免疫细胞治疗(齐鲁细胞治疗)

1、临床信息部临床信息部治疗治疗山东省齐鲁细胞治疗工程技术有限公司山东省齐鲁细胞治疗工程技术有限公司山 东 省 脐 带 血 造 血 干 细 胞 库山 东 省 脐 带 血 造 血 干 细 胞 库山东省细胞组织库山东省细胞组织库4545岁进入了肿瘤发岁进入了肿瘤发病高峰，且肿瘤风险病高峰，且肿瘤风险随年龄增加呈几何倍随年龄增加呈几何倍数上升数上升6565岁的老年人患肿岁的老年人患肿瘤的几率是瘤的几率是2525岁年岁年轻人的轻人的5050多倍多倍40岁后肿瘤发病率逐年增长岁后肿瘤发病率逐年增长免疫器官免疫器官免疫细胞免疫细胞免疫分子免疫分子 免疫系统是人体的防御体系，一方面清除细菌、病毒等外来异物，另一

2、方面清除体内衰老的无功能细胞以及发生突变的细胞。一个人身上每天有数万亿个细胞在复制，在复制中，约有万分之一到百万分之一的细胞会出现差错，也就是说，。有的突变细胞进一步变为癌细胞。、免疫自稳、免疫自稳编辑编辑ppt “In large, long-lived animals, like most of the warm-blooded vertebrates, inheritable genetic changes must be common in somatic cells and a proportion of these changes will represent a step tow

3、ard malignancy. It is an evolutionary necessity that there should be some mechanism for eliminating or inactivating such potentially dangerous mutant cells and it is postulated that this mechanism is of immunological character.” Sir Frank Macfarlane Burnet 诺贝尔生理学或医学奖诺贝尔生理学或医学奖 1960 肿瘤免疫治疗理论肿瘤免疫治疗理论“

4、免疫监视免疫监视”理论理论 (Immune Surveillance Theory)(Immune Surveillance Theory)“肿瘤免疫编辑肿瘤免疫编辑”(Tumor Immunoediting(Tumor Immunoediting） Elimination: 免疫消除免疫消除 Equilibrium: 免疫平衡免疫平衡 Escape: 免疫逃逸免疫逃逸发病时发病时健康时健康时肿瘤的潜伏期长达肿瘤的潜伏期长达10年以上年以上癌细胞反复进行分裂，约癌细胞反复进行分裂，约3030次后大小约次后大小约0.7cm0.7cm时，初次被影像学识别为时，初次被影像学识别为 “癌症癌症” ；早

5、期癌症被发现时的大小约是早期癌症被发现时的大小约是1cm1cm，重量约是，重量约是1g1g，其中癌细胞的个数约是，其中癌细胞的个数约是1010亿个；亿个；据统计，肿瘤发展到临床诊断，所经过的时间约为据统计，肿瘤发展到临床诊断，所经过的时间约为1010年，年，这期间是防治的黄金时间。这期间是防治的黄金时间。Chester Southam: 在五十年代首次给志愿者注射活的癌细胞在五十年代首次给志愿者注射活的癌细胞结果结果: :注射的癌细胞在注射的癌细胞在健康人健康人体内不生长体内不生长. .注射的癌细胞在注射的癌细胞在癌症病人癌症病人体内可长成大肿瘤。体内可长成大肿瘤。结论：结论：癌症病人体内失去

6、健康人所具有广谱抗癌活性。癌症病人体内失去健康人所具有广谱抗癌活性。研究项目受到伦理学及法律的极大挑战。研究项目受到伦理学及法律的极大挑战。研究结果为抗癌界带来极大提示，研究结果为抗癌界带来极大提示，19681968年被推选成全美抗癌学会主席。年被推选成全美抗癌学会主席。Science，1957年年 一月一月 125: 158-160 首次证明人体内天然抗癌活性的存在首次证明人体内天然抗癌活性的存在n 我国每年新发肿瘤病例约我国每年新发肿瘤病例约为为312万例万例n 平均每天平均每天8550人（全国人（全国每分钟有每分钟有6人人被诊断为癌被诊断为癌症）症）肿瘤的治疗肿瘤的治疗肿瘤的治疗肿瘤的治

7、疗清除微小病灶、残清除微小病灶、残余肿瘤细胞；余肿瘤细胞；增强机体免疫功能；增强机体免疫功能；增强放、化疗的敏增强放、化疗的敏感性；感性；无明显毒副作用。无明显毒副作用。局部快速切除肿瘤局部快速切除肿瘤组织，见效快；组织，见效快；局部减少肿瘤负荷，局部减少肿瘤负荷，对敏感的肿瘤见效对敏感的肿瘤见效快；快；全身减轻肿瘤负荷，全身减轻肿瘤负荷，见效快；见效快；攻克癌症攻克癌症 人类人类的第一次的第一次1809年德国医生年德国医生McDowell第一次用手术切除卵巢癌，并取得第一次用手术切除卵巢癌，并取得36年生存期的良年生存期的良好效果。好效果。1895 年伦琴发现了年伦琴发现了X 线线, 189

