浅析胃舒散对五氯硝基苯致肝损伤的保护作用

1、浅析胃舒散对五氯硝基苯致肝损伤的保护作用    摘要：  【目的】观察胃舒散对五氯硝基苯(PCNB)所致肝损伤的保护作用。【方法】SD大鼠随机分为4组，即正常组，模型组，胃舒散高、低剂量组(剂量分别为250、125 g·kg-1·d-1);除正常组外，其他组均在给药后1 h灌胃PCNB(剂量为400 mg·kg-1·d-1),连续15 d。检测各组肝脏指数，血清谷草转氨酶(GOT)、碱性磷酸酶(ALP)水平和肝组织丙二醛(MDA)含量，并行肝组织病理学检查。【结果】与正常组比较，模型组肝脏指数，血清GOT

2、、ALP水平，肝组织MDA含量均显著升高(P<005或P<001),肝组织坏死灶数显著增加(P<001);胃舒散高、低剂量组可显著降低肝脏指数，血清GOT、ALP水平和肝组织MDA含量，减少肝组织坏死灶数(与模型组比较，P<005或P<001),减轻肝组织病理损伤。【结论】胃舒散对PCNB所致肝损伤具有一定的保护作用。 关键词：  胃舒散/药理学;肝损伤/中药疗法;肝/病理学;疾病模型，动物;大鼠胃舒散是汕头大学医学院第二附属医院自配制剂，该方由甘草、大黄、陈皮、木香、石菖蒲、鸡骨香、碱式碳酸铋、氧化镁等组成，有行气止痛、祛风除湿之功效，用于慢性胃炎、胃

3、及十二指肠溃疡，对慢性肝炎证属肝脾不和者疗效确切1。前期研究显示2-3，胃舒散对四氯化碳(CCl4)所致急性和慢性肝损伤实验动物均有一定程度的保护作用。本实验旨在观察胃舒散对五氯硝基苯(PCNB)致肝损伤大鼠的保护作用，现将结果报道如下。1材料与方法11药物胃舒散由汕头大学医学院第二附属医院制剂室提供(制剂批准文号：粤Z20070715，批号：20080416)，用5 g/L甲基纤维素钠(CMCNa)配成所需给药浓度。12主要试剂与仪器PCNB由山西临汾有机化工厂生产(批号：060530);谷草转氨酶(GOT)和碱性磷酸酶(ALP)试剂盒均由德赛诊断系统(上海)有限公司提供;丙二醛(MDA)试

4、剂盒由南京建成生物工程研究所提供;甲醛(化学纯)溶液由广州化学试剂厂生产(批号：20070606);UV2100分光光度计(日本岛津);JY922D超声波细胞粉碎机(宁波新芝生物科技股份有限公司)。13动物SD大鼠，体质量200250 g，清洁级，雌雄不限，购自广东省医学实验动物中心，合格证号：2005A011。14动物分组、模型复制4及给药方法将SD大鼠随机分为4组，每组10只，即正常组，模型组，胃舒散低剂量组(剂量为125 g ·kg-1·d-1)，胃舒散高剂量组(剂量为250 g ·kg-1·d-1)。除正常组外，其他各组在给药1 h后灌胃PCNB

5、(剂量为400 mg ·kg-1·d-1)，正常组则给予等容积的50 g/L CMCNa，连续15 d。全部动物于末次给药后禁食24 h，称质量后经眶静脉取血，脱颈椎处死，迅速取出肝脏称质量，计算肝脏指数：w=mliver/mbody。所取血液经1 500 r/min离心10 min,分离血清，按试剂盒操作步骤测定血清GOT、ALP含量。每只大鼠取相同部位肝脏用体积分数10%的甲醛溶液固定，石蜡包埋切片，苏木素伊红(HE)染色，然后在光学显微镜下观察并计算每个视野下肝组织坏死灶数目。另取肝组织适量，冰浴下用生理盐水抽取100 g/L肝匀浆，采用硫代巴比妥酸法5测定肝组织MD

6、A含量。15统计学方法采用SPSS 110统计软件进行数据的统计分析。2结果21一般情况模型组大鼠被毛松弛，毛色暗淡，厌食，消瘦，肝脏表面呈暗红色，部分肝脏表面呈颗粒状，门静脉增粗。胃舒散高、低剂量组情况较模型组好，两组各死亡1只，两组大鼠肝脏表面颗粒状结节均明显减少。22各组肝脏指数、肝功能、MDA含量及肝组织病理检查情况表1结果显示，模型组大鼠血清GOT和ALP水平、肝脏指数以及肝组织MDA含量均显著升高(与正常组比较，P005或P001)。胃舒散高、低剂量可显著降低肝脏指数、血清GOT和ALP水平及肝组织MDA含量(与模型组比较，P005或 P001)。病理切片显示，模型组大鼠肝组织细胞

7、出现变性坏死，肝小叶结构破坏，肝索排列紊乱，纤维结缔组织增生，有巨大的纤维间隔和假小叶形成，光镜视野下肝组织坏死灶数目显著增加(与正常组比较，P001)(图1-b);胃舒散高、低剂量组肝组织坏死灶数目显著减少(与模型组比较，P005或P001)，而且没有大的纤维间隔和假小叶(图1-c)，提示胃舒散高、低剂量可减轻肝组织病理损伤。表1各组肝脏指数、GOT和ALP水平、MDA含量及肝组织坏死灶数目比较。3讨论PCNB属有机氯类农药，是一种保护性杀虫剂，被广泛应用于防治农作物病虫害及蔬菜、水果的土壤处理和种子消毒。由于 PCNB容易积蓄于人体的肝脏甚至导致肝损伤，因此一直被列为果蔬中农药残留检测指标

8、之一6。根据文献4报道，PCNB能够造成肝损伤。本实验中灌胃给予400 mg·kg-1·d-1 PCNB后大鼠血清GOT和ALP水平、肝脏指数及肝组织中MDA含量显著升高，病理检查表明PCNB可引起不同程度的肝细胞损伤，甚至出现局部坏死，表明造模成功。甘草是胃舒散的主要成分之一，在处方中所占比例最大。本草图经指出：“甘草能解百毒，为众药之要”。甘草对四氯化碳、四氯乙烯、抗结核剂及酒精引起的动物肝伤害有保护作用，其有效成分甘草酸经吸收后在肝脏中分解为甘草次酸和葡萄糖醛酸，后者能与毒物结合而解毒7。现代药理研究证实8，减少肝毒物活性是甘草酸抗肝损伤的作用机制之一。大黄在胃舒散中

9、以生品入药，有缓泻的作用，其泻下的主要成分番泻苷A在大肠中的代谢产物能够直接刺激大肠，使其排空运动增加而促进排便，从而减少化学性毒物在体内的停留时间7。本实验结果提示，胃舒散对PCNB所致大鼠肝损伤具有一定的保护作用，其作用机理可能与胃舒散中所含甘草的护肝作用有关，也可能是胃舒散中所有中药协同作用的结果，有待进一步验证。【参考文献】  1林旭楷，李德名. 胃舒散治疗湿热内阻型胃脘痛53例J.江苏中医,1998,19(痛证专辑)：79.2 林旭楷，许森源，张奕鹏，等. 胃舒散对四氯化碳性肝损伤小鼠的影响 J. 广州中医药大学学报，2004，21(5)：385.3 林旭楷，李德名，许森源，等. 胃舒散对四氯化碳慢性肝损伤大鼠的影响 J.医药论