美国疾病控制中心实验室生物安全级别标准

1、美国疾病控制中心实验室生物安全级别标准何晨光译天津出入境检验检疫局(300042本标准概括了传染性微生物和实验动物工作中的四个生物安全级别所包括的主要要素。根据给个人、环境、社会提供的保护情况,确定级别。1生物安全一级(BS L1BS L1适合于非常熟悉的病源,该病源不会经常引发健康成人疾病,对实验人员和环境潜在危险小。实验室没有必要和建筑物中的一般行走区分开。一般按照标准的微生物操作,在开放的实验台面上开展工作。不要求、一般也不使用特殊的遏制设备和设施。实验人员在实验程序方面受过特殊训练,由受过微生物学或相关科学一般训练的科学工作者监督实验。以下标准及特殊操作、安全设备及设施和BS L1病源

2、有关:111标准微生物操作11111在进行有关培养物及样品实验时,未经实验室主任同意,限制或禁止进入实验室。11112进行活体处理后,实验人员要洗手,离开实验室前脱手套。11113不许在工作区域饮食、吸烟、清洗隐型眼镜和化妆。不允许在工作区存放食物和日常生活用品。在实验室中,戴隐型眼镜的人,也需戴口罩或面罩。食物应存放在工作区域以外专用橱柜或冰箱中。11114不能用嘴移液,只能用机械装置移液。11115制定锐器安全使用规范。11116所有的操作过程应尽量细心,避免产生溅出和气溶胶。11117至少一天一次、活体溅出时,都应进行台面消毒。11118所有的培养物、储存物及其它规定的废物在释放前,均应

3、使用可行的消毒方法进行消毒,如高压灭菌。转移到就近实验室消毒的物料应置于耐用、防漏容器内,密封运出实验室,其包装应符合有关地方、州、联邦法规。11119当存在传染源时,应在实验室入口处贴生物危险标志,并显示以下信息:实验中的病源名称、研究者姓名及电话号码。111110实施控制昆虫和龋齿动物的程序。112特殊操作无113安全设备(第一道屏障11311和BS L1相关的病源,其操作一般不需要生物安全柜之类的特殊遏制装置或设备。11312建议穿实验服、大褂、制服,避免污染和衣服上的尘土。11313若手上皮肤有伤或出皮疹,应戴手套。11314操作过程中,估计会出现微生物或危险物溅出时,应戴保护眼具。1

4、14实验室设施(第二道屏障11411实验室应设置门以控制进入。11412每个实验室有一个洗手池。11413实验室设计要便于清洗,实验室内不适宜用地毯。11414实验台表面应能防水、耐热、耐有机溶剂、耐酸碱和耐用于工作台面及设施消毒的其他化学物质。11415实验室的实验台应能承受预期的重量并符合使用。实验台、安全柜以及设备之间的空间应便于打扫。11416如果实验室有对着外面的窗子,应装防止苍蝇的窗纱。2生物安全二级(BS L2BS L2与BS L1类似,适合于对人和环境有中度潜在危险的病源,与BS L1的区别在于:实验人员均接受过病源处理方面的特殊培训,并由有资格的科学工作者指导;进行实验时,限

5、制进入实验室;对于污染的锐器,要特别注意;某些可能产生传染性气溶胶或飞溅物的过程应在生物安全柜中或其它物理遏制设备中进行。以下的标准及特殊操作、安全设备及设施和BS L2病源有关:211标准微生物操作21111实验时,未经实验室主任同意,限制或禁止进入实验室。21112进行活体处理后,实验人员要洗手;离开实验室前脱手套。21113不许在工作区域饮食、吸烟、清洗隐型眼镜和化妆。食物应存放在工作区域以外专用橱柜或冰箱中。21114不能用嘴移液,只能用机械装置移液。21115制定锐器安全使用规范。21116所有的操作过程应尽量细心,避免产生溅出和气溶胶。21117实验完毕、下班前、活体溅出或溢出时,