8、6 年即用年即用X 线治疗了第线治疗了第1 例晚期乳腺癌。例晚期乳腺癌。化学治疗化学治疗 上世纪上世纪40年代用氮芥治疗恶性淋巴瘤取得显著疗效，自此开始了肿瘤年代用氮芥治疗恶性淋巴瘤取得显著疗效，自此开始了肿瘤的化学治疗。的化学治疗。50年代以环磷酰胺、氟尿嘧啶合成为标志是化疗的第二里程碑，年代以环磷酰胺、氟尿嘧啶合成为标志是化疗的第二里程碑，70年代顺铂及阿霉素进入临床并得以广泛应用是化疗的第三里程碑。年代顺铂及阿霉素进入临床并得以广泛应用是化疗的第三里程碑。90年代以年代以后，抗肿瘤的新药不断推出。后，抗肿瘤的新药不断推出。肿瘤生物研究取得了一个惊人的进步。肿瘤生物研究取得了一个惊人的进步

9、。发现了发现了，这，这个细胞被证实可以跟踪和识别人体内的任何部位的癌细胞。接着就发现了免疫系统抑制肿瘤的机理。即个细胞被证实可以跟踪和识别人体内的任何部位的癌细胞。接着就发现了免疫系统抑制肿瘤的机理。即DC细胞发现癌细胞后激活免疫反应，引发细胞发现癌细胞后激活免疫反应，引发T细胞对癌细胞的剿灭。细胞对癌细胞的剿灭。等首先报道外周血单个核细胞（等首先报道外周血单个核细胞（PBMC）中加入）中加入体外培养体外培养4-6天，能诱导出一天，能诱导出一种非特异性的杀伤细胞，这类细胞可以杀伤多种对种非特异性的杀伤细胞，这类细胞可以杀伤多种对CTL、NK不敏感的肿瘤细胞不敏感的肿瘤细胞研究组经美国食品和药品

10、检验局（研究组经美国食品和药品检验局（Us Food and Drug Administration,FDA）批准下，）批准下，协同治疗协同治疗25例肾例肾等肿瘤患者。等肿瘤患者。研究组首先报道了研究组首先报道了（tumor infiltrating lymphocyte,）。）。TIL细胞表型具有异质性，一般来说，细胞表型具有异质性，一般来说，TIL中绝大多数细胞中绝大多数细胞CD3阳性。阳性。 2011年度诺贝尔生理学或年度诺贝尔生理学或医学奖由三人分享。其中一半医学奖由三人分享。其中一半奖励布鲁斯奖励布鲁斯巴特勒巴特勒(Bruce A. Beutler)和朱尔斯和朱尔斯霍夫曼霍夫曼(Ju

11、les A. Hoffmann)在激活先天免在激活先天免疫方面的发现。疫方面的发现。 另外一半奖励拉尔夫另外一半奖励拉尔夫斯坦曼斯坦曼(Ralph M. Steinman)“发现发现树状细胞和它在适应性免疫中树状细胞和它在适应性免疫中的作用的作用”。临床信息部临床信息部细细 胞胞 产品产品一、一、CIK细胞细胞 CIK细胞细胞(Cytokine-Induced Killer，CIK)，即细，即细胞因子诱导的杀伤细胞，是一胞因子诱导的杀伤细胞，是一种新型的免疫活性细胞，该细种新型的免疫活性细胞，该细胞对肿瘤细胞的识别能力很强，胞对肿瘤细胞的识别能力很强，如同如同“细胞导弹细胞导弹”，能精确，能精

12、确“点射点射”肿瘤细胞，但不会伤肿瘤细胞，但不会伤及及“无辜无辜”的正常细胞。尤其的正常细胞。尤其对手术后或放化疗后患者效果对手术后或放化疗后患者效果显著，能消除残留微小的转移显著，能消除残留微小的转移病灶，防止癌细胞扩散和复发，病灶，防止癌细胞扩散和复发，提高机体免疫力。提高机体免疫力。 DC细胞寻找肿瘤细胞的细胞寻找肿瘤细胞的“雷达雷达”DC又称树突状细胞。又称树突状细胞。它是目前发现的功能最为强大的专职它是目前发现的功能最为强大的专职抗原递呈细胞，也是唯一能激活幼稚抗原递呈细胞，也是唯一能激活幼稚T细胞的抗原递呈细胞，在免疫应答细胞的抗原递呈细胞，在免疫应答的诱导中具有独特地位。经临床研

