氢化物发生原子荧光法测定饲料中硒

1、氢化物发生原子荧光法测定饲料中硒尹腾桂（江西省兽药饲料监察所 南昌 330029)摘要 本文建立了氢化物发生原子荧光光谱法测定饲料中硒，对各种不同饲料中铜、铁干扰离子，采用铁氰化钾做掩蔽剂，以及选择最佳的酸度和硼氢化钾浓度等仪器参数。本法线性范围为0400ng/mLng/mL，加标平均回收96%。关键词 饲料 硒 氢化物发生 原子荧光光谱法饲料有单一饲料、配合饲料、浓缩饲料、预混合饲料等。其中配合饲料、浓缩饲料、预混合饲料组成成分复杂；尤其是预混合饲料中含有大量的铜、铁、锰、锌等过渡金属元素，其含量是硒的数百倍甚至千倍以上。由此用于氢化物发生原子荧光检测的样品分解液中存在大量的Fe2+、Cu2

2、+等干扰离子。本试验通过选择最佳仪器分析参数，合理的溶液酸度和硼氢化钾浓度以及适当的稀释倍数，并以铁氰化钾作掩蔽剂等措施，对配合饲料和预混合饲料中的硒进行氢化物发生原子荧光法测定试验，获得了理想的检测结果。1、实验部分1.1、方法原理样品经酸加热消化后，使样品中的硒安全转化为四价硒。用硼氢化钾(KHB4)作还原剂，将四价硒在盐酸介质中还原成硒化氢(SeH2)，由载气(氩气)带入原子化器进行原子化，在硒特制空心阴极灯照射下，基态硒原子被激发至高能态，在去活化回到基态时，发射出特征波长的荧光，其荧光强度与硒含量成正比，与标准系列比较定量。1.2、仪器与试剂AF-610A原子荧光光谱仪(北京瑞利分析

3、仪器公司)。分析天平，可控电热板、水浴锅、玻璃器皿等。硝酸 (优级纯)高氯酸 (优级纯)盐酸 (优级纯)混合酸：硝酸+高氯酸(4+1)混合酸王水：盐酸+硝酸+水(15+5+20)混合酸溶液氢氧化钠 (优级纯)硼氢化钾溶液(15g/L)：称取15g硼氢化钾(KHB4)，溶于氢氧化钠溶液(2g/L)中，然后定容1000ml。现用现配。K3Fe(CN)6溶于蒸馏水中，并定容至100ml，混匀。硒标准贮备液：精确称取100.0mg硒(光谱纯)，溶于少量硝酸中，加2ml高氯酸，置沸水浴中加热34小时，冷却后再加8.4ml盐酸，再到沸水浴中加热2min，准确稀释到1000ml，其盐酸浓度为0.1mol/L

4、，此贮备液浓度为每毫升相当于100ug硒。硒标准应用液：取100ug/ml硒标准贮备液1.0ml，定容至100ml，此应用液浓度为1ug/ml。1.3.1 配合饲料、浓缩饲料及有机单一饲料的处理和消化。样品用不锈钢磨粉碎，储于塑料瓶内，备用。称取1克左右样品(精确至0.0001g)于150ml高筒烧杯内，加入10.0ml混合酸及几粒玻璃珠，盖上表面皿冷消化过液。次日于电热板上加热，并及时补加混酸。当溶液变为清亮无色并有白烟时，再继续加热至剩余体积7ml左右，切不可蒸干。冷却，再加5ml、6mol/L盐酸，继续加热至溶液变为清亮无色并伴有白烟出现，以完全将六价硒还原成四价硒。冷却转移至100ml

5、容量瓶中，加入10ml盐酸、4ml铁氰化钾(15g/L)，并定容，待测。同时做空白试验。1.3.2矿物质预混合饲料及无机单一饲料的处理和消化。g1g(精确0.0001g)试样置于25ml的具塞试管中。然后加入10ml王水，静置30min后置于蒸锅中蒸煮23小时。冷却后转移至100ml的容量瓶中，定容摇匀。然后再取出1ml置于50ml的容量瓶中，加入10ml盐酸，4ml铁氰化钾(15g/L)；定容待测。同时做空白试验。准确移取0.0，0.1，0.2，0.5，1.0ml(1ug/ml)的硒标准应用液于100ml溶量瓶中，各加入少量水后再分别加入20mlHCl，4mlK3Fe(CN)6溶液，用水定容

