在检测注射用抗菌药物细菌内毒素中动态浊度法的应用

1、在检测注射用抗菌药物细菌内毒素中动态浊度法的应用              【关键字】医学，检查法，药物作者：刘军 龚文明 叶琳 潘洁【关键词】  动态浊度法摘要：目的：介绍目前国内应用KTA检测注射用抗菌药物细菌内毒素的研究情况，为同类研究提供参考。方法：依据国内发表的文献资料，对KTA检测注射用抗菌药物细菌内毒素方面的资料加以总结。结果：收集到14个品种KTA检测细菌内毒素的资料。结论：应加强应用KTA检测细菌内毒素方面的研究，使更多品种应用KTA检测

2、细菌内毒素，进一步提高注射用抗菌药物的质量。关键词：动态浊度法；细菌内毒素检查法；  注射用抗菌药物Application of KTA to Analyse for Bacterial Endotoxins of Antibacterial for InjectionAbstract:Objective:To introduce the research of using KTA to analyse for bacterial endotoxins of antibacterial for injection at present,and offer reference for

3、similar research.Methods:We summarize up the data using KTA to analyse for bacterial endotoxins of antibacterial for injection,on the published document and materials at home.Results: 14 variety materials were collected using KTA to analyse for bacterial endotoxins of antibacterial for injection.Con

4、clusion:We should strengthen the research of using KTA to analyse for bacterial endotoxins,make more varieties use KTA to analyse for bacterial endotoxins,and improve the quality of the antibacterial for injection furthermore.Key words:Kinetic-Turbidimetric Assay；Bacterial endotoxins test；Antibacter

5、ial for injection动态浊度法(Kinetic-Turbidimetric Assay，KTA)以其高灵敏度、更低的检测下限、准确的定量而成为细菌内毒素检查法的发展方向，2000年版中国药典部1收载了应用指导原则，因此在更广泛的范围内应用此方法，对提高药品质量有重要意义。抗菌药物是目前临床上用量最大、最广泛的一类药品，2000年版中国药典收载的注射用抗菌药物大部分采取家兔法检查热原。笔者收集了近年来国内期刊发表的KTA检测注射用抗菌药物细菌内毒素方面的资料，为今后在更广的范围内应用这项技术提供参考。1注射用头孢唑啉陶胜源等2用KT116鲎试剂(=0.0156EU ml1，规格：每

6、支1.2 ml，湛江安度斯生物有限公司)对样品(规格：每支0.5 g，齐鲁制药厂)进行添加内毒素回收实验，结果发现样品稀释至1mgml1时，内毒素回收率接近100%，表明该浓度下无干扰影响。同时做家兔热原法试验对比，结果定量法与其结果一致。结论：样品在1mgml1浓度时，用KTA检测其细菌内毒素含量是可行的。2 注射用头孢噻肟劳海燕等3用鲎试剂(=0.015EUml1，规格：每支1.2 ml，湛江安度斯生物有限公司)对样品(规格：每支1.0 g，德国赫斯特集团)进行干扰实验，发现样品稀释至1mgml1及其以下浓度时已无干扰，添加内毒素回收率在50%200%之间，日常检查采用0.3 mgml1，

7、标准曲线为logT=2.832 540.302 79 logC，相关系数为r=0.997。结论：样品稀释成10.3 mgml1，用KTA检测其细菌内毒素含量是可行的。3 注射用头孢曲松林秋晓等4用鲎试剂(=0.015EUml1，规格：每支1.2 ml，湛江安度斯生物有限公司)对样品(规格：每支1 000 mg，广药集团广州天心药业股份有限公司)进行定量检查。将样品稀释至5mgml1时添加内毒素回收率为58.7%，表明已无干扰，正式实验将样品稀释至1 mgml1进行。结论：样品稀释至1 mgml1时，用KTA进行细菌内毒素检查是可行的。4 注射用头孢他啶劳海燕等5用鲎试剂(=0.015EUml1

8、，规格：每支1.2 ml，湛江安度斯生物有限公司)对样品(规格：每支1.0 g，广药集团广州天心药业股份有限公司)进行添加内毒素干扰预试验，发现样品最佳检测浓度为1 gL1。样品稀释至1 gL1时正式干扰试验表明，定量添加内毒素的回收率在50%200%之间，无干扰作用。结论：KTA可以高效地测定头孢他啶的细菌内毒素含量。5 注射用头孢呋辛劳海燕等6用鲎试剂(=0.015EUml1，规格：每支1.2 ml，湛江安度斯生物有限公司)对样品(规格：每支750 mg，GlaxoWellcome公司）进行添加内毒素干扰预实验，发现样品最佳检测浓度为1mgml1样品稀释至1mgml1时正式干扰实验表明，定

9、量添加内毒素的回收率在50%200%之间，样品对鲎试剂反应无干扰作用。结论：KTA可以高效地测定头孢呋辛的细菌内毒素含量。6 盐酸左氧氟沙星注射液苑庆华等7用鲎试剂(=0.015EUml1，规格：每支1.25 ml，湛江安度斯生物有限公司)对样品(规格：100 ml：0.1 g，重庆莱美药业有限公司)进行添加内毒素回收试验及凝胶法实验对比，结果表明，样品稀释4倍时可完全排除干扰，内毒素回收率在50%200%范围内。结论：样品稀释4倍时可用KTA测定其细菌内毒素含量。7  氟罗沙星注射液顾炳仁等8用鲎试剂(=0.06EUml1，湛江安度斯生物有限公司)对3批样品(规格：5 ml：400

