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文档简介
1、实验一实验一 显微镜的结构和使用显微镜的结构和使用(稳定镜身稳定镜身)(支持镜柱以支持镜柱以上的部件上的部件)(握镜的部位握镜的部位)(使物像清晰使物像清晰)(使物像更清晰使物像更清晰)( (用眼观察的镜头用眼观察的镜头) )( (接近物体的镜头接近物体的镜头) )(调节光线强弱调节光线强弱)(放置玻片标本放置玻片标本)( (使光线经过通使光线经过通光孔反射上来光孔反射上来) )(安装物镜安装物镜)(连接目镜和物镜连接目镜和物镜)(固定标本固定标本)电子显微镜与光学显微镜的基本区别电子显微镜与光学显微镜的基本区别 电子电子显微镜显微镜 光学光学显微镜显微镜分辨本领分辨本领200nm 接近接近0
2、.1nm可见光可见光透透 镜镜电子束电子束光光 源源玻璃透镜玻璃透镜电磁透镜电磁透镜细胞结构细胞结构显微显微结构结构亚显微亚显微 结构结构显微镜的使用 1、步骤:取镜、安放、对光、放置装片、使镜筒下降、低倍镜观察、将要观察的物像移至视野中央、高倍镜观察。 2 2、高倍镜使用要领、高倍镜使用要领观察时应先使用低倍镜,然后换用高倍镜。观察时应先使用低倍镜,然后换用高倍镜。换用高倍镜前,应先把要观察的目标移至视换用高倍镜前,应先把要观察的目标移至视野中央。野中央。换用高倍镜时,可直接转动转换器,使高倍换用高倍镜时,可直接转动转换器,使高倍物镜对准通光孔即可。物镜对准通光孔即可。换用高倍镜后,只可调节
3、细准焦螺旋对焦。换用高倍镜后,只可调节细准焦螺旋对焦。换用高倍镜后,若视野较暗,可调节光圈和换用高倍镜后,若视野较暗,可调节光圈和反光镜,使用大光圈或凹面反光镜以调亮视野。反光镜,使用大光圈或凹面反光镜以调亮视野。3.3.物镜和目镜的特征比较物镜和目镜的特征比较镜头镜头种类种类有无有无螺纹螺纹长度长度放大放大倍数倍数视野大小、视野大小、明暗明暗物镜物镜有有长长大大小而暗小而暗短短小小大而亮大而亮目镜目镜无无长长小小大而亮大而亮短短大大小而暗小而暗4.4.显微镜的放大倍数与成像规律显微镜的放大倍数与成像规律(1 1)放大倍数)放大倍数= =目镜放大倍数目镜放大倍数物镜放大倍物镜放大倍数。这里的放
4、大倍数指的是长度或宽度,而数。这里的放大倍数指的是长度或宽度,而不是面积或体积。不是面积或体积。(2 2)成像规律:显微镜下所成的像是倒立的)成像规律:显微镜下所成的像是倒立的虚像,上下左右均是颠倒的。例如若观察的虚像,上下左右均是颠倒的。例如若观察的实物为实物为“b b”,则显微镜视野中看到的物象是,则显微镜视野中看到的物象是“q q”;若物象偏向视野的右下方,则向右下;若物象偏向视野的右下方,则向右下方移动装片才能将其移至视野中央。方移动装片才能将其移至视野中央。5 5、污点位置判断、污点位置判断: : 分别转动镜头、移动装片分别转动镜头、移动装片, ,看污点是否随之而动看污点是否随之而动
5、6 6、临时装片的制作、临时装片的制作: : (3)放置玻片标本)放置玻片标本 (4)调节焦距)调节焦距 (2) 对光对光使用低倍显微镜的步骤:使用低倍显微镜的步骤: (1)取镜和放置)取镜和放置一)取一)取镜安放:镜安放:二)对光二)对光三)放置标本:三)放置标本:五)善后整理五)善后整理1、右手握住镜臂,左手托住镜座;、右手握住镜臂,左手托住镜座;2、轻拿轻放,并略偏左;、轻拿轻放,并略偏左;3、装好目镜和物镜。、装好目镜和物镜。1、扭动转换器,使镜头(低倍镜)、镜筒和通、扭动转换器,使镜头(低倍镜)、镜筒和通光孔成一直线;光孔成一直线;2、根据光线强弱,调节反光镜和遮光器(光圈)、根据光
6、线强弱,调节反光镜和遮光器(光圈)四)调焦观察四)调焦观察玻片标本放置要正对通光孔的中央,用玻片标本放置要正对通光孔的中央,用押片夹固定押片夹固定1、将显微镜外表擦拭干净、将显微镜外表擦拭干净2、转动转换器,把两物镜偏到旁边,并、转动转换器,把两物镜偏到旁边,并下调镜筒至最低,送回镜箱。下调镜筒至最低,送回镜箱。调焦、调整玻片(重点注意事项)调焦、调整玻片(重点注意事项) (1)取镜和放置:显微镜平时存放在柜或箱 中,用时从柜中取出,右手紧握镜臂,左一手托住镜座,将显微镜放在自己左肩前方的实验台上,镜座后端距桌边12寸为宜,便于坐着操作。 (2)对光:用拇指和中指移动旋转器(切忌手持物镜移动)
