项目二可见分光光度法测定铁的含量3

1、1/9可可见见分分光光光光度度法法测测定定铁铁的的含含量量任务 可见分光光度法测定铁的含量可见分光光度法测定铁的含量 光分析法模块之2/9可可见见分分光光光光度度法法测测定定铁铁的的含含量量 教学目标 知识目标知识目标：掌握可见分光光度计测定铁离子的原理；掌握优化显色条件的方法。 能力目标能力目标：能独立测出铁离子的最佳波长；会使用可见光分光光度计、并能测定溶液中的离子浓度；会绘制曲线图； 素质目标素质目标：养成节约卫生意识；安全规范操作意识；具有较好的团队合作能力。3/9可可见见分分光光光光度度法法测测定定铁铁的的含含量量 课程引入1 1、课程回顾、课程回顾2、问题问题：铁是人体不可缺少的矿

2、物质元素，特别是婴幼儿在生长发育阶，用光度法测定段是不可或缺的。铁离子吸收波长为538nm,铁离子含量检测我们可不可以用光度法呢？可以的话是用紫外分光光度计还是可见分光光度计呢？答案：答案：可以用光度法测定。选择可见光分光光度计测定4/9可可见见分分光光光光度度法法测测定定铁铁的的含含量量实验实验 可见分光光度法测定铁的含量可见分光光度法测定铁的含量 1 1 实验目的实验目的 (1) (1) 掌握用邻二氮菲显色法测定铁的原理和方法。掌握用邻二氮菲显色法测定铁的原理和方法。 (2) (2) 学习吸收曲线的制作和适宜测量波长的选择。学习吸收曲线的制作和适宜测量波长的选择。 (3) (3) 进一步熟

3、练掌握分光光度计的使用方法。进一步熟练掌握分光光度计的使用方法。 5/9可可见见分分光光光光度度法法测测定定铁铁的的含含量量2 2 实验原理实验原理 在测定微量铁时，通常以盐酸羟胺或抗坏血酸还原在测定微量铁时，通常以盐酸羟胺或抗坏血酸还原FeFe3+3+为为FeFe2+2+，在，在pH=2pH=29 9范围内，使范围内，使FeFe2+2+与邻二氮菲反应与邻二氮菲反应生成稳定的橙红色配合物生成稳定的橙红色配合物Fe(CFe(C1212H H8 8N N2 2) )3 3 2+2+，其，其lglgK Kf f=21.3=21.3，maxmax=510 nm=510 nm。反应式如下：。反应式如下：

4、6/9可可见见分分光光光光度度法法测测定定铁铁的的含含量量试试 液液 V/mL标准铁标准铁溶液溶液待测铁待测铁溶液溶液加去离加去离子水至子水至H2SO4溶液溶液抗坏血抗坏血酸溶液酸溶液HAc-NaAc溶液溶液邻二氮邻二氮菲溶液菲溶液定容定容体积体积标准标准铁测铁测量液量液5.000205滴滴1.55.03.050.00参比参比溶液溶液00205滴滴1.55.03.050.00试样试样05.00205滴滴1.55.03.050.003 3 实验步骤实验步骤 1 1测量溶液的配制测量溶液的配制按表按表1 1配制测量溶液，试剂按从左往右的顺序加，每加一配制测量溶液，试剂按从左往右的顺序加，每加一种试

5、剂之前都应先摇匀种试剂之前都应先摇匀( (不要加盖不要加盖) )容量瓶中的溶液。容量瓶中的溶液。 表表1 1 测量溶液的配制测量溶液的配制 7/9可可见见分分光光光光度度法法测测定定铁铁的的含含量量2. 2. 吸收曲线的测量吸收曲线的测量 用两个用两个1 cm1 cm比色皿分别盛标准铁测量液和参比溶比色皿分别盛标准铁测量液和参比溶液，在液，在440440560 nm560 nm之间，每隔之间，每隔10 nm10 nm测测1 1次吸光度。次吸光度。 3 3试样溶液的测量试样溶液的测量 根据前面的测量结果，选取最大吸光度所对应的根据前面的测量结果，选取最大吸光度所对应的波长波长maxmax为入射光

