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文档简介
1、酵母菌、霉菌常用培育基的配制一、目的要求 了解合成培育基、半合成培育基和自然培育基的配制原理。学习和把握麦芽汁培育基、马铃薯葡萄糖培育基、豆芽汁葡萄糖培育基和察氏培育基的配制方法。二、基本原理 麦芽汁培育基和马铃薯葡萄糖培育基被广泛用于培育酵母菌和霉菌。马铃薯葡萄糖培育基有时也可用于培育放线菌。豆芽汁葡萄糖培育基也是培育酵母菌及霉菌的一种优良培育基。察氏培育基主要用于培育霉菌观看形态用。麦芽汁培育基为自然培育基,马铃薯葡萄糖培育基和豆芽汁葡萄糖培育基二者均为半合成培育基,而察氏培育基则为合成培育基。培育基配方中消灭的自然pH系指培育基不经酸、碱调整而自然呈现的pH。三、试验材料(一)药品葡萄搪
2、、蔗糖、NaN03、K2HP04、KCl、MgSO4·7H2O,FeS04、琼脂。(二)仪器天平、高压蒸汽灭菌锅。(三)玻璃器皿移液管、试管、锥形瓶、烧杯、量筒、培育皿、玻璃漏斗等。(四)其他物品药匙、pH试纸、称量纸、记号笔、棉花、纱布、线绳、塑料试管盖、牛皮纸、报纸、新颖麦芽汁、黄豆芽、马铃薯等。四、试验内容(一)麦芽汁培育基的配制1培育基成分新颖麦芽汁一般为10-15波林。2配制方法 (1)用水将大麦或小麦洗净,用水浸泡6-12h,置于15阴凉处发芽,上盖纱布,每日早、中、晚淋水一次,待麦芽伸长至麦粒的两倍时,让其停止发芽,晒干或烘干,研磨成麦芽粉,贮存备用。 (2)取一份麦芽
3、粉加四份水,在65水浴锅中保温3-4h,使其自行糖化,直至糖化完全(检查方法是取0.5ml的糖化液,加2滴碘液,如无蓝色消灭,即表示糖化完全)。 (3) 糖化液用4-6层纱布过滤,滤液如仍混浊,可用鸡蛋清澄清(用一个鸡蛋清,加水20 m1,调匀至生泡沫,倒入糖化液中,搅拌煮沸,再过滤)。 (4)用波美比重计检测糖化液中糖浓度,将滤液用水稀释到10-15波林,调pH至64。如当地有啤酒厂,可用未经发酵,未加酒花的新颖麦芽汁,加水稀释到10-15波林后使用。 (5)如配固体麦芽汁培育基时,加入2琼脂,加热溶化,补充失水。 (6)分装、加塞、包扎。 (7)高压蒸汽灭菌 100 Pa灭菌20 min。
4、(二)马铃薯葡萄糖培育基的配制1、培育基成分马铃薯 20g葡萄糖 2 g琼脂 1.5-2g水 100ml自然pH 2配制方法 (1)配制20马铃薯浸汁 取去皮马铃薯200g,切成小块,加水1000m1。80浸泡lh,用纱布过滤,然后补足失水至所需体积。100 Pa灭菌20 min。即成20马铃薯浸汁,贮存备用。(2)配制时,按每100 m1马铃薯浸汁加入2g葡萄糖,加热煮沸后加入2g琼脂,连续加热溶化并补足失水。 (3)分装、加塞、包扎。 (4)高压蒸汽灭菌 100 Pa灭菌20 min。 (三)豆芽汁葡萄糟培育基的配制1培育基成分黄豆芽 10g葡萄糖 5g琼脂 1.5-2g水 100ml自然
5、pH 2配制方法 (1)称新颖黄豆芽10g,置于烧杯中,再加入100 m1水,小火煮沸30 min,用纱布过滤,补足失水,即制成10豆芽汁。(2)配制时,按每100 m1 10豆芽汁加入5g葡萄糖,煮沸后加入2 g琼脂,连续加热溶化,补足失水。 (3)分装、加塞、包扎。 (4)高压蒸汽灭菌 100 Pa灭菌20 min。 (四)察氏(czapck)培育基的配制1培育基成分蔗糖 3gNaN03 0.3gK2HP04 0.1gKCl 0.05gMgSO4·7H2O 0.05 gFeS04 0.001 g琼脂 1.5-2g蒸馏水 100ml自然pH 2配制方法 (1)称量及溶化 量取所需水量约23左右加入到烧杯中,分别称取蔗糖、NaNO3 、K2HP04 、KCl、MgSO4。依次逐一加入水中溶解。按每100 ml培育基加入1ml 0.1的FeS04溶液。(2)定容 候药品全部溶解后,将溶液倒入量筒中,加水至所需体积。(3)加琼脂
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