13、究的诱导中具有独特地位。经临床研究的结果显示，的结果显示，DC细胞可促使患者细胞可促使患者T细细胞增殖分化，还可激活胞增殖分化，还可激活B淋巴细胞，淋巴细胞，全面启动抗体免疫系统产生高效而特全面启动抗体免疫系统产生高效而特异的抗肿瘤效应，帮助重建肿瘤患者异的抗肿瘤效应，帮助重建肿瘤患者对肿瘤细胞的免疫监视功能。对肿瘤细胞的免疫监视功能。DC细胞的功能如同细胞的功能如同“雷达雷达”，通过在，通过在体内随着血液全身各处主动搜索、识体内随着血液全身各处主动搜索、识别肿瘤细胞，并把信息传递给免疫活别肿瘤细胞，并把信息传递给免疫活性细胞，促进其激活和大量繁殖性细胞，促进其激活和大量繁殖。二、二、DC细胞

14、细胞三、三、DC-CIK通过负载肿瘤抗原的通过负载肿瘤抗原的DC与与CIK的有机的有机结合（即结合（即DC-CIK细胞）细胞）能产生特异性和非特异性的双重抗肿能产生特异性和非特异性的双重抗肿瘤效应，二者具有一定的互补作用。瘤效应，二者具有一定的互补作用。DC-CIK细胞不仅能激发、增强肿瘤细胞不仅能激发、增强肿瘤患者特异性抗肿瘤免疫应答，有效清患者特异性抗肿瘤免疫应答，有效清除体内残留病灶，且在患者体内诱发除体内残留病灶，且在患者体内诱发免疫记忆，从而获得长期的抗瘤效应。免疫记忆，从而获得长期的抗瘤效应。DC-CIK自体细胞免疫治疗可以有效自体细胞免疫治疗可以有效杀灭术后的残留肿瘤细胞，防治复

15、发杀灭术后的残留肿瘤细胞，防治复发和转移，减轻放化疗的毒副作用，减和转移，减轻放化疗的毒副作用，减轻患者痛苦，提高患者自身免疫机制轻患者痛苦，提高患者自身免疫机制和生活质量，延长患者生命。和生活质量，延长患者生命。扩增活化的自体淋巴细胞（扩增活化的自体淋巴细胞（Autologous Immunotherapy Lymphocytes,AIL），又称为高效），又称为高效CIK细胞。细胞。 是从患是从患者自体外周血（者自体外周血（50-100ml）中分离单）中分离单个核细胞，经过体外激活扩增培养，得个核细胞，经过体外激活扩增培养，得到的一种在生理条件下能够杀伤肿瘤细到的一种在生理条件下能够杀伤肿瘤

16、细胞的细胞群，主要效应细胞包括胞的细胞群，主要效应细胞包括MHC限制性效应细胞（限制性效应细胞（CD3+CD8+细胞毒细胞毒性性T细胞、细胞、CD3+CD4+辅助性辅助性T细胞）、细胞）、非非MHC限制性效应细胞（限制性效应细胞（CD3+CD56+细胞、细胞、CD3-CD56+NK细胞），可有细胞），可有效辅助恶性肿瘤的治疗。效辅助恶性肿瘤的治疗。四、四、AIL细胞细胞AIL与与CIK培养方法比较培养方法比较50 ml50 ml外周血外周血PBMCA培养法：培养法： B培养法：培养法：A培养法（传统培养法（传统CIK）：）：DI：IFN-1000U.ml-1D2：OKT3 mAb.100ng.

17、 ml-1 、IL-2 1000U. ml-1、PHA 100ug.ml-1B培养法（培养法（AIL）：）：DI：IFN-1000U.ml-1 D2：OKT3 mAb.100ng. ml-1 、IL-2 1000U. ml-1、PHA 100ug.ml-1 ，AIL扩增试剂扩增试剂 自然杀伤细胞（自然杀伤细胞（Natural killer cell，NK）是一种细胞质是一种细胞质中具有大颗粒的细胞，来源于骨中具有大颗粒的细胞，来源于骨髓，主要存在于外周血、脾脏和髓，主要存在于外周血、脾脏和骨髓中。骨髓中。，因此，因此，NK细胞对癌细胞对癌症的监视作用已越来越受到重视。症的监视作用已越来越受到重

18、视。五、五、NK细胞细胞一、一、NK细胞是人体内抗癌活性的第一道防线，可细胞是人体内抗癌活性的第一道防线，可，抑抑制肿瘤的生长及扩散制肿瘤的生长及扩散；二、二、NK细胞会细胞会，因此可限制肿瘤取得所需，因此可限制肿瘤取得所需要的养份进而限制肿瘤生长；要的养份进而限制肿瘤生长；三、三、NK细胞可细胞可，间接提高患，间接提高患者之生活品质；者之生活品质；四、四、副作用低副作用低或几乎无副作用。或几乎无副作用。NK细胞作用原理细胞作用原理六、六、iAPA-细胞细胞SOCS1 是维持机体免疫耐受的重要分子是维持机体免疫耐受的重要分子Si-Yi Chen et al. 发现：发现： SOCS1 (Sup