6、都应使用对病源有效的消毒剂进行台面消毒。21118所有的培养物、储存物及其它规定的废物在释放前,均应使用可行的消毒方法进行消毒,如高压灭菌。转移到就近实验室消毒的物料应置于耐用、防漏容器内,密封运出实验室。离开该系统进行消毒的物料,在转移前应包装,其包装应符合有关地方、州、联邦法规。21119实施控制昆虫和龋齿动物的程序。212特殊操作21211在开展有关传染病源工作时,实验室主任应禁止或限制人员进入实验室。般情况下,易感人员或感染后会出现严重后果的人员,不允许进入实验室或动物房。例如,患有免疫缺陷或免疫抑制的人,其被感染的危险性增加。实验室主任对每种情况的估计和决定谁能进入实验室或动物房工作

7、,负有最终责任。21212实验室主任应制定规章和程序,只有告知潜在风险并符合进入实验室特殊要求(如,经过免疫接种的人,才能进入实验室。21213存在外源性病源时,实验室入口处应贴有生物危险标志,并显示以下信息:有关病源、生物安全级别、免疫接种要求、研究人员姓名、电话号码、在实验室中必须佩带的个人防护设施、出实验室所要求的程序。21214实验室人员接受适当的、和实验室中处理或将要处理的病源有关的免疫接种或测试(如,乙肝免疫接种或T B皮试。21215根据所处理的病源,适当时,收集和储存适合于实验室人员和有风险人员使用的基本血清样品。根据所处理病源或设施的功能,应定期收集其他血清样品。21216实

8、验室主任为实验室人员特别制定的标准操作程序或生物安全手册中,应包括生物安全程序。对于有特殊风险的人员,要求阅读并在工作及程序上遵照执行。21217实验室主任保证实验及其辅助人员接受适当的培训,包括和工作有关的可能存在的风险、防止暴露的必要措施和暴露评估程序。当程序必需改变时,有关人员必须每年更新知识,接受附加培训。21218对于污染的锐器,必须时刻保持高度的警惕,包括针、注射器、玻片、加样器、毛细管、手术刀。2121811针和注射器或其他锐器应限制在实验室内,类似灌肠、静脉切开放血或实验动物液体吸出等,可以用其他器具的,就不要用锐器。可能时,用塑料器具代替玻璃器具。2121812注射和吸取感染

9、材料时,只能使用针头固定注射器或一次性注射器(即注射器和针头是一体的。用过的一次性针头必须弯曲、切断、破碎、重新套上针头套、从一次性注射器上去掉,或在丢弃前进行人工处理,要不将之小心放入不会被刺穿的、用于收集废弃锐器的容器中。非一次性锐器必须放置在坚壁容器中,转移至处理区消毒,最好高压杀菌。2121813适当时,使用带针头套的注射器、无针头的系统和其他安全设施。2121814打碎的玻璃器皿不能直接用手处理,必须用其它工具处理,如刷子和簸箕、夹子或镊子。盛污染的针头、锐器、碎玻璃的容器在倒掉前,应按照地方、州、联邦的规定进行消毒。21219培养物、组织,体液标本或具有潜在传染性的废物要放入带盖的

10、容器中,以防在收集、处理、储存、运输或装卸过程中泄露。212110按日常程序、在有关传染源的工作结束后、尤其是传染源溅出或洒出后、或受到其他传染源污染后,实验室设备和工作台面应当使用有效的消毒剂消毒。污染的设备在送去修理、维护前,要按照地方、州或联邦的规定消毒;在离开设施转移前,要按照地方、州或联邦的规定打包运输。212111溅出或偶然事件中,明显暴露于传染源时,要立即向实验室主任报告。进行适当的医学评估、观察、治疗,保留书面记录。212112和实验无关的动物不允许进入实验室。213安全设备(第一道屏障21311任何时候都要使用正确保养的生物安全柜最好是二级生物安全柜、其他合适的人员防护设施、

11、或物理遏制装置。2131111确定可能形成传染性气溶胶或溅出物的实验过程,包括离心、研磨、匀浆、剧烈震荡或混匀、超声波破裂、开启装有传染源的容器(容器内部的压力可能与入气压不一致、动物鼻孔接种、从动物或胚胎卵采集感染组织。2131112涉及高浓度或大体积的传染源时,若选用密封转头或带安全罩的离心机,若转头或安全罩仅在生物安全柜中打开,则可在开放实验室内离心。21312当必须在生物安全柜外处理微生物时,需采取面部保护措施(眼镜、口罩、面罩或其他防溅装置,以免传染源或其他有害物溅或洒到面上。21313在实验室内,必须使用专用的防护性外衣、大褂、罩衫或制服。人员到非实验室区域(如:咖啡屋、图书馆、门

