血清蛋白电泳最新版本

1、2011春季学期春季学期春季学期春季学期春季学期春季学期春季学期编辑ppt电泳分析电泳分析血清蛋白电泳血清蛋白电泳血清免疫固定电泳血清免疫固定电泳生物化学与分子生物学实验教学中心生物化学与分子生物学实验教学中心生物化学与分子生物学实验教学中心2011春季学期春季学期春季学期春季学期春季学期春季学期春季学期 19/4编辑ppt电泳技术电泳技术n 电泳：电泳：溶液中带电粒子在电场中定向移动的现象溶液中带电粒子在电场中定向移动的现象称为电泳（称为电泳（electrophoresiselectrophoresis）。）。n 电泳技术电泳技术是利用带电粒子在电场作用下定向移动是利用带电粒子在电场作用下定

2、向移动的特性，对混合物组分进行分离、纯化和测定的的特性，对混合物组分进行分离、纯化和测定的一项技术。一项技术。生物化学与分子生物学实验教学中心2011春季学期春季学期春季学期春季学期春季学期春季学期春季学期 19/4编辑ppt电泳的分类电泳的分类n 按分离目的：分析电泳和制备电泳按分离目的：分析电泳和制备电泳n 按电场强度：常压电泳和高压电泳按电场强度：常压电泳和高压电泳n 按电泳媒介：自由电泳和区带电泳按电泳媒介：自由电泳和区带电泳 区带电泳（按支持介质）：淀粉凝胶电泳区带电泳（按支持介质）：淀粉凝胶电泳 滤纸电泳滤纸电泳 醋酸纤维素薄膜电泳醋酸纤维素薄膜电泳 琼脂糖凝胶电泳琼脂糖凝胶电泳

3、聚丙烯酰胺凝胶电泳聚丙烯酰胺凝胶电泳 按支持介质形式：水平式电泳、垂直电泳按支持介质形式：水平式电泳、垂直电泳n 按缓冲液按缓冲液pHpH值：连续值：连续pHpH和不连续和不连续pHpH电泳电泳生物化学与分子生物学实验教学中心2011春季学期春季学期春季学期春季学期春季学期春季学期春季学期 19/4编辑ppt临床电泳项目临床电泳项目n 临床上以琼脂糖电泳法开展的电泳项目：临床上以琼脂糖电泳法开展的电泳项目：血清蛋白电泳血清蛋白电泳免疫固定电泳免疫固定电泳尿蛋白电泳尿蛋白电泳同工酶电泳同工酶电泳脑脊液寡克隆电泳脑脊液寡克隆电泳本周氏蛋白电泳本周氏蛋白电泳脂蛋白电泳脂蛋白电泳生物化学与分子生物学实

4、验教学中心2011春季学期春季学期春季学期春季学期春季学期春季学期春季学期 19/4编辑ppt血清蛋白电泳（血清蛋白电泳（SPESPE）n 检测蛋白质水平病理改变的方法和手段。检测蛋白质水平病理改变的方法和手段。n 主要用于肝病、肾病、自身免疫病、血液病、多主要用于肝病、肾病、自身免疫病、血液病、多发性骨髓瘤等蛋白质紊乱疾病的诊断。发性骨髓瘤等蛋白质紊乱疾病的诊断。n 电泳图谱不能直接对临床疾病进行确诊，但可通电泳图谱不能直接对临床疾病进行确诊，但可通过特征性图谱对某些疾病进行分类，评估疾病的过特征性图谱对某些疾病进行分类，评估疾病的进程和活动状况，评价治疗方案是否有效。进程和活动状况，评价治