19、pressor of Cytokine Signaling 1) 是一种重要的免疫负调节因子是一种重要的免疫负调节因子(antigen presentation attenuator, APA) ，对，对DC细胞的抗原呈递起负调细胞的抗原呈递起负调节作用，限制抗原呈递的时间和强度，节作用，限制抗原呈递的时间和强度，从而限制自体抗肿瘤免疫反应。从而限制自体抗肿瘤免疫反应。该研究第一次提出了抑制免疫负调控该研究第一次提出了抑制免疫负调控因子来增强因子来增强DC疫苗的概念疫苗的概念Nature Biotechnol. 2004; 22:1521-2评述：评述：Nature Biotechnol. 2

20、004;22:1546-53 J. Clin. Invest. 2006;116:90100STATSOCS1JAKCytokineLPSMyD88TRAF6IKK IKK RelAp50I BIKK IRAKMalSOCS1TLR TLR 配体配体TAA s-FlagellinSOCS1-siRNA: 解除解除DC免疫耐受免疫耐受(persistent and enhanced Signals 2/3)肿瘤相关抗原肿瘤相关抗原(tumor-associated antigen , TAA) intracellular Survivin (T cells) surface MUC1 (T ce

21、lls and Ab) 分泌型分泌型FliC: TLR5 ligand auto- and paracrine activation of APCs(enhanced Signals 2/3) siSOCS1-TTiAPA技术治疗肿瘤技术治疗肿瘤iAPA-细胞细胞与传统免疫细胞治疗相比，与传统免疫细胞治疗相比，iAPA技术的优势技术的优势n 结构新颖结构新颖：iAPA因子包含抑制因子包含抑制SOCS1的的siRNA、肿瘤抗原（、肿瘤抗原（Survivin, muc1）和鞭毛蛋白。）和鞭毛蛋白。n 机制新颖机制新颖：iAPA技术不但针对性增强技术不但针对性增强DC免疫活性，而且去除了免疫负性免疫

22、活性，而且去除了免疫负性调控因素，从而更有效的增强了免疫效应。调控因素，从而更有效的增强了免疫效应。n 创新靶点创新靶点：iAPA技术作用的靶点独创性针对免疫活化通络上的关键性分子技术作用的靶点独创性针对免疫活化通络上的关键性分子iAPA分子分子-SOCS128292022年3月1日星期二 iAPA技术完全打破了传统的免疫治疗理念与方法，代表了免疫学理技术完全打破了传统的免疫治疗理念与方法，代表了免疫学理论的一场新的革命，为国际首创、世界一流。许多研究成果已分别发表在国论的一场新的革命，为国际首创、世界一流。许多研究成果已分别发表在国际一流权威杂志，包括际一流权威杂志，包括Nature bio

23、technology、Nature medicine与与JCI等。等。2008年年3月第月第14期期2004年年12月第月第22期期2006年年1月第月第116期期基础研究：国际首创世界一流为国际医学界所公认基础研究：国际首创世界一流为国际医学界所公认 CTL(Cytotoxic T Lymphocyte)，细胞毒性，细胞毒性T细胞细胞，其表面标志是其表面标志是CD8。这些细胞。这些细胞的功能就像一个的功能就像一个“杀手杀手”，它，它们可以直接攻击们可以直接攻击，在抗病毒感染和抗，在抗病毒感染和抗肿瘤免疫中具有极其重要的用，肿瘤免疫中具有极其重要的用，细胞毒性细胞毒性T细胞也被称为杀手细胞也被

24、称为杀手T细胞。细胞。七、七、CTL细胞细胞 肿瘤浸润淋巴细胞（肿瘤浸润淋巴细胞（Tumor Infiltrating Lymphocytes，TIL）是通是通过采集患者过采集患者胸腔积水或者腹水胸腔积水或者腹水，经，经过体外激活扩增培养，得到的一种过体外激活扩增培养，得到的一种在生理条件下能够杀伤肿瘤细胞的在生理条件下能够杀伤肿瘤细胞的细胞群。它是新一代的特异性免疫细胞群。它是新一代的特异性免疫活性细胞疗法，具有高效、特异、活性细胞疗法，具有高效、特异、副作用小等优点，可有效辅助恶性副作用小等优点，可有效辅助恶性肿瘤的治疗。肿瘤的治疗。八、八、TIL细胞细胞TIL细胞流程及适应症细胞流程及适