12、房时,防护服必须留在实验室内。防护服可以在实验室内处理,也可以在洗衣房中洗涤,但不能带回家中。21314可能接触潜在传染源、被污染的表面或设备时,要戴手套。戴两副手套更合适。明显污染的手套要处理,当有关传染源工作结束时或手套损伤时,要去掉手套。次性手套不用清洗,不能重复使用,不能用于接触“洁净”的表面(键盘、电话等,也不应当戴着到实验室外。要备有带滑石粉的乳胶手套。脱掉手套后要洗手。214实验室设施(第二道屏障21411遏制病源的设施应该有带锁的门。21412新建实验室选址要远离公共场所。21413每个实验室有一个洗手池。21414实验室设计要便于清洗,实验室内不适宜用地毯。21415实验台表

13、面应能防水、耐热、耐有机溶剂、耐酸碱和耐用于工作台面及设施消毒的其他化学物质。21416实验室的操作台应能承受预期的重量并符合使用要求。实验台、安全柜以及设备之间的空间应便于打扫。实验室使用的椅子及其它器具,应覆盖易于清洗的非织物。21417安装生物安全柜时,要考虑到房间的通风和排风,不会导致生物安全柜超出正常参数运行。生物安全柜应远离门、远离能打开的窗,远离行走区,远离其他可能引起风压混乱的设备,保证生物安全柜气流参数在有效范围内。21418应有眼睛冲洗装置。21419光线适宜于开展所有的工作,避免反光和闪光,以免妨碍视觉。214110没有特别的通风要求。添置新设备时,应考虑机械通风系统输送

14、的气流不会造成实验室外部空气的循环。如果实验室有对着外面的窗子,应装防止苍蝇的窗纱。3生物安全三级(BS L3BS L3应用于临床、诊断、教学、研究或者生产设施,在该级别中开展有关内源性和外源性病源的工作。若因暴露而吸入该病源,会引发严重的、可能致死的疾病。实验人员应在处理致病性的和可能侵入致死的病源方面受过专业训练,并由对该病源工作有经验的、有资格的科学工作者监督。所有与传染源操作有关的步骤,都在生物安全柜或其他物理遏制装置中进行,由穿戴合适防护服及设施的实验人员进行。实验室经过特殊设计和施工。然而,应该认识到现有的有些设施,不一定满足BS L3的所有要求(即,双门进入工作区和密封问题。在这

15、种情况下,在BS L2设施中开展常规操作(如,诊断程序中用于鉴定:分型、敏感性测试的病源繁殖,其安全级别也可接受,但还需做到:将实验室内废气排出室外;实验室的通风经过平衡以向室内提供定向气流:工作时,禁止进入实验室;严格遵照或使用BS L3中推荐的标准微生物操作、特殊操作和安全设备。只有实验室主任可作出对BS L3推荐的修订方法进行补充的决定。以下的标准和特殊安全操作、设备及设施和BS L-3病源有关:311标准微生物操作31111实验时,由实验室主任决定限制或禁止进入实验室。31112接触传染源的人员在离开实验室时取下手套后,要洗手。31113实验室内严禁饮食、吸烟、清洗隐型眼镜和化妆。实验

16、室内戴隐型眼镜的人,也要戴眼镜和面罩。食品要存放在工作区外专用的橱柜和冰箱中。31114不能用嘴移液,只能用机械装置移液。31115制定锐器安全使用规范。31116所有的操作过程应尽量细心,避免产生气溶胶。31117至少每天一次或有活体洒出时,对工作台面进行消毒。31118所有的培养物、储存物及其它规定的废物在释放前,均应使用可行的消毒方法进行消毒,如高压灭菌。转移到就近实验室消毒的物料应置于耐用、防漏容器内,密封运出实验室。来自BS L-3实验室的传染性废物转移至他处释放前应消毒。31119实施控制昆虫和龋齿动物的程序。312特殊操作31211实验时,关闭实验室的门。31212实验室主任对进