6、，摇匀，制成标准工作曲线。负高压；280V；灯电流：60mA；原子化温度：室温；载气流速：800ml/min；测量方式：标准曲线法；读数方式：峰面积；延时时间：1S；注入时间：18S；读数时间：16S；载流：20%HCl溶液，KBH4%2.0%。2、结果与讨论在实验室参照肥育猪预混合饲料配方配制不加硒的矿物质预混料再加标测定回收率，标准物质为GBW(E)080215水中硒标准溶液100ug/ml，样品处理按前述4(2)方法进行。见表1表1 合成样品回收率测定(以Se计)样品名称加标(mg/kg)测定结果(mg/kg)回收率(%)样10样20样30样40样197样2106样3101样4105(1

7、) 称取本单位样品室编号为2004SB06大猪预混料样品约1g(精确至0.0001g)，按前述4(2)试样处理方法处理得到稀释体积为5000倍的样品测定液，进样测定，同时进行6次平行试验。然后再分别从各消化液中取出1ml至50ml容量瓶中，加入Se标，4ml K3Fe(CN)6溶液(15g/L)，10ml HCl，用去离子水定容至样品稀释体积为5000倍，进样测定。测定结果见表2表2 (2004SB06) 加标精密度、准确度试验 mg/kg(以Se计)平行号加标前测定值加标量加标后测定值回收率(%)11012963100496591690平均值96标准偏差S变异系数CV%(2) 称取本单位样品

8、室编号为2004SW102 猪配合饲料样品约1g(精确至0.0001g)，加入国家标准物质杨树叶GBW07604(GSV-3)Se：0.14±(1.3.1)样品处理方法处理，同时做6个平行样。试验结果见表3。表3 2004SW102猪配合饲料加标精密度，准确度试验 mg/kg(以Se计)平行号加标前测定值加标量加标后测定值回收率(%)12345000706平均值标准偏差S变异系数CV%3Fe(CN)6作掩蔽剂对测定结果的影响预混合饲料加标样品消化后进行1000ml、2500ml、5000ml、10000ml体积稀释，同时做I，II组平行试验，I组不加K3Fe(CN)6溶液，II组分别

9、加入4ml K3Fe(CN)6溶液，定容摇匀，测定回收率。结果见表4。从表4可以看到在不加掩蔽剂情况下，通过增加稀释体积可以减少干扰，获得较好的回收率，但稀释体积太大，会降低检测的灵敏度，不适应于含硒量较低的样品。综合分析认为在加入掩蔽剂情况下对样品进行5000倍体积稀释检测效果较好。表4 回收率试验结果样品稀释体积(ml)1000 2500 5000 10000加标回收率(%)I组75 88 112 104II组112 109 105 96%2.0%的硼氢化钾溶液得到较好的检测结果。结论氢化物发生原子荧光法测定饲料中硒，前处理简便，所用试剂谱通，无毒害，方法准确度好。对预混料加标试验，6次测

10、定回收率90%101%，标准偏差为4.5，变异系数为4.7%。对配合饲料加标试验，6次测定回收率85.7%104.2%，标准偏差为6.34，变异系数为6.6%。本方法稳定可靠，检出限低：DL0.1ng/ml，曲线线型范围宽，0400ng/ml。检测成本低，并能较好地解决预混合饲料中高铜等过渡金属元素对硒检测的干扰。参考文献：1、GB/T1383-92饲料中硒的检2.3二氨基萘荧光法2、原子荧光光谱分析方法手册(一)，北京瑞利分析仪器公司(内部资料)19983、唐春莲，氢化物原子荧光法测定鸡蛋中的硒，光谱实验室，15(5)，1998，109-1114、徐宝玲，氢化物原子荧光法测定硒时元素干扰与消除，分析化学，13(1)，1985：29-335、索有瑞