25、应症TIL细胞的适应症：细胞的适应症：适用于顽固性恶性胸腹水。适用于顽固性恶性胸腹水。临床信息部临床信息部临床应用及案例临床应用及案例一例晚期肝癌患者实现一例晚期肝癌患者实现6年带瘤生存年带瘤生存Hepatology (28),5,1436-7,1998.n患者：患者：n62岁，男性，丙肝，肝癌岁，男性，丙肝，肝癌Child B级，约级，约7厘米大小。已出现右门静脉肿瘤栓塞和右肾转移（厘米大小。已出现右门静脉肿瘤栓塞和右肾转移（T4N0M1,B期）该肿瘤已无法切除。该患者因此接受了质子照射治疗，治疗后肿瘤出现坏死并且体积缩期）该肿瘤已无法切除。该患者因此接受了质子照射治疗，治疗后肿瘤出现坏死并

26、且体积缩小至原来的小至原来的50%。nCIK治疗：治疗：n放射治疗之后放射治疗之后n患者每患者每12月应用一次过继性免疫治疗月应用一次过继性免疫治疗n平均每次回输细胞平均每次回输细胞1.40.510（10）n绝大多数为绝大多数为T细胞标记阳性（细胞标记阳性（95%2% CD3+，902%CD3+/HLA-DR+，61%9% CD8+，39%8% CD4+）且对）且对Daudi细胞具有细胞毒活性的细胞。细胞具有细胞毒活性的细胞。n细胞回输在细胞回输在6年内共为年内共为53次完成（平均次完成（平均5-6周一次回输）周一次回输）n累计回输细胞总数为累计回输细胞总数为7.310（11）n结果：结果：n

27、获得了获得了6年无复发生存，整个过程没有出现治疗相关的不良反应。在长期观察中，该患者健康状况良好，年无复发生存，整个过程没有出现治疗相关的不良反应。在长期观察中，该患者健康状况良好，未出现肝癌的复发，且肝功能好转。未出现肝癌的复发，且肝功能好转。放疗后，回输自体放疗后，回输自体T细胞，肿瘤于细胞，肿瘤于1994年中期消失，年中期消失，6年无复发。年无复发。AFP和和AST持续降低，处于正常范围内，持续降低，处于正常范围内，HCV-RNA降低。降低。胰腺癌广泛肝转移胰腺癌广泛肝转移男性，男性，38岁。胰腺癌广泛肝转移；岁。胰腺癌广泛肝转移；KPS100分分2008.08：TACE1次后，分子靶向

28、治疗次后，分子靶向治疗+CIK 1次次/2周周+健择健择 1次次/周；周；2008.10：MR; 肝转移灶减少、缩小肝转移灶减少、缩小2009.02：SD；肝转移进一步减少、缩小；肝转移进一步减少、缩小301医院医院肺腺癌病人经一个疗程肺腺癌病人经一个疗程DC+CIK后的后的CT结果结果治疗前治疗前治疗后治疗后青岛市中心医院青岛市中心医院 肺泡癌经过肺泡癌经过3个疗程个疗程DC+CIK治疗后的治疗后的CT图图像像n 治疗前治疗前治疗后治疗后青岛市中心医院青岛市中心医院过继性免疫治疗降低肝癌术后复发率的随机对照试验过继性免疫治疗降低肝癌术后复发率的随机对照试验治疗方法治疗方法n 肝癌术后患者，分

29、为肝癌术后患者，分为2组，组，CIK治疗组治疗组76人，不进行任何治疗组，人，不进行任何治疗组，74人。人。n 手术前一天采血手术前一天采血50ml用于细胞培养，冻存用于细胞培养，冻存2*108细胞用于后续细胞培细胞用于后续细胞培养；养；n 术后第术后第2、3、4、12、24周回输细胞，平均每次治疗回输周回输细胞，平均每次治疗回输1.5*1010细细胞，每个病人平均回输胞，每个病人平均回输7.1 *1010细胞；细胞；n 不进行其他任何治疗。不进行其他任何治疗。术 后复发期間免疫群（76例）（）対照群（74例）降低比率5年以内复发45(59%)57(77%)18%2年以内复发25(33%)40

30、(54%)21%治疗结果治疗结果副反应副反应不良反应不良反应免疫治疗组免疫治疗组 (n=76)(n=76)* *细胞回输次数细胞回输次数 (n=370)(n=370)发热36 (47%)50 (14%)头痛3 (4%)5 (1%)恶心3 (4%)4 (1%)头晕1 (1%)1 (0.3%)搔痒1 (1%)1 (0.3%)心动过速1 (1%)1 (0.3%)总体45 (59%)62 (17%)u免疫细胞治疗的不良反应以自限性低烧为主，一般发生在回输后免疫细胞治疗的不良反应以自限性低烧为主，一般发生在回输后4-8小时，体温一般小时，体温一般38 左右，发热在左右，发热在2-4小时内可缓解，不需特殊