17、入实验室进行控制,限制项目有关人员及辅助人员进入。一般情况下,易感人员或感染后会出现严重后果的人员,不允许进入实验室或动物房。例如,患有免疫缺陷或免疫抑制的人,其被感染的危险性增加。实验室主任对每种情况的估计和决定谁能进入实验室或动物房工作,负有最终责任。未成年人不得进入实验室。31213实验室主任应制定规章和程序,只有告知潜在风险并符合进入实验室特殊要求(如,经过免疫接种、遵守进出程序的人,才能进入实验室和动物房。31214当实验室或遏制设施中有传染源和感染动物时,所有实验室和动物房入口处,应贴有危险警告标志和常用的生物危险符号,并显示以下信息:有关病源、实验室主任和有关责任人的姓名和电话表

18、、进入实验室的特别要求(如,必须免疫、戴口罩或采取其他的个人防护措施。31215实验室人员接受适当的、和实验室中处理或将要处理的病源有关的免疫接种或测试(如,乙肝免疫接种或T B皮试,并建议根据所处理的病源定期进行皮试。31216适当时,收集和储存适合于所有实验室人员和其他有风险人员使用的基本血清样品。根据所处理病源或实验室的功能,应定期收集其他血清样品。31217实验室主任应制定实验室专用生物安全手册,标准操作程序中要包括生物安全预防措施。要告知实验人员特殊风险,实验人员要阅读,并在操作和程序中遵照执行。31218实验人员及其辅助人员应接受适当的培训,包括和工作有关的可能存在的风险、防止暴露

19、的必要措施和暴露评估程序。当程序必需改变时,有关人员必须每年更新知识,接受附加培训。31219实验室主任有责任确保在涉及BS L-3的微生物工作开展之前,所有人员熟练掌握标准微生物操作及技能,熟练掌握特殊实验室设施的操作和运行,其中可能包括人致病菌或细胞培养物处理的重要技术,或由实验室主任或其他熟悉于微生物安全操作及技能的、称职的科研工作者提供的特殊培训课程。312110必须经常对所有污染的锐器采取高度预防措施,包括针头和注射器、玻片、移液管、毛细管和手术刀。31211011针和注射器或其他锐器应限制在实验室内,类似灌肠、静脉切开放血、实验动物液体吸出等,可以用其他器具的,就不要用锐器。可能时

20、,用塑料器具代替玻璃器具。31211012注射和吸取感染材料时,只能使用针头固定注射器或一次性注射器(即注射器和针头是一体的。用过的一次性针头必须弯曲、切断、破碎、重新套上针头套、从一次性注射器上去掉或在丢弃前进行人工处理,要不将之小心放入不会被刺穿的、用于收集废弃锐器的容器中。非一次性锐器必须放置在坚壁容器中,转移至处理区消毒,最好高压杀菌。31211013适当时,使用带针头套的注射器、无针头的系统和其他安全设施。31211014打碎的玻璃器皿不能直接用手处理,必须用其它工具处理,如刷子和簸箕、夹了或镊子。盛污染的针头、锐器、碎玻璃的容器在倒掉前,应按照地方、州、联邦的规定进行消毒。3121

21、11所有与传染源有关的开放操作,都应在遏制设施内的生物安全柜或其他物理遏制设备中进行。不许在开放的实验台上、并在开放的设施中开展工作。用背面为塑料质地的纸擦拭生物安全柜内的无孔台面,便于清洁。312112按日常程序,在有关传染源的工作结束后,尤其是传染源洒出或溅出后或受到其他传染源污染后,实验室设备和工作台面应当使用有效的消毒剂消毒。31211211洒出的传染源需由专业人员或由经过适当培训且配有装备的处理高浓度传染源的人员进行消毒、处理、清洗。制定并公布可能造成溅洒的实验程序。31211212污染的设备在离开设施送去修理、维护或打包运输前,要按照地方、州或联邦的规定消毒。31211213培养物

22、、组织,体液标本或具有潜在传染性的废物要放入容器中,以防在收集、处理、储存、运输或装卸过程中泄露。31211214实验室里所有可能被污染的废弃物品(如:手套、实验室外套等,在丢弃或重新使用之前,必须经过消毒。31211215洒漏或偶然事件中,明显或可能暴露于传染源时,要立即向实验室主任报告。进行适当的医学评估、观察、治疗,保留书面记录。313安全设备(第一道屏障31311进入实验室时,要穿上实验防护服。如:前襟一体或后系式大褂、干净的外套或连裤服。不得在实验室外穿防护服。重复使用的衣服在清洗前要消毒,衣服被明显污染后应更换。31312在处理传染源、感染动物及被污染的仪器时,必须戴手套。3131