7、,使低倍镜对准镜台的通光孔(当转动听到碰叩声时,说明物镜光轴已对准镜筒中心)。打开光圈,上升集光器,并将反光镜转向光源,以左眼在目镜上观察(右眼睁开),同时调节反光镜方向,直到视野内的光线均匀明亮为止。 (3)放置玻片标本:取一玻片标本放在镜台上,一定使有盖玻片的一面朝上,切不可放反,用推片器弹簧夹夹住,然后旋转推片器螺旋,将所要观察的部位调到通光孔的正中。 (4)调节焦距:以左手按逆时针方向转动粗调节器,使镜台缓慢地上升至物镜距标本片约5毫米处,应注意在上升镜台时,切勿在目镜上观察。一定要从右侧看着镜台上升,以免上升过多,造成镜头或标本片的损坏。然后,两眼同时睁开,用左眼在目镜上观察,左手顺
8、时针方向缓慢转动粗调节器,使镜台缓慢下降,直到视野中出现清晰的物象为止。 高倍镜的使用方法 (1)选好目标:一定要先在低倍镜下把需进一步观察的部位调到中心,同时把物象调节到最清晰的程度,才能进行高倍镜的观察。 (2)转动转换器,调换上高倍镜头,转换高倍镜时转动速度要慢,并从侧面进行观察(防止高倍镜头碰撞玻片),如高倍镜头碰到玻片,说明低倍镜的焦距没有调好,应重新操作。 (3)调节焦距:转换好高倍镜后,用左眼在目镜上观察,此时一般能见到一个不太清楚的物象,可将细调节器的螺旋逆时针移动约0.51圈,即可获得清晰的物象(切勿用粗调节器!) 。 如果视野的亮度不合适,可用集光器和光圈加以调节,如果需要
9、更换玻片标本时,必须顺时针(切勿转错方向)转动粗调节器使镜台下降,方可取下玻片标本。 显微镜使用的注意事项(1) 1持镜时必须是右手握臂、左手托座的姿势,不可单手提取,以免零件脱落或碰撞到其它地方。 2轻拿轻放,不可把显微镜放置在实验台的边缘,以免碰翻落地。 3保持显微镜的清洁,光学和照明部分只能用擦镜纸擦拭,切忌口吹手抹或用布擦,机械部分用布擦拭。 4水滴、酒精或其它药品切勿接触镜头和镜台,如果沾污应立即擦净。 5放置玻片标本时要对准通光孔中央,且不能反放玻片,防止压坏玻片或碰坏物镜。 6要养成两眼同时睁开的习惯,以左眼观察视野,右眼用以绘图。 7不要随意取下目镜,以防止尘土落入物镜,也不要
10、任意拆卸各种零件,以防损坏。 8使用完毕后,必须复原才能放回镜箱内,其步骤是:取下标本片,转动旋转器使镜头离开通光孔,下降镜台,平放反光镜,下降集光器(但不要接触反光镜)、关闭光圈,推片器回位,盖上绸布和外罩,放回实验台柜内。 最后填写使用登记表。(注:反光镜通常应垂直放,但有时因集光器没提至应有高度,镜台下降时会碰坏光圈,所以这里改为平放)显微镜使用的注意事项(2) 先低后高(换高后只能用细准焦螺旋!)先放先低后高(换高后只能用细准焦螺旋!)先放低镜筒,再向上调节低镜筒,再向上调节成像规律成像规律:上下、左右颠倒(如何移动玻片):上下、左右颠倒(如何移动玻片)变化规律变化规律:图像变大、数量
11、减少、视野变暗:图像变大、数量减少、视野变暗 放大倍数放大倍数:物:物x x目目 指的是长度上的放大倍数指的是长度上的放大倍数巩固练习 1、2、3、4、5是使用显微镜的几个步骤。右图为显微镜观察中的两个视野,其中细胞甲为主要观察对象,由视野到视野时,操作过程的正确顺序是( )1转动粗准焦螺旋 2转动细准焦螺旋 3调节光圈 4转动转换器 5移动玻片A、1234 B、312 C、5432 D、34121目镜的长度与其扩大的倍数有关系吗,有何关系? 2物镜的长度与其扩大的倍数有关系吗,有何关系? 3请大家将镜臂向镜座方向移动,观察物镜的镜片, 问题:根据镜片的大小,是低倍镜还是高倍镜的视野大,视野明
