凝胶渗透色谱法测定聚合物的分子量分布

1、凝胶渗透色谱法测定聚合物的分子量分布合成聚合物一般是由不同分子量的同系物组成的混合物，具有两个特点：分子量大和同系物的分子量具有多分散性。目前在表示某一聚合物分子量时一般同时给出其平均分子量和分子量分布。分子量分布是指聚合物中各同系物的含量与其分子量间的关系，可以用聚合物的分子量分布曲线来描述。聚合物的物理性能与其分子量和分子量分布密切相关，因此对聚合物的分子量和分子量分布进行测定具有重要的科学和实际意义。同时，由于聚合物的分子量和分子量分布是有聚合过程的机理所决定，通过聚合物的分子量和分子量分布与聚合时间的关系可以研究聚合机理和聚合动力学。测定聚合物分子量的方法有多种，如粘度法、端基分析法、

2、超离心沉降法、动态/静态光散射法和凝胶色谱法（GPC)对等；测定聚合物分子量分布的方法主要有三种：(1)利用聚合物溶解度的分子量依赖性，将试样分成分子量不同的级分，从而得到试样的分子量分布，例如沉淀分级法和梯度淋洗分级法。(2)利用聚合物分子链在溶液中的分子运动性质得出分子量分布例如：超速离心沉降法。(3)利用聚合物体积的分子量依赖性得到分子量分布，例如：体积排除色谱法（或称为凝胶色谱法）。凝胶色谱法具有快速、精确、重复性好等优点，目前成为科研和工业生产领域测定聚合物分子量和分子量分布的主要方法。一、 实验目的和要求 1、了解凝胶渗透色谱的测量原理，初步掌握GPC的进样、淋洗、接收、检测等操作

3、技术。2、掌握分子量分布曲线的分析方法，得到样品的数均分子量、重均分子量和多分散性指数。二、实验装置与原理 1、分离机理 GPC是液相色谱的一个分支，其分离部件是一个以多孔性凝胶作为载体的色谱柱，凝胶的表面与内部含有大量彼此贯穿的大小不等的空洞。色谱柱总面积Vt由载体骨架体积Vg、载体内部孔洞体积Vi和载体粒间体积V0组成。GPC的分离机理通常用“空间排斥效应”解释。待测聚合物试样以一定速度流经充满溶剂的色谱柱，溶质分子向填料孔洞渗透，渗透几率与分子尺寸有关，分为以下三种情况：（1）高分子尺寸大于填料所有孔洞孔径，高分子只能存在于凝胶颗粒之间的空隙中，淋洗体积Ve=V0为定值；（2）高分子尺寸

4、小于填料所有孔洞孔径，高分子可在所有凝胶孔洞之间填充，淋洗体积Ve=V0+Vi为定值；（3）高分子尺寸介于前两种之间，较大分子渗入孔洞的几率比较小分子渗入的几率要小，在柱内流经的路程要短，因而在柱中停留的时间也短，从而达到了分离的目的。当聚合物溶液流经色谱柱时，较大的分子被排除在粒子的小孔之外，只能从粒子间的间隙通过，速率较快；而较小的分子可以进入粒子中的小孔，通过的速率要慢得多。经过一定长度的色谱柱，分子根据相对分子质量被分开，相对分子质量大的在前面（即淋洗时间短），相对分子质量小的在后面（即淋洗时间长）。自试样进柱到被淋洗出来，所接受到的淋出液总体积称为该试样的淋出体积。 当仪器和实验条件

5、确定后，溶质的淋出体积与其分子量有关，分子量愈大，其淋出体积愈小。分子的淋出体积为：Ve=V0+KVi  (K为分配系数0K1，分子量越大越趋于1)  (1)对于上述第（1）种情况K=0，第（2）种情况K=1，第（3）种情况0<K<1。综上所述，对于分子尺寸与凝胶孔洞直径相匹配的溶质分子来说，都可以在V0至V0+Vi淋洗体积之间按照分子量由大到小一次被淋洗出来。2. 检测机理 除了将分子量不同的分子分离开来，还需要测定其含量和分子量。实验中用示差折光仪测定淋出液的折光指数与纯溶剂的折光指数之差n，而在稀溶液范围内n与淋出组分的相对浓度c成正比，则以n对淋出体积（

6、或时间）作图可表征不同分子的浓度。图1为折光指数之差n（浓度响应）对淋出体积（或时间）作图得到的GPC谱图示意图。图1折光指数之差n对淋出体积作图得到的GPC示意谱图。3. 校正曲线用已知相对分子质量的单分散标准聚合物预先做一条淋洗体积或淋洗时间和相对分子质量对应关系曲线，该线称为“校正曲线”。聚合物中几乎找不到单分散的标准样，一般用窄分布的试样代替。在相同的测试条件下，做一系列的GPC标准谱图，对应不同相对分子质量样品的保留时间，以lgM对t作图，所得曲线即为“校正曲线”； 用一组已知分子量的单分散性聚合物标准试样，以它们的峰值位置的Ve对lg M作图，可得GPC校正曲线（如图2）。图2.