23、3建议经常更换手套和洗手,一次性手套不能重复使用。31314有关传染源的所有操作、感染动物的验尸、从感染动物或胚胎卵采集组织或液体等,都应在II 级或III级生物安全柜中进行。31315当操作不能在生物安全柜中进行时,应适当的综合使用个人防护设施(如,口罩,面罩等和物理遏制设施(如:带安全罩或密封转头的离心机。31316当进入内有感染动物的房间时,应采取呼吸和面部保护措施。314实验室设施(第二道屏障31411实验室要离开建筑物内的行走区,禁止随便进入实验室。进入走道后,至少需要经过两道自动门,才能进入实验室。所有的门都应有锁。过道里可以设计一个更衣室。31412每个实验室有一个洗手池,洗手池

24、的操作应该是免接触式或全自动的,洗手池应安装在门口附近。31413处理BS L3病源的区域,墙面、地面、天花板应易于清洗、消毒,若有接缝,应密封;表面应光滑防水,对实验室常用化学试剂和消毒剂具有耐腐蚀性。地板应整体、防滑,建议在地板凹处使用掩蔽罩。墙面、地面、天花板都不应留有缝隙,或在设施消毒时能够密封。31414实验台表面应能防水、耐热、耐有机溶剂、耐酸碱和用于工作台面及设施消毒的其他化学物质。31415实验室的操作台应能承受预期的重量。实验台、安全柜以及设备间的空间便于打扫,实验室使用的椅子及其它器具,应覆盖易于清洗的非织物。31416所有的窗门必须关闭和密封。31417有实验垃圾处理设施

25、及其使用方法,该设施最好设在实验室内(即,高压锅、化学消毒剂、焚烧炉、其他可行的消毒方法,应有消毒设备使用方法。若垃圾运出实验室,应适当密封,并不应通过公共通道运送。31418应配置生物安全柜,安全柜放置地点应远离门、房间通风百叶窗、实验室内行走区。31419应有管道化的排气系统,该系统进入实验室的风向应从“洁净区”到“污染区”。排出的空气不再循环至建筑物内的任何其他区域。排出的空气不需要过滤或作其他处理,但也要依所处场所的要求、特殊病源操作,使用条件而定。外部排气口要远离有人区、进风口,否则需经过HEPA过滤。实验人员必须证实进入实验室的风向是正确的。建议在实验室的入口处设置可视的监视装置,

26、表明和证实进风的风向。要考虑安装H VAC控制系统。防止实验室持续正向增压。应安装声音报警装置,警告实验人员H VAC系统出了问题。314110若生物安全柜至少每年经过测试和确证,则二级生物安全柜排出的、经过HEPA过滤的空气,可进入实验室循环。当二级生物安全柜通过建筑物排气系统排出空气时,安全柜的排气管路的连结,应避免对安全柜的空气平衡或建筑物排气系统的空气平衡产生干扰(如,在安全柜排气管和排气管道间形成空气隙。当使用三级生物安全柜时,要和排气系统直接连结。若三级安全柜和供气系统相连,应避免安全柜正向增压(见附A。314111会产生气溶胶的连续流离心机及其他设备应在一个装置中,该装置通过HE

27、PA过滤器排出空气,而避免直接排入实验室中。至少每年测试HEPA系统。另外,当远离有人区或进风口时,该设备排出的空气可以排到外面。314112真空管路由液体消毒剂汽水阀和HEPA过滤器及类似设备保护。需要时,(要更换过滤器。另外,可以使用手提真空泵(也需要由汽水阀和过滤器正确保护。314113实验室内应有眼睛冲洗装置。314114光线适宜开展所有的工作,避免反光和闪光,以免妨碍视觉。314115BS L3设施的设计和操作程序必须文件化。设施必须经过溅试以确证设计和操作参数在系统运转前已达到要求。因操作经验,会修改操作程序,所以设施必须反复测试,每年至少一次。314116若有关病源陈述(根据风险

