实验十一、小鼠腹腔巨噬细胞吞噬活动的观察目的要求1

1、实验十一、实验十一、 小鼠腹腔巨噬细胞吞噬活动的观察小鼠腹腔巨噬细胞吞噬活动的观察目的要求目的要求1 1、熟悉并理解细胞吞噬活动的生理过程、熟悉并理解细胞吞噬活动的生理过程2 2、掌握诱导产生小鼠腹腔巨噬细胞的方法、掌握诱导产生小鼠腹腔巨噬细胞的方法实验用品实验用品 光学显微镜、光学显微镜、2ml2ml注射器、载玻片、盖玻片、解剖器械、注射器、载玻片、盖玻片、解剖器械、1 1鸡红细胞液、小白鼠、鸡红细胞液、小白鼠、6 6淀粉肉汤淀粉肉汤( (含台盼蓝含台盼蓝) )、生理盐水、生理盐水试剂的配制：试剂的配制： 6 6淀粉肉汤：称取牛肉膏淀粉肉汤：称取牛肉膏0.3g0.3g、蛋白胨、蛋白胨1.0g

2、1.0g、氯化钠、氯化钠O.5gO.5g和和台盼蓝台盼蓝(trypan(trypan blue)0.3g blue)0.3g分别加入到分别加入到100ml100ml蒸馏水中溶解，蒸馏水中溶解，再加入可溶性淀粉再加入可溶性淀粉6g6g，混匀后煮沸灭菌，置，混匀后煮沸灭菌，置44保存，使用时保存，使用时温浴溶解。温浴溶解。实验原理实验原理 高等动物体内存在着具有防疫功能的吞噬细胞高等动物体内存在着具有防疫功能的吞噬细胞系统，它由粒细胞和单核细胞等白细胞构成，是系统，它由粒细胞和单核细胞等白细胞构成，是机体免疫系统的重要组成部分。巨噬细胞是体内机体免疫系统的重要组成部分。巨噬细胞是体内的一种重要的免

3、疫细胞，具有非特异性吞噬功能，的一种重要的免疫细胞，具有非特异性吞噬功能，当机体受到细菌等病原体及其它异物侵入时，巨当机体受到细菌等病原体及其它异物侵入时，巨噬细胞将向病原体或异物游走，当接触异物时，噬细胞将向病原体或异物游走，当接触异物时，伸出伪足将其包围并进行内吞作用，将病原体或伸出伪足将其包围并进行内吞作用，将病原体或异物吞入细胞，形成吞噬泡，进而初级溶酶体与异物吞入细胞，形成吞噬泡，进而初级溶酶体与吞噬泡发生融合，将异物消化分解掉。本实验将吞噬泡发生融合，将异物消化分解掉。本实验将观察到小鼠巨噬细胞对进入其体内的鸡血红细胞观察到小鼠巨噬细胞对进入其体内的鸡血红细胞进行吞噬的情况。进行吞

4、噬的情况。实验内容和方法实验内容和方法( (一一) )标本制备标本制备1 1、在实验前一天，每只小鼠腹腔注射、在实验前一天，每只小鼠腹腔注射6 6淀粉肉汤淀粉肉汤( (含含4 4的台盼蓝的台盼蓝)lml)lml。2 2、实验时、实验时每组取一只每组取一只经上述处理的小鼠，腹腔注射经上述处理的小鼠，腹腔注射1 1的的鸡红细胞悬液鸡红细胞悬液lmllml。然后轻揉小鼠腹部，使鸡红细胞分。然后轻揉小鼠腹部，使鸡红细胞分散。散。( (腹腔注射时不要刺伤内脏腹腔注射时不要刺伤内脏) )3 3、2020分钟后向腹腔注射分钟后向腹腔注射0.5 ml0.5 ml生理盐水，轻揉小鼠腹部，生理盐水，轻揉小鼠腹部，

5、使其腹腔液稀释。使其腹腔液稀释。3 3分钟后用用颈椎脱臼法处死小鼠。分钟后用用颈椎脱臼法处死小鼠。4 4、将小鼠置于解剖盘中或卫生纸上，剪开腹腔，把内脏、将小鼠置于解剖盘中或卫生纸上，剪开腹腔，把内脏推向一侧，用吸管或不装针头的注射器吸取腹腔液。推向一侧，用吸管或不装针头的注射器吸取腹腔液。5 5、每人取一干净载玻片，滴一滴腹腔液，盖上盖玻片，、每人取一干净载玻片，滴一滴腹腔液，盖上盖玻片，标本便制备好了。标本便制备好了。6 6、实验绘图。、实验绘图。( (二二) )观察观察 巨噬细胞体积较大，呈巨噬细胞体积较大，呈圆形或不规则形，表面圆形或不规则形，表面具有多个突起具有多个突起( (伪足伪足

6、) )，胞质中含有数量不等、大，胞质中含有数量不等、大小不一的蓝色颗粒，它们是细胞吞噬含台盼蓝的小不一的蓝色颗粒，它们是细胞吞噬含台盼蓝的淀粉肉汤后形成的吞噬体；淀粉肉汤后形成的吞噬体；鸡红细胞呈鸡红细胞呈椭圆形，淡黄色，椭圆形，淡黄色，具椭圆形的细胞具椭圆形的细胞核。核。在视野中仔细寻找巨噬细胞吞噬鸡红细胞的不在视野中仔细寻找巨噬细胞吞噬鸡红细胞的不同阶段。有的鸡红细胞紧贴在巨噬细胞表面；有同阶段。有的鸡红细胞紧贴在巨噬细胞表面；有的红细胞已部分被吞入；有的巨噬细胞已吞入的红细胞已部分被吞入；有的巨噬细胞已吞入1 1个个或多个红细胞，形成了吞噬泡。还可见有的吞噬或多个红细胞，形成了吞噬泡。还