清肺消炎丸对COPD急性发作期大鼠作用机制的研究

1、    清肺消炎丸对COPD急性发作期大鼠作用机制的研究刘 伟 孙增涛 刘恩顺 付 敏 关 鹏 苏景深天津中医药大学第二附属医院(300161)关键词：消肺消炎丸;COPD;实验研究COPD是以慢性炎症以及炎症性损伤和修复造成气道和血管壁重塑为基本病理特征，进而引起慢性气流受限或受阻的一类疾病。CO P D目前居全球死亡原因的第4位。1 我国40岁以上人群COPD的总患病率达8.2%，其中男性的患病率是1 2.4%，女性是5.1%，COPD在农村的患病率是8.8%，在城市是7.8%2。清肺消炎丸是在医圣张仲景伤寒论“麻杏石甘汤”基础上化裁，组成的中药复方

2、制剂，经多年临床观察，该药清肺化痰、止咳平喘功效独特，临床应用疗效显著，可以满足COPD急性发作期临床治疗需要并得到临床试验的验证。本研究从COPD大鼠肺组织病理、气道和肺部炎症、蛋白酶/抗蛋白酶失衡等指标的变化，探讨清肺消炎丸治疗COPD急性发作期的作用机制。1 材料与方法1.1 材料1.2 方法2 结果2.1 一般情况 正常组大鼠体肥，反映敏捷，好活动，皮毛有光泽。造模各组大鼠神情倦怠，喜蜷缩，皮毛无光泽且活动能力下降。造模各组大鼠于第三天的时候开始有咳嗽，口鼻潮湿等。在造模过程中，大鼠出现咳嗽，呼吸困难、喉间哮鸣音，喜静少动，强刺激活动后可见上述喘咳症状加重。喂药后，清肺消炎丸组可见气喘

3、、咳嗽减轻，以及口鼻分泌物减少。氨茶碱组亦可见喘咳症状减轻。2.2 肺组织病理学观察 正常对照组(图4)呼吸道及肺泡结构正常，支气管纤毛排列整齐，肺泡结构完整，无气肿及少许炎症。COPD 模型组(图1)可见肺泡腔明显扩大、间隔变窄、肺泡壁断裂、扩张的肺泡融合成较大的囊腔，呈明显的肺气肿改变;血管腔充血，肺间质及气道管壁炎性细胞浸润;肺间质及血管旁均可见大量吞噬了烟尘颗粒的AM，部分AM崩解破坏;成纤维细胞明显增加，可见小气道平滑肌增殖、管腔狭窄以及血管壁增厚等结构重塑。氨茶碱组(图3)仍见有大量炎症细胞的浸润;清肺消炎丸组(图4)用药后可见明肺部炎症较模型组有明显的改善。2.3 大鼠肺组织肿瘤

4、坏死因子(TNF-) 见附表12.4 大鼠肺组织基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的检测结果 见附表22.6 大鼠肺组织基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和粘连蛋白(LN)蛋白的检测结果 见表3。     3 讨论COPD 是一种以中性粒细胞、巨噬细胞、T淋巴细胞(尤其是CD+8 T淋巴细胞) 在肺不同部位增加为特征的慢性炎症性疾病。激活的炎症细胞释放多种递质，包括TNF 、IL 8、白三烯B4 (LTB4 )等。这种异常的炎症反应是COPD重要病理过程如细支气管炎、肺气肿的危险因素。炎前因子肿瘤坏死因子-(TNF-) 在COPD 气道慢性炎症的发生和发展中

5、的重要地位已获得公认。它能诱导炎症反应，增加气道中性粒细胞数目，促进中性粒细胞粘附而加强异常细胞外弹性蛋白溶解活性，在COPD发生发展中起重要作用。COPD 大鼠肺组织中TNF-水平明显高于正常对照组(P<0.05)，提示该细胞因子与COPD 气道炎症及其病理改变密切相关。清肺消炎丸可降低肺组织中TNF-水平，表明该药具有一定的抑制COPD 气道及肺部炎症的作用。可以认为清肺消炎丸通过减少肺组织中TNF-水平，进而减轻炎症细胞的浸润，是治疗该病的有效途径之一。MMP-9和TIMP-1 的动态平衡，目前被认为是反映气道组织破坏与修复动态平衡的标志。MMP-9即明胶酶B，其主要作用为降解弹力

6、纤维、明胶、及、V型胶原。其参与COPD 的发病机制主要是通过破坏肺泡基质成分，使肺泡结构破坏，形成肺气肿及参与气道重塑而导致气流阻塞。MMP-2即明胶酶A主要降解弹力纤维、纤维连接素及I、V、 型胶原等，MMP-2的增多使气道结构细胞失去正常的支撑作用。LN是基底膜透明层特异的结合蛋白，是细胞外基质(ECM)的主要组成部分之一，其作用是固定上皮、内皮和肌肉并支持其生长。LN 显著增高，表明有过多的LN生成并沉积于肺组织，同时释放入血和支气管上皮衬液，参与上皮和内皮细胞的修复和过度增生。细胞外基质破坏和修复常常维持平衡，一旦平衡打破即出现病理状态。本实验本研究结果表明，COPD 大鼠模型肺组织

7、中MMP-9、MMP-2、TIMP-1及LN的水平明显高于正常对照组(阳性细胞平均值P<0.05)，提示蛋白酶/抗蛋白酶系统及细胞外基质参与了COPD病理改变。清肺消炎丸组可降低肺组织中MMP-9、MMP-2、TIMP-1及LN水平，改善MMP-9/TIMP-1比例失衡，表明该药具有调节蛋白酶/抗蛋白酶，抑制细胞外基质过度沉积，改善气道重塑的作用。参考文献1 中华医学会呼吸病学分会慢性阻塞性肺疾病学组.COPD诊治指南(2007年修订版)S.继续医学教育,2007,21(2):31-42.2 ZHONG N，WANG C，RAN P，et a1.Prevalence ofchronic obst