28、分析、场所条件、其他有关联邦/州/地方法规而定中要求,则应采取其他环境保护措施(如,实验人员淋浴、排出空气的HEPA过滤、其他管道设施的遏制处理、液体消毒剂的供应。4生物安全四级(BS L一4有些危险的外源性病源,具备因气溶胶传播而致实验室感染和导致生命危险疾病的高度个体风险,有关工作应在BS L4实验室中开展。和BS L4病源有相近或特定抗原关系的病源,也应在该级别中开展工作,在该级别的连续工作和低级别的工作中得到足够数据的病源除外。实验室成员应在处理特别危险的传染源方面受过特殊和全面的训练,应了解标准和特殊操作中一级和二级遏制的作用、遏制设备、实验室设计性能。实验由在有关病源方面受过训练、

29、并有工作经验的、有资格的科学工作者监督。实验室主任严格控制进入实验室。设施应在独立的建筑物内;或在建筑物的个控制区内,但和建筑物内的其他区域完全隔离。应制定、实施特殊设施操作手册。在设施的工作区内,所有工作应限制在三级生物安全柜中:或在二级生物安全柜中,但得使用装备生命支持系统的一体正压防护服。BS L4实验室经过特殊设计,是一个特殊的工程,可以防止微生物向环境中扩散。以下的标准和特殊安全操作、设备及设施和BS L4病源有关。411标准微生物操作41111实验时,由实验室主任决定限制进入实验室。41112要制定锐器的安全使用规范。41113所有的操作过程应尽量细心,避免产生气溶胶。41114至

30、少每天一次、或有活体洒出时,对工作台面进行消毒。41115所有废物在释放前,应使用可行的方法消毒,如高压灭菌。41116实施控制昆虫和龋齿动物的程序。412特殊操作41211只有在实验过程中或辅助需要而必须进入设施或独立实验室的实验人员,才能授权进入。患有免疫缺陷或免疫抑制的人,存在被感染的危险。另外,对于感染风险大的人、因感染而会致特殊危险的人,如儿童或孕妇,不准进入实验室或动物房。监督者对每种情况的估计和决定谁能进入实验室工作负有最终责任。通过安全措施(如锁上门限制进入实验室。实验室主任、风险控制负责人、设施物理安全负责人控制人员进入。进入前,要告知潜在危险,通知采取适当安全防护以保证安全

31、。授权进入者要执行通知规定,执行现行所有其他进出程序。所有人要作工作日志,记录每次进出日期、时间。应建立实用有效的紧急情况处理程序。41212当实验室或动物房中有传染源和感染动物时,所有入口处的门上应贴有危险警告标志和常用的生物危险符号,并标明以下信息:有关病源、实验室主任和其他责任人的姓名表、并表明进入该区的所有特别要求(如,必须免疫或戴口罩。41213实验室主任有责任确保在涉及BS L4的微生物工作开展之前,所有人员非常熟练掌握标准微生物操作及技能,熟练掌握特定实验室设施的特殊操作和运行,其中可能包括人致病菌或细胞培养物处理的重要经验,或由实验室主任或其他熟悉于独特的微生物安全操作及技能的

32、、有资格的科研工作者提供的特殊培训课程。41214实验室人员接受有效的、和实验室中处理或将要处理的病源有关的免疫接种。41215适当时,收集和储存适合于所有实验室人员和其他有风险人员使用的基本血清样品。根据所处理病源或实验室的功能,应定期收集其他血清样品。决定建立血清学监督程序时,应当考虑能否得到有关病源的抗体测试方法;程序中,收集一段时间后,应进行血清样品的测试,并将测试结果通知参与者。41216实验室主任制定、使用生物安全手册。要告诉实验人员特殊风险,实验人员要阅读,并在操作和程序中遵照执行。41217实验人员及其辅助人员应接受适当的培训,包括和工作有关的可能存在的风险、防止暴露的必要措施

33、和暴露评估程序。当程序必需改变时,有关人员必须每年更新知识,接受附加培训。41218人员只有通过更衣间和淋浴室进出实验室。每次离开实验室时,淋浴消毒。仅在紧急情况下,使用气塞进出实验室。41219在外更衣间脱掉并保存日常衣服。所有进入实验室的人员,应有并使用整套实验服,包括内衣、紧身长衬裤和衬衫或连衣裤工作服、鞋子、手套。当离开实验室并进入淋浴区前,在内更衣间脱掉实验服。衣服清洗前高压杀菌。412110设施中所需用品和物料通过双门高压锅、烟熏消毒舱、或气塞送入。每次使用后,要对这些装置适当消毒。双门高压锅、烟熏消毒舱、或气塞外面的门牢固的关上后,设施内的人员打开里侧的门取出物料。物料送入设施后