5、疗方案是否有效。生物化学与分子生物学实验教学中心2011春季学期春季学期春季学期春季学期春季学期春季学期春季学期 19/4编辑ppt血清免疫固定电泳（血清免疫固定电泳（IFEIFE）n 是一种包括琼脂糖凝胶蛋白电泳和免疫沉淀两个是一种包括琼脂糖凝胶蛋白电泳和免疫沉淀两个过程的操作，是免疫沉淀反应的一种混合技术。过程的操作，是免疫沉淀反应的一种混合技术。n 优势：将血清蛋白电泳、高分辩率、抗原优势：将血清蛋白电泳、高分辩率、抗原- -抗体特抗体特异性免疫反应等有机结合，对蛋白进行分离和定异性免疫反应等有机结合，对蛋白进行分离和定型，形象地观察型，形象地观察IgIg的各类重链和轻链分型。的各类重链

6、和轻链分型。生物化学与分子生物学实验教学中心2011春季学期春季学期春季学期春季学期春季学期春季学期春季学期 19/4编辑ppt血清蛋白醋酸纤维素薄膜电泳结果生物化学与分子生物学实验教学中心2011春季学期春季学期春季学期春季学期春季学期春季学期春季学期 19/4编辑ppt 血清蛋白质的等电点、血清蛋白质的等电点、平均相对分子量、及正常含量平均相对分子量、及正常含量 清蛋白清蛋白 A 1 2 pI相对分子量（104）含量（%）4.886.957725.0620255.0630495.129156.2126.857.315.6301220球蛋白球蛋白生物化学与分子生物学实验教学中心2011春季学

7、期春季学期春季学期春季学期春季学期春季学期春季学期 19/4编辑ppt正常血清蛋白质电泳图谱正常血清蛋白质电泳图谱生物化学与分子生物学实验教学中心2011春季学期春季学期春季学期春季学期春季学期春季学期春季学期 19/4编辑ppt血清蛋白电泳区带血清蛋白电泳区带n 白蛋白区带：主要由白蛋白构成。白蛋白区带：主要由白蛋白构成。n 1 1- -球蛋白区带：球蛋白区带： 1 1- -抗胰蛋白酶、抗胰蛋白酶、 1 1- -脂蛋白、脂蛋白、 1 1- -酸性糖蛋白酸性糖蛋白、甲状腺结合球蛋白、凝血酶原等。、甲状腺结合球蛋白、凝血酶原等。n 2 2- -球蛋白区带：球蛋白区带： 2 2- -巨球蛋白、结合

8、珠蛋白、铜蓝蛋白、巨球蛋白、结合珠蛋白、铜蓝蛋白、 2 2- -脂脂蛋白、红细胞生成素等。蛋白、红细胞生成素等。n -球蛋白区带：主要含铁蛋白、球蛋白区带：主要含铁蛋白、-脂蛋白、补体脂蛋白、补体C3C3、C4C4、2 2- -微球微球蛋白等。蛋白等。n -球蛋白区带含球蛋白区带含IgGIgG、M M、A A、D D、E E免疫球蛋白。免疫球蛋白。生物化学与分子生物学实验教学中心2011春季学期春季学期春季学期春季学期春季学期春季学期春季学期 19/4编辑ppt正常参考值正常参考值n A A：323250g/L(60.350g/L(60.371.4%71.4%）n 1 1：101040g/L4

9、0g/L（1.41.42.9%2.9%）n 2 2：6 610g/L10g/L（7.27.211.3%11.3%）n ：6 613g/L13g/L（8.18.112.7%12.7%）n ：7 715g/L15g/L（8.78.716.0%16.0%）生物化学与分子生物学实验教学中心2011春季学期春季学期春季学期春季学期春季学期春季学期春季学期 19/4编辑ppt生物化学与分子生物学实验教学中心2011春季学期春季学期春季学期春季学期春季学期春季学期春季学期 19/4编辑ppt生物化学与分子生物学实验教学中心2011春季学期春季学期春季学期春季学期春季学期春季学期春季学期 19/4编辑ppt临

