评价四、性能评价目前应用于临床检验目前应用于临床检验的发光免疫分析仪有的发光免疫分析仪有很多种类，具有检测很多种类，具有检测速度快、精度好、重速度快、精度好、重复性高、条码识别系复性高、条码识别系统、统、24小时待机、系小时待机、系统稳定等特点。统稳定等特点。 返回目录1414四、性能评价四、性能评价项目全自动化学发光免疫分析仪全自动微粒子化学发光免疫分析仪全自动电化学发光免疫分析仪测定速度60180个/h100个/h80个/h最小检测量10-15g/ml10-15g/ml10-

10、15g/ml重复性CV3%CV3%CV3%样品盘60个标本60个标本75或30个标本试剂盘13种试剂24种试剂18或25种试剂急诊标本均可随到随做，无需中断运行返回目录1515五、仪器的使用与维护及常见故障的处理五、仪器的使用与维护及常见故障的处理开开 机机参数设置参数设置进入菜单，设定测量参数，放置检测试剂和进入菜单，设定测量参数，放置检测试剂和消耗品消耗品将被测样品放入样品架，输入起始样品栏的将被测样品放入样品架，输入起始样品栏的位置和起始样品编号，选择样品的测试项目位置和起始样品编号，选择样品的测试项目样品装载样品装载关关 机机取出试剂放入冰箱，清理废弃物，清洗探针取出试剂放入冰箱，清理

11、废弃物，清洗探针后，关闭仪器后，关闭仪器打开仪器电源，等待仪器自检，按打开仪器电源，等待仪器自检，按 “STARTUP”STARTUP”键启动键启动结果结果测定结束后，可以选择需要浏览的结果，打测定结束后，可以选择需要浏览的结果，打印报告印报告样本测定样本测定按已设定的参数和程序，按按已设定的参数和程序，按“Run”Run”键仪器键仪器自动检测自动检测 全自动化学发光免疫分析仪全自动化学发光免疫分析仪 返回目录1616五、操作与维护及常见故障处理五、操作与维护及常见故障处理开开 机机工作前准备工作前准备在主屏幕进行系统设置后，装入各类耗材，在主屏幕进行系统设置后，装入各类耗材，并按要求进行质控

12、和定标并按要求进行质控和定标将样本装入标本架，在试验菜单下输入标本将样本装入标本架，在试验菜单下输入标本架号、标本号以及检测项目架号、标本号以及检测项目样品装载样品装载关关 机机卸载标本，清理废弃物，清洗管路后，让仪卸载标本，清理废弃物，清洗管路后，让仪器处于器处于24h24h待机状态待机状态打开仪器主电源和显示器，开机仪器进行初打开仪器主电源和显示器，开机仪器进行初始化始化结果结果测定结果可自动打印，也可以在菜单下选择测定结果可自动打印，也可以在菜单下选择浏览结果，以标准模式发送结果浏览结果，以标准模式发送结果样本测定样本测定确认标本装载无误后，开始测定操作，仪器确认标本装载无误后，开始测定

13、操作，仪器会自动检查耗材和校准状态会自动检查耗材和校准状态 全自动全自动微粒子化学发光微粒子化学发光免疫分析仪免疫分析仪 返回目录1717五、操作与维护及常见故障处理五、操作与维护及常见故障处理开开 机机设置仪器参数，装载各种耗材，运行校准程设置仪器参数，装载各种耗材，运行校准程序，再运行质控和定标序，再运行质控和定标将样本装入标本架，选择标本类型，输入标将样本装入标本架，选择标本类型，输入标本架号、标本号以及检测项目本架号、标本号以及检测项目样品装载样品装载关关 机机卸载标本，清理废弃物，清洗管路后，关闭卸载标本，清理废弃物，清洗管路后，关闭主电源，关闭供水系统主电源，关闭供水系统打开供水系

14、统和操作电源，开启启动程序，打开供水系统和操作电源，开启启动程序，输入操作者输入操作者IDID，进入软件，启动系统操作，进入软件，启动系统操作结果结果可以在仪器上选择浏览结果，也可以打印检可以在仪器上选择浏览结果，也可以打印检测报告，以标准模式发送结果测报告，以标准模式发送结果样本测定样本测定确认启动条件后，按确认启动条件后，按“Start”Start”键，仪器会键，仪器会自动对标本进行测定自动对标本进行测定 全自动全自动电化学发光电化学发光免疫分析仪免疫分析仪 工作前准备工作前准备返回目录1818（二）仪器的维护（二）仪器的维护1日保养日保养 保持机器外壳干净。检查系统基本状态，保持机器外壳干净。检查系统基本状态，之后再之后再 按保养程序进入清洗系统进行清洗针。按保养程序进入清洗系统进行清洗针。2周保养周保养 检查主探针上、下导轨，进行特殊清洗。检查主探针上、下导轨，进行特殊清洗。每周保养后一定要做系统检测。每周保养后一定要做系统检测。3月保养月保养 每月用专用不锈钢小刷刷洗每月用专用不锈钢小刷刷洗1次主探针、次主探针、标本采样针、试剂针的内部。生理盐水反复冲洗针标本采样针、试剂针的内部。生理盐水反复冲洗针内部，针外