10、 mg，苏州长征欣凯制药有限公司)进行添加细菌内毒素回收试验及热原检查实验，结果表明，样品120倍稀释时，样品的细菌内毒素回收率在50200范围内，提示定量法值得推广应用。8 氧氟沙星注射液邓颖等9首先确定样品(规格：2 mgml1，分别为四个不同厂家)的细菌内毒素限值L=1.5EUml1，MVD=48倍，鲎试剂=0.031EUml1(规格：每支1.2 ml，湛江安度斯生物有限公司)。干扰实验表明，样品4倍稀释液添加细菌内毒素回收率在50%200%范围内，无干扰，且定量法结果与热原检查法一致。结论：样品4倍稀释液可用KTA检查细菌内毒素浓度。    &#

11、160;   9 乳酸环丙沙星注射液顾炳仁等10用鲎试剂(=0.06EUml1，湛江安度斯生物有限公司)检测样品(规格：5 ml：200 mg，苏州长征欣凯制药有限公司)，添加细菌内毒素回收试验及热原检查对比实验表明，样品240倍稀释时，细菌内毒素回收率在50%200%范围内，无干扰影响。结论：样品稀释240倍后可用KTA进行细菌内毒素定量测定。10 硫酸奈替米星注射液林江平等11用鲎试剂(=0.015EUml1，规格：每支1.2 ml，湛江安度斯生物有限公司)对样品(规格：50 mgml1，浙江震元制药有限公司)进行添加内毒素干扰实验，发现样品40100倍稀释液

12、定量添加内毒素的回收率在50%200%之间，样品对鲎试剂反应无干扰作用。结论：样品40100倍稀释液可用KTA检测细菌内毒素含量。11硫酸庆大霉素注射液张路晗等12通过添加细菌内毒素干扰试验证明，样品稀释至312.5uml1及其以下浓度时，对鲎试剂(=0.03EUml1，规格：每支0.5 ml)反应无干扰作用，可用KTA检查样品细菌内毒素浓度。12 替硝唑注射液苑庆华等13分别用两个厂家鲎试剂(=0.03EUml1，规格：每支2.1 ml，福州新北生化有限公司；=0.015EUml1，规格：每支1.25 ml，湛江安度斯生物有限公司)，对6批样品(规格：100 ml：400 mg)进行添加内毒

13、素干扰实验，结果表明，样品稀释2倍后，内毒素回收率在50%200%之间，样品对鲎试剂反应无干扰作用，且定量法检测结果与凝胶法一致。结论：样品稀释2倍时可用KTA检测细菌内毒素含量。13 替硝唑葡萄糖注射液邓颖等14对样品(规格：100 ml：0.4 g替硝唑：5 g葡萄糖)KTA检测结果是：将样品稀释至0.5mgml1(替硝唑含量)时，用鲎试剂(=0.031EUml1，规格：每支1.2 ml，湛江安度斯生物有限公司)进行定量检测可行。14 氯霉素注射液詹云丽等15首先确定样品(规格：2 ml：0.25 g)内毒素限值=0.2EUmg1，MVD=800倍(鲎试剂=0.0313EUml1，规格：每

14、支0.15 ml，厦门鲎试剂厂)。干扰实验表明，样品100倍稀释液添加内毒素回收率在50%200%之间，无干扰作用。且定量检测结果与热原检查一致。结论：样品100倍稀释液可用KTA定量检测细菌内毒素含量。参考文献：1国家药典委员会.中国药典，部S.北京：化学工业出版社，2000：附录204.2陶胜源，狄亚敏，金华，等.动态浊度法检测注射用头孢唑林钠中细菌内毒素J.解放军药学学报，2001，17(4)：185186.3劳海燕，罗宇芬，林秋晓 .动态比浊法测定头孢噻肟中细菌内毒素含量J. 沈阳药科大学学报，2002，19(2)：125128.4林秋晓，劳海燕，李智辉，等.定量法(动态比浊法)测定注

15、射用头孢曲松钠中细菌内毒素的研究J. 中国药科大学学报，2002，33(3)：260262.5劳海燕，罗宇芬，林秋晓 .注射用头孢他啶细菌内毒素定量法的研究J. 中国药理学通报，2002，18(1)：305308.6劳海燕，罗宇芬，林秋晓，等.注射用头孢呋辛中细菌内毒素动态比浊定量法的研究J. 中国抗生素杂志，2002，27(5)：283285.7苑庆华，孙淑莲，芮青，等.盐酸左氧氟沙星注射液中细菌内毒素的定量检查J. 华西药学杂志，2003，18(4)：286287.8顾炳仁，钱树德 . 动态浊度法定量检测氟罗沙星注射液中的细菌内毒素J. 江苏药学与临床研究，2002，10(1)：5556.9邓颖 . 氧氟沙星注射液细菌内毒素定量检查法研究J.天津药学，2001，13(5)：5455.10顾炳仁，钱树德.动态浊度法定量测试乳酸环丙沙星注射液中的细菌内毒素J. 中华临床医药，2002，3(1)：3738.11林江平，劳海燕.硫酸奈替米星注射液细菌内毒素定量法 (动态比浊)的研究J. 广东药学，2002，12(2)：2022.12张路晗，向