10、床意义临床意义n 1 1、M M蛋白（异常免疫球蛋白）血症：蛋白（异常免疫球蛋白）血症： 在在-球蛋球蛋白区、白区、-球蛋白区或两者之间，出现区带细而浓球蛋白区或两者之间，出现区带细而浓，有时呈波浪状，在光密度计扫描图上呈尖陡高，有时呈波浪状，在光密度计扫描图上呈尖陡高峰的峰的M M蛋白带蛋白带。n 2 2、蛋白质缺乏症、蛋白质缺乏症n 3 3、肾病、肾病n 4 4、急慢性炎症、急慢性炎症n 5 5、肝病：肝硬化出现、肝病：肝硬化出现“-“-桥桥” 原发性肝癌在原发性肝癌在AlbAlb与与1 1- -球蛋白之间出球蛋白之间出现一小的区带，称为现一小的区带，称为甲胎蛋白带甲胎蛋白带。生物化学与分

11、子生物学实验教学中心2011春季学期春季学期春季学期春季学期春季学期春季学期春季学期 19/4编辑ppt异常血清蛋白电泳图谱及临床分析异常血清蛋白电泳图谱及临床分析n急性炎症及应激型：急性炎症及应激型：当机体受到各种损伤或炎当机体受到各种损伤或炎症刺激时的病理现象。症刺激时的病理现象。n 主要特征：主要特征： Alb Alb减少或正常，减少或正常，1 1、2 2- -球蛋白增高，球蛋白增高，-球蛋白增高不明显，当炎症转为慢性时，可明显增加。球蛋白增高不明显，当炎症转为慢性时，可明显增加。n 病理生理：病理生理： Alb Alb下降主要是由于蛋白分解亢进所致下降主要是由于蛋白分解亢进所致,1 1

12、和和2 2- -球蛋白增加与急性时相反应蛋白球蛋白增加与急性时相反应蛋白1 1糖蛋白增加有关，糖蛋白增加有关，区带减少是由于转铁蛋白分解代谢增加所致。新生儿由区带减少是由于转铁蛋白分解代谢增加所致。新生儿由于结合珠蛋白合成功能不完全，当有炎症病灶时，于结合珠蛋白合成功能不完全，当有炎症病灶时，2 2区区带无明显增高，而带无明显增高，而1 1区带可明显增高。区带可明显增高。生物化学与分子生物学实验教学中心2011春季学期春季学期春季学期春季学期春季学期春季学期春季学期 19/4编辑pptn肾病型：肾病型：由于肾小球受损引起低蛋白血症，蛋白尿，高脂血症由于肾小球受损引起低蛋白血症，蛋白尿，高脂血症

13、以及全身性水肿。以及全身性水肿。n 主要特征：主要特征： Alb Alb明显降低，明显降低，1 1- -球蛋白轻度增加，球蛋白轻度增加，2 2- -球蛋白明显增球蛋白明显增加，加，-球蛋白降低、正常或增高。小儿类脂样肾病时，球蛋白降低、正常或增高。小儿类脂样肾病时，-球蛋白可球蛋白可降低，有时可降低至零；成人肾病综合症时，降低，有时可降低至零；成人肾病综合症时，-球蛋白通常增加，球蛋白通常增加，特别是狼疮性肾病。特别是狼疮性肾病。n 病理生理：病理生理： Alb Alb降低是由于肾小球滤过增加所致。降低是由于肾小球滤过增加所致。1 1- -球蛋白增加，球蛋白增加，主要是小分子量的主要是小分子量

14、的1 1糖蛋白增加，可能是为了补偿由于糖蛋白增加，可能是为了补偿由于AlbAlb降低引起降低引起的低渗透压，虽然的低渗透压，虽然1 1糖蛋白也大量丢失于尿中，但体内合成量超过糖蛋白也大量丢失于尿中，但体内合成量超过排泄量，故仍可增高。排泄量，故仍可增高。2 2- -球蛋白明显增加是由于球蛋白明显增加是由于2 2- -球蛋白和低密球蛋白和低密度脂蛋白相对增加所致。度脂蛋白相对增加所致。球蛋白降低主要是分子量小的转铁蛋白排球蛋白降低主要是分子量小的转铁蛋白排泄于尿中所致。泄于尿中所致。-球蛋白降低主要是由于漏出于尿中及体内分解亢球蛋白降低主要是由于漏出于尿中及体内分解亢进所造成，而慢性肾炎、狼疮性