34、,门上保险。412111必须经常对所有污染的锐器采取高度预防措施,包括针头和注射器、玻片、移液管、毛细管和手术刀。41211111针和注射器或其他锐器应限制在实验室内,类似灌肠、静脉切开放血、或实验动物液体吸出等,可以用其他器具的,就不要用锐器。可能时,用塑料器具代替玻璃器具。41211112注射和吸取感染材料时,只能使用针头固定注射器或一次性注射器(即注射器和针头是一体的。用过的一次性针头必须弯曲、切断、破碎、重新套上针头套、从一次性注射器上去掉或在丢弃前进行人工处理,要不将之小心放入不会被刺穿的、用于收集废弃锐器的容器中。非一次性锐器必须放置在坚壁容器中,转移至处理区消毒,最好高压杀菌。4

35、1211113适当时,使用带针头套的注射器、无针头的系统和其他安全设施。41211114打碎的玻璃器皿不能直接用手处理,必须用其它工具处理,如刷子和簸箕、夹子或镊子。盛污染的针头、锐器、碎玻璃的容器在倒掉前,应按照地方、州、联邦的规定进行消毒。412112从三级生物安全柜和BS L4实验室转移的活的或完整的生物材料应转入不易破碎的、密封的第一级容器中,然后由不易破碎的、密封的第二级容器包裹。通过专用的杀菌浸泡罐、烟熏消毒舱、或气塞转移出设施。412113除了需要保持活性或完整状态的生物材料外,除非在离开实验室前高压杀菌或消毒,任何材料不得转移出BS L4实验室。可能被高温或蒸汽毁坏酶设备和材料

36、,可通过气体或烟雾的方法在专用气塞或舱中消毒。412114在有关传染源的工作结束后、尤其是传染源洒出或溅出后、或受到其他传染源污染后,实验室设备应当进行日常消毒。设备送去维修或保养前应消毒。412115洒出的传染源需由适当的专业人员、或由经过适当培训且配有装备的处理高浓度传染源的人员进行处理、清洗。在实验室内,制定并公布可能造成溅洒的实验程序。412116建立一个体系,报告实验事故、暴露员工长期旷工以及潜在的和实验室相关的疾病的医疗监督,做好并保存书面记录。和报告监督体系关系重大的是,得到检疫、隔离和对潜在或已知患实验室相关疾病的人员进行治疗的设施。412117和所进行的实验工作无关的材料(如

37、,植物、动物和衣服不允许带入设施。413安全设备(第一道屏障设施内的所有程序都在三级生物安全柜中进行,或者穿装备生命支持系统的一体的正压个人防护服、在二级生物安全柜中进行。414实验室设施(第二道屏障ES L4实验室有两种模型:生物安全柜实验室,所有的病源处理均在三级生物安全柜中进行;防护服实验室,实验人员穿防护服。也可以在同一设施中,两种模型结合。若结合使用,每种模型必须符合该模型的所有要求。41411生物安全柜实验室4141111BS L4实验室为独立的建筑物或建筑物内有明确界线的独立区。设施内的房间作如下安排,至少通过两道门后,才进入有三级生物安全柜的房间(生物安全柜室。供进出生物安全柜

38、室用的外内更衣间通过淋浴室隔开。不能通过更衣间进入生物安全柜室的材料、用品、设备,可通过设有双门高压锅、浸泡缸、烟熏消毒舱、或通气间的遏制屏障处(用于消毒进入。4141112实验开始前,每天检查所有的控制参数(如,气流方向和生命支持系统,保证实验室按照其运转参数运转。4141113生物安全柜室和内更衣间的墙面、地面、天花板建成密封的内壳,以便于烟熏、防止动物和昆虫进出。地板整体密封、覆盖。内壳的内表面耐液体和化学试剂,便于该区域清洁和消毒。有关结构和表面的所有裂缝均密封。进入生物安全柜室和内更衣间的门框尽量小、能密封,便于消毒。生物安全柜室地板上的任何排水管直接通入废液消毒系统中。下水道开口和