31、处理，对体温超过小时内可缓解，不需特殊处理，对体温超过38.5的患者可用退烧的患者可用退烧药解除症状（如消炎痛栓药解除症状（如消炎痛栓100mg塞肛）。塞肛）。u其他不良反应，如头痛、恶心、头晕、瘙痒、心动过速、关节疼痛等较为少见，出现其他不良反应，如头痛、恶心、头晕、瘙痒、心动过速、关节疼痛等较为少见，出现时可对症处理。时可对症处理。CIK治疗转移性肾癌的随机试验治疗转移性肾癌的随机试验转移性肾癌治疗现状转移性肾癌治疗现状n 预期不良：中位生存期预期不良：中位生存期12个月，个月，5年生存率不到年生存率不到10%；n 放化疗、激素治疗耐受；放化疗、激素治疗耐受；n 极少数患者可以使用高剂量的

32、极少数患者可以使用高剂量的IL-2获得完全缓解，但是副作用极大；获得完全缓解，但是副作用极大；n 靶向药物：靶向药物：sunitinib， sorafenib， temsirolimus，bevacizumab等成为一线治疗方式，但是仅仅是姑息治疗，很少能达到完全缓解。等成为一线治疗方式，但是仅仅是姑息治疗，很少能达到完全缓解。入选标准入选标准n进展且不可切除的转移性肾癌；进展且不可切除的转移性肾癌；n预期生存期大于预期生存期大于3个月；个月；nKPS评分大于评分大于40%；n血清胆红素、肌酸酐小于正常上限的血清胆红素、肌酸酐小于正常上限的1.25倍；倍；n无充血性心衰、严重的冠心病、心律不齐

33、、无充血性心衰、严重的冠心病、心律不齐、HIV感染、慢性肝炎、糖皮质激素治疗；感染、慢性肝炎、糖皮质激素治疗；n治疗前治疗前1个月未进行化疗及免疫调节治疗；个月未进行化疗及免疫调节治疗；n孕妇或哺乳期的妇女；孕妇或哺乳期的妇女；n共入选共入选148名患者，分成名患者，分成CIK组和组和IL-2、IFN-2a组组平均平均10 cycles，2-35 cycles治疗结果治疗结果CRPRSDPD客观反应率客观反应率（ORR）3y-PFS3y-OSCIK组（74人）13（18%）26（35%）25（34%）10（14%）53%18%61%IL-2和IFN-2a组（74人）5（7%） 15（20%）2

34、5（34%）29（39%）27%12%23%两组的副作用比较两组的副作用比较微创联合微创联合CIK降低了肝癌的短期复发率降低了肝癌的短期复发率患者入组患者入组肿瘤大小肿瘤大小2-13cm；无肿瘤堵塞门静无肿瘤堵塞门静脉；脉；无远端转移；无远端转移；Child-Pugh A、B；KPS大于大于90。治疗组治疗组45人；人；对照组对照组40人；人；治疗方案治疗方案n 所有患者都进行连续的所有患者都进行连续的TACE和和RFAn 之后每之后每14天连续回输天连续回输CIK，每次，每次1-1.5*1010n 39位患者回输位患者回输8次次n 6位患者回输位患者回输10次次治疗结果治疗结果CD3+CD4

35、+CD56+CD3+CD56+CD8+CD4/CD8治疗前68.6 11.0% 31.1 9.0% 15.6 7.9% 5.2 3.1% 31.1 7.8%1.1 0.5 治疗后70.7 10.1%33.5 8.0%18.4 9.4%5.9 2.8%28.6 8.3%1.3 0.7治疗前后患者外周血淋巴细胞亚群变化治疗前后患者外周血淋巴细胞亚群变化无复发生存率（无复发生存率（RFS）6个月个月12个月个月18个月个月治疗组93.3%91.1%74.4%对照组90.0%70.0%60.0%增加的增加的CIK回输次数降低了胃癌患者死亡的风险回输次数降低了胃癌患者死亡的风险患者分组患者分组手术后手术

36、后156位患位患者分为两组，者分为两组，Group I：化疗：化疗组；组；Group II：化疗：化疗+CIK组组治疗方式治疗方式n 化疗组：化疗组：oxaliplatin (120 mg/m2 D1, 5-Fu 400 mg/m2 CIV 24 h D1-5, CF 200 mg/m2 D1-5)n 化疗化疗+CIK组：组：6周期的化疗后回输周期的化疗后回输CIK，每次，每次1*109治疗结果治疗结果确诊为恶性肿瘤；确诊为恶性肿瘤；生活自理，卡氏体力状况评分标准生活自理，卡氏体力状况评分标准60分以上；分以上；预期生存期预期生存期3个月的患者；个月的患者；实验室检查必须符合下列条件：实验室检