15、肾炎等进所造成，而慢性肾炎、狼疮性肾炎等-球蛋白增加，可能是由于球蛋白增加，可能是由于免疫刺激，使免疫刺激，使IgGIgG增加所致。增加所致。生物化学与分子生物学实验教学中心2011春季学期春季学期春季学期春季学期春季学期春季学期春季学期 19/4编辑pptn 弥漫性肝损伤型弥漫性肝损伤型n 主要特征：主要特征： Alb Alb明显降低明显降低, 1-, 1-球蛋白在轻度时可略增加，但肝细胞球蛋白在轻度时可略增加，但肝细胞破坏严重时，则破坏严重时，则11、22和和球蛋白通常均降低，在胆汁郁积性肝炎球蛋白通常均降低，在胆汁郁积性肝炎时，时，22和和球蛋白可增高，球蛋白可增高，-球蛋白轻度或中度增

16、高。球蛋白轻度或中度增高。n 病理生理：病理生理： Alb Alb虽合成减少，但其半衰期长，其浓度减少多出现于发虽合成减少，但其半衰期长，其浓度减少多出现于发病后十天，随病情恢复而至正常病后十天，随病情恢复而至正常, ,若为慢性则逐渐减少若为慢性则逐渐减少, ,其减少程度与其减少程度与肝炎的严重程度相一致。肝炎的严重程度相一致。1-1-球蛋白在肝炎初期，作为急性期反应物球蛋白在肝炎初期，作为急性期反应物质常增加，而肝损伤严重时则降低，在致命的肝功能衰竭时，质常增加，而肝损伤严重时则降低，在致命的肝功能衰竭时，1-1-球球蛋白可降低到很低水平。蛋白可降低到很低水平。2-2-球蛋白的降低，可能是由

17、于结合珠蛋白球蛋白的降低，可能是由于结合珠蛋白合成降低所致，但胆汁郁积性肝炎时，由于脂蛋白增加，可见到合成降低所致，但胆汁郁积性肝炎时，由于脂蛋白增加，可见到2-2-球蛋白部位增高，当急性肝坏死时，球蛋白部位增高，当急性肝坏死时，2-2-球蛋白则明显减少。球蛋白则明显减少。球蛋球蛋白在肝炎早期几乎无变化，当肝细胞损伤严重时合成减少。几乎所有白在肝炎早期几乎无变化，当肝细胞损伤严重时合成减少。几乎所有肝脏疾病肝脏疾病-球蛋白因合成亢进均增高，其增加的范围与疾病的严重球蛋白因合成亢进均增高，其增加的范围与疾病的严重程度相一致。程度相一致。生物化学与分子生物学实验教学中心2011春季学期春季学期春季

18、学期春季学期春季学期春季学期春季学期 19/4编辑pptn肝硬化型肝硬化型n 主要特征：主要特征： Alb Alb均有不同程度的降低，均有不同程度的降低，11、22和和球蛋球蛋白正常或降低，白正常或降低，-G-G明显增高且宽度增加，可见明显增高且宽度增加，可见-桥。桥。n 病理生理：病理生理： 肝细胞受损导致肝细胞受损导致AlbAlb明显降低，明显降低，-桥的出现桥的出现与血清免疫球蛋白，特别是与血清免疫球蛋白，特别是IgAIgA、IgMIgM、IgGIgG同时增加有关，同时增加有关，其中以其中以IgAIgA影响较大，当影响较大，当IgAIgA和和IgMIgM泳动在泳动在和和之间，使之间，使区