6、波长。再取为入射光波长。再取1 1个个1 cm1 cm比色皿装入试样比色皿装入试样测量液，在测量液，在maxmax下用参比溶液调零后，分别测量标准下用参比溶液调零后，分别测量标准铁测量液的吸光度铁测量液的吸光度A A：和试样测量液的吸光度：和试样测量液的吸光度A Ax x，读数，读数准确至准确至0.0010.001。 8/9可可见见分分光光光光度度法法测测定定铁铁的的含含量量4 4 实验结果实验结果 （1 1）填写表）填写表2 2 表表2 2Fe(CFe(C1212H H8 8N N2 2) )3 3 2+2+ 溶液吸收曲线的测定溶液吸收曲线的测定/nm44045046047048049150

7、0510520530540550560A （2 2）根据测量数据）根据测量数据A As s，A Ax x及溶液的稀释情况，用比较及溶液的稀释情况，用比较法算出待测铁溶液中铁的含量法算出待测铁溶液中铁的含量 9/9可可见见分分光光光光度度法法测测定定铁铁的的含含量量 (1) (1) 认真读懂仪器使用说明，方可操作仪器；认真读懂仪器使用说明，方可操作仪器； (2) (2) 配置溶液时，加入试剂的顺序不能随意改变。配置溶液时，加入试剂的顺序不能随意改变。每加入一种试剂之前都应先摇匀每加入一种试剂之前都应先摇匀( (不要加盖不要加盖) )容量瓶中的容量瓶中的溶液；溶液； (3) (3) 用刻度吸管取标

8、液时，应从满刻度处开始，放用刻度吸管取标液时，应从满刻度处开始，放出所需体积，以减小体积误差；出所需体积，以减小体积误差； (4) (4) 每改变一次波长每改变一次波长, ,都要用参比溶液调都要用参比溶液调“0”0”和和“100%”100%”。5 5 注意事项注意事项10/9可可见见分分光光光光度度法法测测定定铁铁的的含含量量6 6 问题讨论问题讨论 （1 1）显色时，还原剂、缓冲溶液、显色剂的加入顺）显色时，还原剂、缓冲溶液、显色剂的加入顺序可否颠倒？为什么？序可否颠倒？为什么？ （2 2）制作吸收曲线时，为什么每改变一次入射光波）制作吸收曲线时，为什么每改变一次入射光波后，都必须用参比溶液

9、调零？后，都必须用参比溶液调零？11/9可可见见分分光光光光度度法法测测定定铁铁的的含含量量 （1 1）显色时，还原剂、缓冲溶液、显色剂的加入顺）显色时，还原剂、缓冲溶液、显色剂的加入顺序可否颠倒？为什么？序可否颠倒？为什么？ 答：顺序不能颠倒，因为显色反应必须在一定的条答：顺序不能颠倒，因为显色反应必须在一定的条件下进行，才能取得较好的显色效果。被测物质和各种件下进行，才能取得较好的显色效果。被测物质和各种试剂的加入顺序往往需经反复试验才能确定，所以对已试剂的加入顺序往往需经反复试验才能确定，所以对已经确定了的试剂加入顺序不能随意改动。经确定了的试剂加入顺序不能随意改动。7 7 参考答案参考答案12/9可可见见分分光光光光度度法法测测定定铁铁的的含含量量 （2 2）制作吸收曲线时，为什么每改变一次入射光波）制作吸收曲线时，为什么每改变一次入射光波后，都必须用参比溶液调零？后，都必须用参比溶液调零？ 答：由于比色皿和参比溶液对不同波长的入射光有答：由于比色皿和参比溶液对不同波长的入射光有不同的反射和吸收，所以当测量波长改变时，都要用参不同的反射和吸收，所以当测量波长改变时，都要用参比溶液进行调零，这样才能测出有色物质在该波长下的比溶液进行调零，这样才能测