丙磺舒对家兔体内头孢克罗的药动学影响

1、丙磺舒对家兔体内头孢克罗的药动学影响         【摘要】【关键词】  丙磺舒 头孢克罗 药动学 HPLC 家兔   Effects of probenecid on the pharmacokinetics of cefaclor in rabbits   ABSTRACT  Objective  To investigate effects of probenecid (PBC) at different doses on the pha

2、rmacokinetics of cefaclor (CCL) and to explore a suitable proportion of their single coadministration.  Methods Fortytwo rabbits were randomly divided into 7 groups: CCL 50 mg/kg, alone CCL 50 mg/kg combined with PBC 50 mg/kg, CCL 50 mg/kg combined with PBC 100 mg/kg, CCL 50 mg/kg combined with

3、 PBC 200 mg/kg, CCL 50 mg/kg combined with PBC 300 mg/kg, CCL 50 mg/kg combined with PBC 400 mg/kg, CCL 25 mg/kg combined with PBC 100 mg/kg. Both drugs were given through intragastric administration, but CCL was 30 min later than PBC. Blood samples were drawn from thigh vein at 0, 10, 20, 30, 45, 6

4、0, 90, 120, 180, 240 and 360 min after CCL administration. Plasma CCL concentration were determined by HPLC method, and the pharmacokinetic parameters were calculated with 3P87 programme.  Results  Concentrationtime course of CCL in plasma fitted a onecompartment open model. Within the ran

5、ge of experimental dosages, continuous prolongation in t1/2ke and MRT were observed, which showed a dosedependent relationship with the increase dosage of PBC the values of r were 0.9876 and 0.9973, respectively; t1/2 and tmax prolong when higher doses of PBC  (   ) were used and show

6、ed significant difference compared with I (CCL 50 mg/kg administration alone) (P0.05 and P0.01, respectively). cmax and AUC of CCL increased and CL/F decreased continuously, and the standard curve was linear over the concentration range of 50 to 200 mg/kg of PBC (the values of r 0.9918, 9.9952 and 0

7、.9036, respectively). Honever, cmax decreased (r=0.9866) when doses of PBC were higher than 200 mg/kg, and AUC and CL/F of CCL maintained at the levels of those with PBC 200 1CCL was able to reach an ideal level in plasma when CCL 50 mg/kg was coadministrated with PBC 200 mg/kg. With such a proporti

8、on, when half the dosage of CCL combined PBC were used, a similar plasma level of CCL could be produced as CCL 50 mg/kg used alone.  Conclusions  Coadministration with PBC cluld markedly alter the pharmacokinetics of CCL, and the effects on every parameter were closely dependent on doses o

9、f PBC. Values of cmax, AUC and  t1/2ke of CCL increase or prolong by coadministrating with proper dosage of PBC, and the efficacy of CCL can be increased; but overdose of PBC results in the decrease in cmax of CCL, and it might be for PBC interfere with the absorption of CCL through gastrointes

10、tinal tract. The result of this study suggests that the proportion of CCL combined with PBC in single close is 1 to 4.   KEY WORDS  Probenecid;  Cefaclor;  Pharmacokinetics;  HPLC;  Rabbit   丙磺舒(probenecid，PBC)为一促尿酸排泄药，是许多药物经肾小管主动排泌的抑制剂1。自Beyer发现PBC可提高青霉素

11、的血药水平之后，相继发现丙磺舒对多种内酰胺类抗生素的药动学均有影响，如延缓后者的排泄，提高血药浓度，延长半衰期等。临床上PBC可作为某些内酰胺类抗生素的辅助剂，以提高抗生素的血药浓度，延长其抗菌作用时间2，3。头孢克罗(cefaclor，CCL)系第二代头孢菌素，主要以原形经肾小管排泌清除4。本研究以家兔为实验对象，观察不同剂量PBC对CCL的药动学影响，并探索两者单次联用时的最佳比例。   1  材料与方法   1.1  药品与试剂   CCL标准品(中国药品生物制品检定所提供)，CCL胶囊(每粒250mg，山东

12、淄博新达制药有限公司，批号010807)，PBC片(每片250mg，上海集成药厂，批号20000803)，乙腈、高氯酸、冰乙酸、三乙胺均为分析纯。   1.2  动物   健康青紫兰家兔，体重(2.2±0.3)kg，兔龄6个月(皖南医学院实验动物中心提供)，实验前12h禁食、不禁水，实验后4h内禁食、禁水。室温：(20±3)，湿度：(65±5)%。   1.3  仪器与色谱条件   美国惠普公司HP1100高效液相色谱仪(G1312A二元泵、G1316A柱温箱、G1

13、314A紫外检测器)，预柱：Zobax ODS 4.6mm×12.5mm，分析柱：Hypersil ODS 4mm×125mm，  m。流动相：甲醇水冰乙酸(20800.4)。流速：1.0ml/min。紫外检测波长：264nm。柱温：30。   1.4  样品处理   精确量取兔血浆0.2ml，加入6%(V/V)高氯酸0.20ml，旋涡混匀1min，3000r/min离心10min，取上清液20l进样。   1.5  标准曲线绘制   制作精确称取CCL标准品，以兔

14、空白血浆配制成0、0.25、0.5、1，5、10、20、50和100mg/L的标准系列，按1.4项方法处理后进样。以血药浓度(C)对峰面积(A)绘制标准曲线。   1.6  实验步骤   家兔42只，随机分7组，每组雌、雄各半。组PBC分别按0(等量0.5%的纤维素溶液)、50、100、200、300、400和100mg/kg溶入20ml 0.5%的纤维素溶液后灌胃给药，0.5h后均以CCL 50mg/kg(组CCL为25mg/kg)灌胃给药；各兔于灌胃结束后0、10、20、30、45、60、90、120、180、240和360min分别由股静