37、查必须符合下列条件： 淋巴细胞绝对值淋巴细胞绝对值0.8*109/L，PLT 50*109/L，HGB 70g/L；5. 病人有自知能力，能签署知情同意书；病人有自知能力，能签署知情同意书； 术前采血培养，术后术前采血培养，术后2-7天回输，提高免疫力，机体恢复快，防止复发和转移天回输，提高免疫力，机体恢复快，防止复发和转移 化疗前采血培养冻存，给药后化疗前采血培养冻存，给药后3-7天回输（根据化疗方案配合），提高机体免天回输（根据化疗方案配合），提高机体免疫力，增加药物敏感性，降低药物毒副作用，进一步抑制或杀伤癌细胞疫力，增加药物敏感性，降低药物毒副作用，进一步抑制或杀伤癌细胞放疗前采血培养

38、冻存，放疗疗程结束后当天回输放疗前采血培养冻存，放疗疗程结束后当天回输放疗疗程间歇期回输（例如，周五放疗后给细胞，周一开始放疗）放疗疗程间歇期回输（例如，周五放疗后给细胞，周一开始放疗）提前采血，靶向药物使用后的第提前采血，靶向药物使用后的第2天回输天回输采血培养，采血培养，14天后回输，间隔天后回输，间隔3天，天，2次次/疗程，连续使用至少疗程，连续使用至少3个疗程个疗程目前目前CIK/DC-CIK/AIL治疗的疗程治疗的疗程 在支持治疗的基础上，在支持治疗的基础上， 。权威专家指出权威专家指出 免疫细胞治疗肿瘤不要按疗程，要从所回输的细胞质量上看疗免疫细胞治疗肿瘤不要按疗程，要从所回输的细

39、胞质量上看疗效，一个免疫细胞治疗周期回输有效效，一个免疫细胞治疗周期回输有效，最好能，最好能达到甚至超过达到甚至超过1x1010。60采血前检查采血前检查 进行患者筛查：包括乙肝、丙肝、艾滋病毒、梅毒等感染。极晚期进行患者筛查：包括乙肝、丙肝、艾滋病毒、梅毒等感染。极晚期患者需进行血培养检查，以排除患者菌血症。（艾滋病阳性患者不患者需进行血培养检查，以排除患者菌血症。（艾滋病阳性患者不能进行细胞培养；菌血症患者不能进行细胞培养）。能进行细胞培养；菌血症患者不能进行细胞培养）。 检查患者血常规，根据淋巴细胞比例和淋巴细胞绝对值决定患者采检查患者血常规，根据淋巴细胞比例和淋巴细胞绝对值决定患者采血

40、量。血量。 采血量（采血量（mL）=80/淋巴细胞绝对值数值淋巴细胞绝对值数值 采血前没有任何感染、发热（肿瘤热除外）以及心、肝、肺、肾功采血前没有任何感染、发热（肿瘤热除外）以及心、肝、肺、肾功能异常。能异常。采血注意事项采血注意事项 采血当日采血当日 尽量空腹采血尽量空腹采血，若采血时间较晚也可适当进食，但勿食用油腻食物或进食，若采血时间较晚也可适当进食，但勿食用油腻食物或进食过量，且最好在进食过量，且最好在进食2-3小时后采血。小时后采血。 采血前不能输液采血前不能输液。 手术病人手术病人应术前取血应术前取血；化疗病人应在化疗疗程；化疗病人应在化疗疗程开始前取血或化疗后血象恢开始前取血或

41、化疗后血象恢复正常后取血复正常后取血；放疗病人应在放疗疗程；放疗病人应在放疗疗程开始前取血或放疗后血象恢复正常开始前取血或放疗后血象恢复正常后取血后取血。 采血前请用碘酊消毒采血管采血前请用碘酊消毒采血管/袋接触采血针处；取血后袋接触采血针处；取血后颠倒混匀颠倒混匀，但不能剧，但不能剧烈晃动。烈晃动。 血样保存于血样保存于10-20的环境中，采血管垂直放置，采血袋水平放置的环境中，采血管垂直放置，采血袋水平放置，待接，待接收人员取样。收人员取样。采血注意事项采血注意事项 。 细胞输注之前将细胞悬液在细胞输注之前将细胞悬液在，使细胞充分混匀，使细胞充分混匀 建议在建议在 ，。各医院可酌情处理。建

42、议在输注细胞前，。各医院可酌情处理。建议在输注细胞前，。 选择较好的血管做好静脉穿刺，使用选择较好的血管做好静脉穿刺，使用输血器输血器，应先输注，应先输注，（，（目目的：将管路用生理盐水湿润，减少细胞损失的：将管路用生理盐水湿润，减少细胞损失）。将细胞悬液在手中）。将细胞悬液在手中摇晃摇晃5-10下下，使细胞充分混匀，将输血器针头换到细胞输注袋进行静脉输注，使细胞充分混匀，将输血器针头换到细胞输注袋进行静脉输注，1小时内将细胞全部滴完。小时内将细胞全部滴完。回输注意事项回输注意事项 细胞细胞输血器管路应输血器管路应全部悬挂，全部悬挂，严禁有水平放置部分严禁有水平放置部分，防止细胞沉淀。全部，防

