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文档简介

1、细胞培养常用缓冲配制及保存(所需水全用合格的去离子水) Hanks液 用途:用于保存标本 产品编号:HA2004Y 产品规格:500ml 价格:120.00 配制:500ml (ddH2O)称量: NaCl. 4g KCl 0.2gMgSO4.7H2O .0.1g Na 2HPO4.12H2O. 0.067 gKH2PO4 .0.03 g CaCL.0.07 g葡萄糖 .0.5 g注意:A:在300-400ml水中依次溶解NaCl、KCl、MgSO4.7H2O、Na2HPO4.12H2O、KH2PO4、葡萄糖为A液。B:在约50ml水中溶解CaCL2为B液。C:将B液缓缓倒入A液中,同时搅拌,

2、为C液。D:在C液中加入1%酚红1ml,混均,加水至500ml,该液即为Hanks液,此液偏酸。消毒:10磅10分种高压消毒(消毒时压力波动不能大,否则葡萄糖会沉淀出来,消毒完毕,须等冷却方打开高压锅,以免液体冲出。)保存:4度。使用:在使用时加入5.6% NaHCO3调PH至7.2左右,然后加入10%(体积/体积)青链霉素液。2)5.6%NaHCO3液;用途:调节溶液的PH值。配制:50ml称量:NaHCO3 2.8g注意:在约40ml水中溶解NaHCO3,再加水至50ml即可,NaHCO3溶解缓慢,故可适当加热。消毒:10磅10分钟高压消毒。保存:4度。3) 1%酚红液;用途:作溶液的指示

3、剂。配制:100ml称量:酚红.1g注意:A)在于1N NaOH 2ml溶液中溶解酚红;酚红较为困难,所以在研钵中进行,不断研磨至溶。B)待溶解后片刻,再加入1ml 1N NaOHC)加水至100ml,配制完毕。消毒:加入其它溶液中一起高压灭菌。保存: 4度。4) 青/链霉素原液; 产品编号:PS2004HY 产品规格:100ml 价格:130.00浓度:1万单位青霉素、1万单位链霉素或1Mg链霉素/ml。配制:*无菌操作*A)80ml水10磅10分钟高压灭菌。B)溶解80万单位的青链霉素于80ml水中。分装:12ml小分装。保存:-20度使用:按1%(体积/体积)加入溶液中,终浓度1万单位青

4、链霉素/ml5) L-谷氨酰胺液; 产品编号:L2004HY 产品规格:10ml 价格:100.00浓度:30mg/ml配制:10ml 称量:L-谷氨酰胺.10ml消毒:100nm过滤除菌。保存:小分装存于-20度使用:A)用时终浓度为0.3mg/ml B)具体用法:培养基含血清/L-谷氨酰胺=100ml/1ml注意:化冻后混均。6) 无Ca Mg 离子PBS; 产品编号:PB2004Y 产品规格:500ml 价格:120.00用途:A)配制EDTA、胰酶、胶原酶;B)冲洗组织和细胞;配制:500ml (ddH2O)称量:NaCL 4 g KCL .0.1 g Na2HPO4.12H2O .1

5、.445 g KH2PO4 .0.1 g注意:在400ml水中依次溶解上述试剂;加入1%酚红1ml,然后加水至500ml。消毒:10分钟10磅高压灭菌;保存:4度。使用:用时以5.6%NaCO3调pH至7.2左右,但用于配制胰酶、EDTA、胶原酶时,不调pH。7)胰蛋白酶/EDTA; 产品编号:TE2004Y 产品规格:100ml 价格:150.00用途:原代消化 传代消化 消化丢弃细胞浓度: 0.25%配制: 100ml称量:胰酶0.25 g注意:用90ml无Ca、Mg离子PBS、溶解胰酶,再加该PBS至100ml(胰酶溶解较难,必要时在4度过夜以便溶解)。消毒:100nm过滤除菌。保存:小

6、分装于-20度保存。使用:用时调PH7.2左右,用5.6%NaCO3调。原代消化用0.25%浓度;传代用0.25%胰酶与0.04%EDTA对半混合。8) EDTA Na4盐; 产品编号:ED2004Y 产品规格:100ml 价格:90.00浓度: 0.1%配制:100ml;称量:EDTA Na40.04g注意:用90ml无Ca、Mg离子PBS溶解EDTA Na4,后加该PBS至100ml消毒:10磅10分钟高压灭菌。保存:小分装于-20度保存。9) 胶原酶;用途:用于原代消化细胞;浓度:0.1%;配制:100ml;称量:胶原酶 .0.1 g;注意:用90ml无Ca、Mg离子PBS(或HankS、无血清RPM1640)溶解胶原酶,后加液至100ml。消毒:100nm过滤除菌;保存:小分装于-20度保存。10)干粉培养基配制;配制:500ml;(ddH2O)称量:培养基粉 5 g;注意:以水400ml溶解培养基粉,以NaHCO3(粉剂)调PH至7左右,再加水至500ml。消毒:过滤除菌;保存:4度或-20度保存;(4度保存不超过30天;-20度保存不超过100天。)11) 0.25%柠檬酸胰酶; 产品编号:T2005

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