探究酵母菌种群数量的动态变化-血球计数板

1、培养液中酵母菌种群数量的动态变化 计划制定：培养一个酵母菌种群计划制定：培养一个酵母菌种群通过显微镜观察，用通过显微镜观察，用“血球计数板血球计数板”计数计数7 7天内天内10ml10ml培养液中酵母菌的数量培养液中酵母菌的数量计算平均值计算平均值画出画出“酵母菌种群数量的增长曲线酵母菌种群数量的增长曲线” 实验方法：实验方法： （1 1）将）将10mL5%10mL5%葡萄糖培养液加入试管中。葡萄糖培养液加入试管中。 （2 2）将酵母菌菌种接入试管中的培养液内混合均匀。）将酵母菌菌种接入试管中的培养液内混合均匀。 （3 3）将试管在）将试管在2828条件下连续培养条件下连续培养7 7天。天。

2、（4 4）每天取样每天取样计数酵母菌数量，采用计数酵母菌数量，采用抽样检测抽样检测方法。方法。 （5 5）分析所取得数值并用曲线图表示出来，分析图形得）分析所取得数值并用曲线图表示出来，分析图形得出酵母菌种群数量变化规律。出酵母菌种群数量变化规律。 1 1、血球计数板是由一块比普通载玻片、血球计数板是由一块比普通载玻片厚厚的玻片特制的玻片特制而成。而成。2 2、板的中部有一部分比两边低、板的中部有一部分比两边低0.1mm0.1mm，两边有沟。，两边有沟。血球计数板构造血球计数板构造NoImage稀释倍数每小格平均菌数稀释倍数小格内菌数毫升个菌数 61046104100100) / (计数室是一

3、大格（计数室是一大格（S=1mm2S=1mm2）由由2525个中格组成，每一中格个中格组成，每一中格又分为又分为1616个小格，共个小格，共400400个小个小格（也有一种计数板是格（也有一种计数板是1616中中格格2525小格，总数也是小格，总数也是400400格）。格）。每小格容积为每小格容积为0.000250.00025立方毫立方毫米，即米，即1/41/410-610-6亳升亳升 每个样品重复计数每个样品重复计数2-3次，取其平均值，按次，取其平均值，按下式计算样品中的菌数。下式计算样品中的菌数。 刻度为刻度为2516（大格）的计数板：（大格）的计数板： 刻度为刻度为1625（大格）的计

4、数板：（大格）的计数板： 稀释倍数每小格平均菌数稀释倍数小格内菌数毫升个菌数610461048080)/(血球计数板的使用方法 （一）取清洁干燥的血球计数板，（一）取清洁干燥的血球计数板，加盖玻片加盖玻片盖住盖住网格和两边的槽。网格和两边的槽。 （二）将待测菌液（二）将待测菌液充分摇匀充分摇匀后，用无菌吸管吸少后，用无菌吸管吸少许，由许，由盖玻片边缘或槽内加入盖玻片边缘或槽内加入计数板来回推压盖计数板来回推压盖玻片，使其紧贴在计数板上，计数室内玻片，使其紧贴在计数板上，计数室内不能有气不能有气泡泡。静置静置5-105-10分钟。分钟。 （三）在低倍镜下找到小方格网后更换高倍镜观（三）在低倍镜下

5、找到小方格网后更换高倍镜观察计数，上下调动细螺旋，以便看到小室内不同察计数，上下调动细螺旋，以便看到小室内不同深度的菌体。位于分格线上的菌体，只数两条边深度的菌体。位于分格线上的菌体，只数两条边上的，其余两边不计数。如数上线就不数下线，上的，其余两边不计数。如数上线就不数下线，数左边线就不数右边线。数左边线就不数右边线。 （四）计数时若使用刻度为（四）计数时若使用刻度为25251616（大格）的计（大格）的计数板，则数四角的数板，则数四角的4 4个中格（即个中格（即100100小格）内的菌小格）内的菌数。如用刻度为数。如用刻度为16162525（大格）的计数板，除数（大格）的计数板，除数四角的

6、四角的4 4个大格外，还需数中央个大格外，还需数中央1 1个大格的菌数个大格的菌数（即（即8080小格）。小格）。每小格中菌数以每小格中菌数以5-105-10个为宜个为宜，如，如菌液过浓可适当稀释菌液过浓可适当稀释 稀释倍数每小格平均菌数稀释倍数小格内菌数毫升个菌数 61046104100100) / (（五）计算（五）计算计算次计算次数数各方格中细胞数各方格中细胞数1ml1ml悬液中总细胞悬液中总细胞数数3 3次平均次平均数数1 12 23 34 45 51 12 23 3 每个样品重复计数每个样品重复计数2-3次，取其平均值，按次，取其平均值，按下式计算样品中的菌数。下式计算样品中的菌数。 刻度为刻度为2516（大格）的计数板：（大格）的计数板： 刻度为刻度为1625（大格）的计数板：（大格）的计数板： 稀释倍数每小格平均菌数稀释倍数小格内菌数毫升个菌数610461048080)/(实验注意事项 血球计数板的使用血球计数板的使用 1、先盖盖玻片，再滴加菌液、先盖盖玻片，再滴加菌液 2、菌液从平台两侧凹槽处滴加，不要产生气泡、菌液从平台两侧凹槽处滴加，不