微生物的分离和培养的一轮复习

1、微生物的分离和纯培养技术考试说明要求热点提示微生物的分离和培养 A1、 了解有关培养基的基础知识2、 学习无菌技术的操作一、培养基1、培养基的概念：人们按照_对营养物质不同的_，配制出供其生长繁殖的_叫培养基。根据其物理状态，一般分为_和固体培养基。在液体培养基中加入凝固剂_后，就能制成_2、培养基的营养成分：各种培养基的配方不同，但一般都含有 _ 、 、 、和 _等最基本的生命物质。在此基础上还要满足微生物生长对_、特殊营养物质以及_的要求。二、无菌技术1、消毒方法：_、_、化学药剂消毒法2、灭菌方法：_灭菌、_灭菌、_灭菌【思考】无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外，还

2、有什么目的？【思考】请选用合适的方法为下列材料或用具进行消毒或灭菌（1）培养细菌用的培养基与培养皿。_（2）玻棒、试管、烧瓶和吸管。_（3）实验操作者的双手。_三、分离和纯培养大肠杆菌的实验操作1、制备培养大肠杆菌的培养基：即牛肉膏蛋白胨固体培养基，一般步聚：计算、_、_、_、倒平板。2、接种和纯化大肠杆菌平板划线法：是通过_在琼脂固体培养基表面划线的操作，将聚集的菌种_到培养基表面。在数次划线后培养，可以分离到由_个大肠杆菌繁殖而来的肉眼可见的菌落稀释涂布平板法：是将菌液进行_稀释，再将不同稀释度的菌液_涂布到琼脂_培养基的表面进行培养。在涂布稀释度_的培养基表面上可获得单个菌落。课题延伸：

3、对于频繁使用的菌种我们可以采用_的方法，但这种方法保存的时间不长，菌种易被污染或产生变异，需长期保存的菌种可采用_的方法放在_的冷冻箱中保存。【讨论】1、平板划线时，为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环？在划线操作结束时，仍然需要灼烧接种环吗？为什么？答：操作的第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养物；每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后，接种环上残留的菌种，使下一次划线时，接种环上的菌种直接来源于上次划线的未端，从而通过划线次数的增加，使每次划线时菌种的数目逐渐减少，以便得到单个菌落。划线结束后灼烧接种环，能及时杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染环

4、境和感染操作者。2、在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后再划线？答：以免接种环温度太高，杀死菌种。3、在作第二次以及其后的划线操作时，为什么总是从上一次划线的末端开始划线？答：划线后，线条末端细菌的数目比线条起始处要少，每次从上一次划线的末端开始，能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少，最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌落。【成果与评价】（一） 培养基的制作是否合格如果未接种的培养基在恒温箱中保温12天后无菌落生长，说明培养基的制备是成功的，否则需要重新制备。（二） 接种操作是否符合无菌要求如果培养基上生长的菌落的颜色、形状和大小基本一致，并符合大肠杆菌的菌落特点，则说明操作是符合要求的；如

5、果培养基上出现了其他菌落，则说明在接种过程中，无菌操作还未达到要求。（三） 是否进行发及时细致的观察与记录培养12h 与24h 的大肠杆菌菌落的大小会有明显不同，及时观察与记录的同学会发现这一点。【思考】比较无土栽培技术、植物组织培养技术、微生物培养技术在设计思路和具体操作上的异同【巩固练习】1、 下列物质中，不能用作酵母菌碳源的是A含碳有机物 B。蛋白胨 C。含碳无机物 D。花生粉饼等天然物质2、下面对发酵工程中灭菌的理解，不正确的是 A防止杂菌污染 B。灭菌就是杀死培养基中的杂菌 C培养基和发酵设备都必须进行灭菌、消毒 D。灭菌必须在接种前3、在光亮处用一种培养液分别培养绿藻和酵母菌，其结

6、果如图所示，造成这种结果的原因是培养液中 A缺少无机盐 B。含氧量太高 C。缺少有机养分 D。不含二氧化碳4、蓝藻常利用的碳源、氮源依次是 ACO2、氨基酸 B。氨基酸、葡萄糖 C。CO2、硝酸盐 D。葡萄糖、蛋白胨5、（多选）利用稀释涂布平板法纯化的大肠杆菌，经培养后发现培养基上出现发多种菌落，可能的原因是 A培养基制备过程中被杂菌污染 B。接种过程中，无菌操作不符合要求 C系列稀释时，无菌操作不符合要求 D。由大肠杆菌的种类不同造成的6、细菌培养基常在121压力锅中灭菌。如果只是在100的温度下将细菌培养基灭菌，以下哪种生物仍会存活 A大肠杆菌 B。一种青霉 C。炭疽杆菌芽孢 D。沙门氏菌

7、7、糖类是微生物最常用的碳源，因此在配制培养基时 A糖类越多越好 B。糖类越少越好 C异养型微生物尽可能多提供糖类 D。自养型微生物不用供应糖类8、将接种后的培养基和一个未接种的培养基都放入37恒温箱的目的是 A对比观察培养基有没有被微生物利用 B对比分析培养基上是否生有杂菌 C没必要放入未接种的培养基 D。为了下次接种时再使用9、有关稀释涂布平板法，叙述错误的是 A首先将菌液进行一系列的梯度稀释 B然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面 C适宜条件下培养 D结果都可在培养基表面形成单个菌落10、为了保持菌种的纯净需要进行菌种的保藏，下列有关叙述不正确的是 A对于频繁使用的菌种，

8、可以采用临时保藏的方法 B临时保藏的菌种一般是接种到试管的固体斜面培养基上 C临时保藏的菌种容易被污染或产生变异 D对于需要长期保存的菌种，可以采用-4低温保藏的方法11、培养基是人工配制的适合不同微生物生长繁殖或积累代谢产物的营养物质。先用完全培养基培养混合菌种，然后分别放在A、B、C三种特殊培养基上培养，分别得到菌落、。其中A培养基以蛋白质为唯一碳源；B培养基中缺氮源；C培养基中成分如下表：成分粉状硫MgSO4.7H2O(NH4)2 SO4Fe SO4KH2P O4CaCl2H2O含量10g0.5g0.4g0.01g4g25g1000ml请分析回答：（1）菌落同化作用类型最可能是_ A光能

9、自养型 B。化能自养型 C。异养型 D。A或B（2）如果要获得具有固氮能力的菌株，应选用菌落_；如果要培育获得大量蛋白酶的菌株，应选用菌落_（3）从题中分析可见，生物进化的内在因素是_。12、在当前国家农业结构调整过程中，政府鼓励农民依靠科技致富。食用菌的栽培是其中一项热门技术。首先对食用菌栽培室进行清扫和消毒处理，准备食用菌栽培所需的各种原料和用具，然后从菌种站购来各种食用菌菌种。培养蘑菇时常使用的原料为棉籽壳、花生饼粉、朽木等，再喷洒适量的水，加入一定量的尿素等。请简答下列问题：（1）蘑菇培养基（菌床）中要加入大量的有机质。原因是_（2）菌床在接种前要进行灭菌处理，否则很容易长出大量的霉菌。霉菌与蘑菇的关系一般为_（3）培养过程中发现培养