43、止细胞沉淀。全部滴净管路中的细胞。滴净管路中的细胞。 细胞滴注中如出现细胞滴注中如出现。细胞滴注后，患者应住院观察。细胞滴注后，患者应住院观察8-24小时，小时，注意休息，注意休息，当日不洗澡，防止注射部位感染。当日不洗澡，防止注射部位感染。 。 不饮酒及食用海鲜、蛋白类等刺激或易引起过敏反应的食不饮酒及食用海鲜、蛋白类等刺激或易引起过敏反应的食物。物。回输注意事项回输注意事项二、制定适合病人的个体化体细胞二、制定适合病人的个体化体细胞免疫治疗方案免疫治疗方案（一）（一）针对老年肿瘤晚期患者，体质弱、免疫功能极针对老年肿瘤晚期患者，体质弱、免疫功能极度低下采取抽少量血多次回输的治疗方案度低下采

44、取抽少量血多次回输的治疗方案抽血抽血30-40ml30-40ml外周血外周血第第1 1天天第第3 3次次CIKCIK回输回输第第2 2次次CIKCIK回输回输第第4 4天天第第8 8天天第第1212天天第第1414天天第第1616天天开始下一个疗程的治疗开始下一个疗程的治疗第第1 1次次CIKCIK回输回输( (二）二）化疗联合细胞治疗的增效方案化疗联合细胞治疗的增效方案化疗前化疗前1天抽血天抽血50ml，进行进行CIK或或D-CIK免疫免疫细胞培养细胞培养第一周第一周第二周第二周7天天第第1次开次开始化疗始化疗第第2次开次开始化疗始化疗回输回输CIK或或D-CIK等细胞等细胞化疗前化疗前1天

45、抽血天抽血50ml，进行，进行CIK或或D-CIK免疫细胞培免疫细胞培养养（三）（三）体细胞免疫治疗联合放疗的增效方案体细胞免疫治疗联合放疗的增效方案放疗前抽外放疗前抽外周血周血50ml50ml，上午放疗前上午放疗前放放疗疗放放疗疗放放疗疗两周后，当两周后，当天放疗后回天放疗后回输免疫细胞输免疫细胞第第2天天周二周二第第3天天周三周三第第1天天周一周一第第4天天周四周四第第6天天周六周六第第7天天周日周日第第5天天周五周五回输培养回输培养的的CIK、NK、D-CIK等细等细胞胞休休息息休休息息（四）（四）抗肿瘤效应细胞交替使用方案抗肿瘤效应细胞交替使用方案第二周第二周D-CIKD-CIK第三周

46、第三周NKNK第四周第四周D-CIKD-CIK抽抽血血30ml回回输输NKNK抽抽血血50ml抽血抽血30ml，回输回输NK细细胞胞抽血抽血50ml，回输回输D-CIK细细胞胞第五周第五周NKNK第六周第六周D-CIKD-CIK回回输输D-D-CIKCIK第一周第一周NKNKThreshold for tumor regressionImmunestimulation/inflammationSpontaneous release of immune modulatorsby tumor cellsSpontaneous regression/response totherapyTumor p

47、rogressionAntigen-specific Immunization，生物靶向药物 （抗肿瘤抗体和小分子化合物）Non-specific immune stimulationNK cells，CIK cells，D-CIK,IL-2.IFN-（六）（六）体细胞免疫治疗联合肿瘤常规治疗的基本原则体细胞免疫治疗联合肿瘤常规治疗的基本原则恶性肿瘤恶性肿瘤手术治疗手术治疗u放化疗敏感放化疗敏感 (常规放化疗常规放化疗)u放化疗间隙联合细胞免疫放化疗间隙联合细胞免疫治疗治疗（卵巢癌，乳腺癌，小细胞（卵巢癌，乳腺癌，小细胞肺癌和鼻咽癌等）肺癌和鼻咽癌等）疾病稳定期疾病稳定期 专科治疗专科治疗（微创介入）（微创介入） 不能手术（不能手术（期，期，期）期）复发者复发者 可手术可手术 放化疗不敏感放化疗不敏感 （肾癌，前列腺癌，黑色素（肾癌，前列腺癌，黑色素瘤和肝癌等）瘤和肝癌等）细胞免疫治疗细胞免疫治疗 细胞免疫治疗细胞免疫治疗 联合专科治疗联合专科治疗（靶向治疗）（靶向治疗）细胞免疫治疗细胞免疫治疗联合内分泌或联合内分泌或靶向治疗，细靶向治疗，细胞因子治疗胞因子治疗 细胞免疫治疗细胞免疫治疗化疗不敏感化疗不敏感（原发性