7、GPC校正曲线示意图。由图2可见，当lgM>a与lgM<b时，曲线与纵轴平行，说明此时的淋洗体积与试样分子量无关。V0+ViV0是凝胶选择性渗透分离的有效范围，即为标定曲线的直线部分，一般在这部分分子量与淋洗体积的关系可用简单的线性方程表示：lg M=A+BVe·························· (2)式子中

8、A、B为常数，与聚合物、溶剂、温度、填料及仪器有关，其数值可由校正曲线得到。对于不同类型的高分子，在分子量相同时其分子尺寸并不一定相同。用PS作为标准样品得到的校正曲线不能直接应用于其他类型的聚合物。而许多聚合物不易获得再分布的标准样品进行标定，因此希望能借助于某一聚合物的标准样品在某种条件下测得的标准曲线，通过转换关系在相同条件下用于其它类型的聚合物试样。这种校正曲线称为普适校正曲线。根据Flory流体力学体积理论，对于柔性链当下式成立时两种高分子具有相同的流体力学体积，则有下式成立：          

9、;  （3）再将Mark-Houwink方程代入上式可得：    （4）由此，如已知在测定条件下两种聚合物的K、值，就可以根据标样的淋出体积与分子量的关系换算出试样的淋出体积与分子量的关系，只要知道某一淋出体积的分子量M1，就可算出同一淋出体积下其它聚合物的分子量M2。4. 柱效率和分离度 与其他色谱分析方法相同，实际的分离过程非理想，同分子量试样在GPC上的谱图有一定分布，即使对于分子量完全均一的试样，其在GPC的图谱上也有一个分布。采用柱效率和分离度能全面反映色谱柱性能的好坏。色谱柱的效率是采用“理论塔板数”N进行描述的。测定N的方法使用一

10、种分子量均一的纯物质，如邻二氯苯、苯甲醇、乙腈和苯等作GPC测定，得到色谱峰如图3所示。图3. 柱效率和分离度示意图。从途中得到峰顶位置淋出体积VR，峰底宽W，按照下式计算N：N=16(VR/W)2································· （5

11、）对于相同长度的色谱柱，N值越大意味着柱子效率越高。GPC柱子性能的好坏不仅看柱子的效率，还要注意柱子的分辨能力，一般采用分离度R表示：R=2(V2-V1)/(W1+W2)·················· （6）如图3所示的完全分离情形，此时R应大于或等于1，当R小于1时分离是不完全的。为了相对比较色谱柱的分离能力，定义比分离度Rs，它表示分子量相差10倍时的组分分离度，定义为：Rs=2(V2-V1)/(W1+W

12、2)(lg Mw1-lg Mw2)               （7）三、 主要仪器设备 1仪器Waters 1515 Isocratic HPLC型凝胶色谱仪（带有示差折光检测装置，B型号色谱管×2），如图4所示。凝胶色谱仪主要由输液系统、进样器、色谱柱（可分离分子量范围2×1022×106）、示差折光仪检测器、记录系统等组成。图4. Waters 1515 Isocratic HPLC型凝胶色谱仪2试剂质量分数为3的聚苯乙

13、烯溶液试样、一系列不同分子量的窄分布聚苯乙烯溶液、四氢呋喃。四、操作方法和实验步骤1. 调试运行仪器：选择匹配的色谱柱，在实验条件下测定校正曲线（一般是40°C）。这一步一般有任课老师事先准备。2. 配制试样溶液：使用纯化后的分析纯溶剂配制试样溶液，浓度3。使用分析纯溶剂，需经过分子筛过滤，配置好溶液需静置一天。这一步一般有任课老师事先准备。3.用注射器吸取四氢呋喃，进行冲洗，重复几次。然后吸取5mL试样溶液，排除注射器内的空气，将针尖擦干。将六通阀扳到“准备”位置，将注射器插入进样口，调整软件及仪器到准备进样状态，将试样液缓缓注入，而后迅速将六通阀扳到“进样”位置。将注射器拔出，并

14、用四氢呋喃清洗。抽取试样时注意赶走内部的空气；试样注入至调节六通阀至INJECT的过程中注射器严禁抽取或拔出。在注入试样时，进样速度不宜过快。速度过快，可能导致定量环内靠近壁面的液体难以被赶出，而影响进样的量；稍慢可以使定量环内部的液体被完全平推出去。4. 获取数据。5. 实验完成后，用纯化后的分析纯溶剂流过清洗色谱柱。五、 实验数据记录和实验结果分析处理 实验参数：色谱柱: _  内部温度:_     外加热器温度:_    流量:_进样体积:  _mLGPC仪都配有数据处理系统，同时给出GPC谱图（如图5）和各种平均分子量和多分散系数。