15、脉取血0.8ml，即刻离心分离血浆，按1.4项方法测定CCL的血药浓度。   1.8  数据处理   DAS软件计算药动学参数5，数据以(±s)表示，组间比较用t检验。   2  结果   2.1  标准曲线和色谱行为   A=9.306C+2.509  r=0.99998(n=5)   最低检出浓度为0.1mg/L。   2.2  血药浓度   见Tab.1，血药浓度时间曲线

16、见Fig.1。            2.3  药动学   CCL的血药浓度时间曲线符合一室开放模型，各组药动学参数值见Tab.2。    3  讨论   药物的肾小管排泌为一主动转运过程，需要载体参与并消耗能量，存在竞争及饱和现象6。肾近曲小管上存在两个独立的载体系统：有机阴离子系统(OATs)和有机阳离子系统(OCTs)7。已证实头孢菌素可经由肾小管上皮细胞膜的OATs排泌。分子结构中具氨基的口服头孢菌

17、素类除由OATs排泌外，尚经管腔膜上的OCTs排泌并经双肽转运系统(DTs)重吸收8。CCL是一具有两性离子的化合物，含有羧基和氨基，主要表现为阴离子性质并经小管OATs排泌。PBC亦为有机阴离子化合物，可与其它有机阴离子共同作用于肾小管上同一转运系统而产生竞争性抑制作用，使后者排泌减少并导致后者的药动学变化9。本实验中，CCL联用PBC后，其t1/2ke及MRT显着延长，CL/F渐次下降，且与PBC剂量呈依赖性。表明PBC确实可竞争性抑制了CCL的OATs转运，降低了CCL的肾排泄，此结果与前人报道一致10。   PBC联用对CCL血药浓度的影响因PBC剂量不同而有明显差

18、异。在本实验条件下，当PBC联用剂量为50、100和200mg/kg时，CCL血药浓度呈剂量依赖性增高，这在药物的吸收相即很明显，在峰值及其后的消除相更显着，CCL的cmax渐次升高，CL/F逐渐下降。这种现象可能与以下因素有关：PBC竞争性抑制了CCL的OATs排泌，导致CCL血药浓度的升高；PBC血浆蛋白结合率较高，一般为65%90%11，可竞争性抑制CCL的血浆蛋白结合率，使血中游离CCL升高；已证实，PBC在体内呈可饱和性消除，在一定的剂量范围内血药浓度及血浆半衰期均呈剂量依赖性增高及延长12，导致PBC对CCL的肾排泌抑制作用增强；有学者报道，PBC可减少肝脏及脑组织对一些内酰胺类抗

19、生素的吸收和清除13，14，这亦可能导致我们所观察的CCL血药浓度升高。   本实验中当PBC联用剂量达300、400mg/kg时，CCL的血药浓度反而下降，CCL的cmax较PBC为200mg/kg时明显降低，而AUC及CL/F两参数则基本稳定在PBC联用200mg/kg时的水平。这种现象尚未见文献报道，也难以用已知的原因做出解释。从所得结果看，随着PBC剂量加大，CCL的t1/2ka持续延长，tmax亦渐滞后，提示PBC可能延缓或抑制了CCL的吸收。已有研究证实，头孢菌素的肠道转运除被动扩散外，尚有OCTs、DTs、Pgp等参与介导1517，而PBC可作用于以上转运系统

20、18。因此，我们推测大剂量联用PBC时CCL的血药浓度反降低，可能是因为此时PBC抑制了CCL吸收所致。本研究中CCL的AUC在PBC联用剂量高于200mg/kg后即不再增加，也支持我们的假设，确切机制有待进一步研究。另外，本研究中CCL的CL/F在PBC联用剂量小于200mg/kg时呈降低趋势，而在PBC大于200mg/kg时基本稳定于一定水平，可能是由于此时PBC对CCL肾排泌的拮抗作用趋于饱和，使CCL的肾清除率达到最大值。至于Vd/F值在联用大剂量PBC后降低，可能因为PBC使CCL的肾排泄延缓、血浆蛋白结合率降低，导致血药浓度升高所致，也不排除PBC通过其它环节影响了CCL的体内分布

21、。尚应说明的是参数Vd/F中的F可为一变数，本研究中PBC可能改变CCL的吸收而影响CCL的F值，使Vd/F值产生变化。   我们的研究表明，只有当PBC联用剂量达到一定水平时才能明显延长CCL的t1/2ke，剂量过低无实际意义，剂量过大反使CCL的血药水平下降。Overbosch等19在一项临床研究中证实，PBC联用剂量在2g/d时即可达到抑制苄青霉素肾小管排泄的最大效果，过大剂量并无意义，反会增大药物不良反应。本实验中，单次联用时CCL 50mg/kg加PBC 200mg/kg较为合理，两者剂量比为14。按此比例，将两药剂量均减半联用，仍可使CCL的血药浓度达到并超过单

22、用CCL 50mg/kg的水平，AUC和MRT值相近或增大，表明该比例较为理想。倘人体内PBC对CCL有类似的作用，合理联用PBC而减少CCL的用量则具有一定的临床意义1，20。当然，本研究只是理论上的探讨，其实际意义有待实践证实。CCL与PBC的t1/2差别较大，多次联用及在人体联用时结果如何，尚需深入研究。   诚谢：孙瑞元教授、郑青山博士及桂常青高级实验师的精心指导！【参考文献】  1 Cunningham R F, Israili Z H, Dayton P G. Clinical Pharmacokinetics of probenecid J. Cli

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