12、亮?目镜的长度越长,扩大的倍数越小目镜的长度越长,扩大的倍数越小物镜的长度越长,扩大的倍数越大物镜的长度越长,扩大的倍数越大高倍镜的视野小,视野暗高倍镜的视野小,视野暗1 为什么要先用低倍镜观察清楚后把要放大观察的物象移至视野中央,再换高倍镜观察?2 用转化器转过高倍镜后,为何只能使用细准焦螺旋,而不能使用粗准焦螺旋呢?高倍镜视野小,而且转换高倍镜后,物像被放大,没有在低倍镜下移到中央,就会跑出视野外。 这是因为高倍镜的倍数越高,长度越长,离玻片的距离就越近,这是因为高倍镜的倍数越高,长度越长,离玻片的距离就越近,如果后粗准焦旋很容易将高倍镜的镜片和玻片压坏。如果后粗准焦旋很容易将高倍镜的镜片
13、和玻片压坏。首先,在载玻片上滴加一滴清水;首先,在载玻片上滴加一滴清水;第二,用镊子夹取一块单层细胞的材料或者撕取一层薄薄的材料第二,用镊子夹取一块单层细胞的材料或者撕取一层薄薄的材料放在载玻片上的清水中均匀展开。放在载玻片上的清水中均匀展开。最后是盖上盖玻片。最后是盖上盖玻片。实验材料: (1酵母菌溶液(2小白菜的叶表皮(3鱼的红细胞制备液一二实验记录细胞种类细胞种类 细胞壁细胞壁细胞膜细胞膜细胞器细胞器细胞核细胞核通过该表,大家归纳一下这些细胞在形态和结构上的共同点,通过该表,大家归纳一下这些细胞在形态和结构上的共同点,并描述它们的差异。并描述它们的差异。不同的细胞,其形态,大小千差万别。
14、不同的细不同的细胞,其形态,大小千差万别。不同的细胞有共同的结构:细胞膜、细胞质、细胞核。胞有共同的结构:细胞膜、细胞质、细胞核。这些细胞与大肠杆菌细胞结构的最主要的差别是大肠杆菌没这些细胞与大肠杆菌细胞结构的最主要的差别是大肠杆菌没有明显的细胞核,但有鞭毛。有明显的细胞核,但有鞭毛。 这些细胞与大肠杆菌在结构上有什么主要区别呢?这些细胞与大肠杆菌在结构上有什么主要区别呢?电镜下的大肠杆菌电镜下的大肠杆菌不同细胞之间存在差异性,分析产生差异的可能原因不同细胞之间存在差异性,分析产生差异的可能原因?不同的细胞在形态和结构千差万别,造成其差异性是因为这些细胞的位置和功能不同位置和功能不同,结构与功
15、能相适应,这是个体发育过程中细胞分化的结果细胞分化的结果。检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质试剂试剂成分成分实验现象实验现象常用材料常用材料蛋白质蛋白质双缩脲双缩脲A: 0.1g/mL NaOHA: 0.1g/mL NaOH紫色紫色大豆大豆鸡蛋鸡蛋B: 0.01g/mL CuSOB: 0.01g/mL CuSO4 4脂肪脂肪苏丹苏丹橘黄色橘黄色花生花生苏丹苏丹红色红色还原糖还原糖斐林(班斐林(班氏氏) )0.1g/mL NaOH0.1g/mL NaOH浅蓝色浅蓝色棕色棕色砖砖红色沉淀红色沉淀苹果、梨、苹果、梨、白萝卜白萝卜0.05g/mL CuSO0.05g/mL CuSO4 4淀粉淀粉碘液碘
16、液I I2 2蓝色蓝色马铃薯马铃薯可溶性还原糖的鉴定:制备组织样液(提取或分离出含还原可溶性还原糖的鉴定:制备组织样液(提取或分离出含还原性糖的过程)性糖的过程) 鉴定样液鉴定样液 (取样液(取样液2mL于试管中于试管中加刚配的斐林(班氏)试加刚配的斐林(班氏)试剂剂2mL水浴水浴2min左右左右观察颜色变化)观察颜色变化)蛋白质的鉴定:制备样液蛋白质的鉴定:制备样液(制备豆浆或稀释蛋清制备豆浆或稀释蛋清) 鉴定鉴定(试管中加样液试管中加样液2mL加加2mL双缩脲试剂双缩脲试剂A摇均摇均双缩脲双缩脲试剂试剂B试剂试剂34滴摇均滴摇均观察颜色变化观察颜色变化)脂肪的鉴定:制作切片(含脂肪量越高的组织越好,切片越脂肪的鉴定:制作切片(含脂肪量越高的组织越好,切片越薄越好)薄越好) 染色(滴苏丹染色(滴苏丹染液染液23滴切片上滴切片上23min后吸去染液后吸去染液滴体积分数滴体积分数50%的酒精洗去浮色的酒精洗去浮色吸去多余的酒精)吸去多余的酒精) 制作装片(滴制作装片(滴12水于材料切片上水于材料切片上盖上盖玻片)盖上盖玻片) 镜检鉴定(显微镜对光镜检鉴定(显微镜对光低倍镜观察低倍镜观察高倍镜观察)高倍镜观察)总结:三大类物质的鉴定步骤都是:取样总
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