蛋白质结构与功能的多样性

1、Diversity of Structure and Function of ProteinX-射线衍射法（射线衍射法（X-ray diffraction method）核磁共振（核磁共振（NMR）电子显微技术电子显微技术 质谱法质谱法荧光共振能量转移技术荧光共振能量转移技术 光谱法（红外光谱、紫外差光谱、荧光光谱）光谱法（红外光谱、紫外差光谱、荧光光谱）旋光色散法（旋光色散法（optical rotatory dispersion, ORD）园二色性（园二色性（circular dichroism, CD）X-X-射线衍射法射线衍射法 简单原理简单原理 基本原理基本原理质谱技术质谱技术 MS

2、 是将带电原子、分子或分子碎片按其质荷比的大小顺序排是将带电原子、分子或分子碎片按其质荷比的大小顺序排 列而形成的图谱列而形成的图谱 经过空间编码技术，把在磁共振过程中所发出的电磁波以及与之经过空间编码技术，把在磁共振过程中所发出的电磁波以及与之有关的各种信息参数等，通过计算机处理，最后形成图像。医生通过有关的各种信息参数等，通过计算机处理，最后形成图像。医生通过分析图像中的具体情况做出诊断分析图像中的具体情况做出诊断 对样品的要求对样品的要求质谱质谱 样品必须先转化为气态样品必须先转化为气态核磁共振核磁共振 样品通常都配制溶液，在配制溶液应注意几个问题样品通常都配制溶液，在配制溶液应注意几个

3、问题： 溶剂不应含被检测的原子溶剂不应含被检测的原子 如：常用的氢谱，其溶剂不应含质子，常用的有如：常用的氢谱，其溶剂不应含质子，常用的有 CCl4、CS2 样品溶液的浓度一般为样品溶液的浓度一般为2-10 化学位移基准物质化学位移基准物质（TMS）的浓度一般为的浓度一般为0.2左右左右谱图提供的主要信息谱图提供的主要信息 共振吸收峰的组数共振吸收峰的组数 一般表明有几种带氢一般表明有几种带氢基团基团各组吸收峰的位置各组吸收峰的位置 提供各类型氢核提供各类型氢核(各基团各基团)所处化学环境的信息，用所处化学环境的信息，用化学化学 位移位移表示表示各组峰的分裂情况及分裂峰的数目各组峰的分裂情况及

4、分裂峰的数目 提供各类型提供各类型(各基团各基团)的的相互作用情况相互作用情况，用磁核的自旋偶，用磁核的自旋偶 合和裂分表示合和裂分表示 各组峰的相对强度各组峰的相对强度 提供各类型氢核提供各类型氢核(各基团各基团)的的数量比数量比。在。在NMR谱图中用峰谱图中用峰 面积的积分阶梯线高度表示面积的积分阶梯线高度表示横坐标为化学位移，说明在不同分子或同一分子的不同基团中，氢核所处的化学横坐标为化学位移，说明在不同分子或同一分子的不同基团中，氢核所处的化学环境不同，产生核磁共振所吸收的频率也不一样，这种由于核周围分子环境不同环境不同，产生核磁共振所吸收的频率也不一样，这种由于核周围分子环境不同引起

5、共振吸收频率位移的现象叫化学位移引起共振吸收频率位移的现象叫化学位移核磁共振波谱法的特点核磁共振波谱法的特点核磁共振波谱法是结构分析最强有力的手段之一，因为它把核磁共振波谱法是结构分析最强有力的手段之一，因为它把 有机化合物最常见的组成元素氢有机化合物最常见的组成元素氢(氢谱氢谱)或碳或碳(碳谱碳谱)等作为等作为“生生 色团色团”来使用的，因此它可能确定几乎所有常见官能团的环来使用的，因此它可能确定几乎所有常见官能团的环 境，有的是其它光谱或分析法所不能判断的环境，境，有的是其它光谱或分析法所不能判断的环境，NMR法谱法谱 图的直观性强，特别是碳谱能直接反映出分子的骨架，谱图图的直观性强，特别是碳谱能直接反映出分子的骨架，谱图 解释较为容易。解释较为容易。 有多种原子核的共振波谱有多种原子核的共振波谱(除了常用的氢谱外，还有碳谱，除了常用的氢谱外，还有碳谱， 氟谱，磷谱等氟谱，磷谱等)，因此，扩大了应用范围，各种谱之间还可以，因此，扩大了应用范围，各种谱之间还可以 互相印证。互相印证。 可以进行定量测定，研究反应机理，还可以求得某些化学过可以进行定量测定，研究反应机理，还可以求得某些化学过 程的动力和热力学的参数。程的动力和热力学的参数。 该法的缺