19、带与区带与区带融合而形成区带融合而形成-桥。桥。生物化学与分子生物学实验教学中心2011春季学期春季学期春季学期春季学期春季学期春季学期春季学期 19/4编辑pptn原发性肝癌原发性肝癌n 主要特征：主要特征： 在在AlbAlb与与1-1-球蛋白之间出现一小的区带，称球蛋白之间出现一小的区带，称为甲胎蛋白带。为甲胎蛋白带。n 病理生理；病理生理； 肝癌时，血清中的甲胎蛋白浓度为正常人的肝癌时，血清中的甲胎蛋白浓度为正常人的数十乃至数万倍。数十乃至数万倍。生物化学与分子生物学实验教学中心2011春季学期春季学期春季学期春季学期春季学期春季学期春季学期 19/4编辑pptn 宽幅高宽幅高-G-G血

20、症型（多株免疫球蛋白增高症）血症型（多株免疫球蛋白增高症）n 主要特征：主要特征： -G-G的宽度明显增加，呈宽幅高峰。的宽度明显增加，呈宽幅高峰。n 病理生理：病理生理： 多株浆细胞以大致相同的速度增殖，大多株浆细胞以大致相同的速度增殖，大量合成免疫球蛋白所致，呈多株性，若合并急性感量合成免疫球蛋白所致，呈多株性，若合并急性感染，则染，则11、22明显增高。明显增高。生物化学与分子生物学实验教学中心2011春季学期春季学期春季学期春季学期春季学期春季学期春季学期 19/4编辑pptn M M蛋白血症（单株免疫球蛋白异常症）蛋白血症（单株免疫球蛋白异常症）n 主要特征：主要特征：M M蛋白又叫

21、异常免疫球蛋白，其区带宽度与蛋白又叫异常免疫球蛋白，其区带宽度与AlbAlb带大致相等或较其狭窄，常分布在带大致相等或较其狭窄，常分布在22至慢至慢-G-G部位。部位。n 病理生理：病理生理： M M蛋白是由某一细胞株分泌大量结构相同、电蛋白是由某一细胞株分泌大量结构相同、电泳迁移率一致的蛋白。多发性骨髓瘤及原发性巨球蛋白血泳迁移率一致的蛋白。多发性骨髓瘤及原发性巨球蛋白血症时，症时，M M蛋白以外的其他免疫球蛋白明显降低，其可能是蛋白以外的其他免疫球蛋白明显降低，其可能是由于由于M M蛋白大量消耗氨基酸，致使其他免疫球蛋白相对合蛋白大量消耗氨基酸，致使其他免疫球蛋白相对合成不足，以及成不足，

22、以及M M蛋白代谢亢进，其他免疫球蛋白的分解代蛋白代谢亢进，其他免疫球蛋白的分解代谢也随之增加，故而含量降低。谢也随之增加，故而含量降低。 生物化学与分子生物学实验教学中心2011春季学期春季学期春季学期春季学期春季学期春季学期春季学期 19/4编辑ppt双白蛋白血症型双白蛋白血症型 主要特征：在白蛋白区有两个主要特征：在白蛋白区有两个区带，光密度扫描出现双峰，区带，光密度扫描出现双峰，呈剪刀状。呈剪刀状。产生原因：双白蛋白血症分为产生原因：双白蛋白血症分为持久型和暂时型两种。持久型持久型和暂时型两种。持久型主要是一种家族性血清蛋白异主要是一种家族性血清蛋白异常的疾病，极少见，为常染色常的疾病，极少见，为常染色体不完全显性遗传；体不完全显性遗传； 而暂时型而暂时型主要是指肾功能不全的患者在主要是指肾功能不全的患者在治疗期间使用大剂量的治疗期间使用大剂量的-内酰内酰胺类抗生素，可形成快泳动性胺类抗生素，可形成快泳动性的白蛋白成分，治疗中断即逐的白蛋白成分，治疗中断即逐渐消失。渐消失。 生物化学与分子生物学实验教学中心2011春季学期春季学期春季学期春季学期春季学期春季学期春季学期 19/4编辑ppt先天性白蛋白缺陷型：先天性白蛋白缺陷型：