39、其他管道含有HEPA过滤器,防止动物。4141114实验台表面一体或密封,防水、耐热、耐有机溶剂、耐酸碱和用于工作台面及设施消毒的其他化学物质。4141115实验室的操作台开口结构简单,能承受预期的重量并符合使用要求。实验台、安全柜以及设备之间的空间应便于打扫、消毒。实验室使用的椅子及其它器具,应覆盖易于消毒的非织物。4141116有免接触式或全自动操作的洗手池,洗手池应安装在生物安全柜室和外内更衣间的门附近。4141117若有中央真空系统,生物安全柜室外的区域不需要抽真空。在线的HEPA过滤器应安装在离使用点和供应阀尽可能近的地方。过滤器的安装要便于就地消毒和更换。生物安全柜室的其他液体和气

40、体供应系统,应有防回流装置保护。4141118若有喷水池,应设在实验室外的走道里,自动或脚动操作。喷水池的供水系统和实验室区域的供水系统分开,设防回流保护器。4141119进入实验室的门可自动关闭,并且可锁。41411110任何窗户不会打破,并密封。41411111对于传递出三级生物安全柜和生物安全柜室的需要消毒的物料,备有双门高压锅。向遏制屏障外开口的高压锅必须密封在遏制屏障的墙上。高压锅门自动控制,使得向外的门只有在高压灭菌过程完成后,才能打开。41411112具备通过浸泡缸、烟熏消毒舱消毒、或类似的消毒手段,使得不能在高压锅中消毒的物料和设备,能安全地从三级生物安全柜和生物安全柜室中转出

41、。41411113污染的内更衣间(包括厕所和生物安全柜室中的洗手池、地面排水管(若使用、高压舱、其他来源的液流,通过可行的方法消毒(最好是热处理后,才能排入污水管中。来自淋浴室、无污染厕所的液流,可不经过处理而排入污水管中。用于废液消毒的程序,必须在物理上和生物上均有效。41411114设有明确的非循环的通风系统,平衡系统的供风和排风装置,保证气流方向从小危险区到潜在的大危险区。能对相邻区之间各自的气压/气流方向监视并报警,以指明系统故障。在无污染的更衣间入口处设有适当的气压可视监视装置,表明、证实各生物安全柜室的气压。监视供气和排气装置气流,H VAC控制系统可避免实验室持续正向增压。三级生

42、物安全柜应直接接入排气系统。若三级安全柜和供气系统相连,应避免安全柜正向增压。41411115生物安全柜室、内更衣间、通气间的供气和排气通过HEPA过滤器。在空气入口处进气,从所用空间排气。HEPA过滤器离供应源应尽可能近,以减少可能污染的管道长度。所有HEPA过滤器需要每年测试和确证。HEPA过滤器装置,应适于过滤器取下前就地消毒,或可将过滤器转入密封、不漏气的一级容器中,然后消毒或焚毁。HEPA 过滤器装置的设计应适于过滤器的安装、起作用。使用预先确证的HEPA过滤器是有利的。排气HEPA过滤器的使用寿命,可以因对供气适当预过滤而延长。41411116BS L4设施的设计和操作程序必须文件

43、化。设施必须经过测试以确证设计和操作参数在系统运转前已达到要求。因操作经验,会修改操作程序,所以设施必须每年确证。41411117实验室和外部应有适当的通讯系统(如,传声器、传真、计算机。41412防护服实验室4141211BS L4实验室为独立的建筑物或建筑物内有明确界线的独立区。设施内的房间作如下安排,通过更衣区和消毒区,进入开展有关BS L4病源工作的房间(防护服实验室。供进出防护服实验室用的外内更衣间通过淋浴室隔开。在设施内保持一个特殊设计的防护服区,为实验人员提供类似于三级生物安全柜的保护。进入该区的人员,穿一体正压防护服,防护服装备生命支持系统,通过HEPA过滤供应空气。生命支持系

44、统包括充足的呼吸空气压缩罐、报警器、紧急备用呼吸空气罐。通过装于空气密封门上的气塞进入该区。工作人员离开该区前,用消毒剂淋浴对防护服表面消毒。可自动启动应急供电,至少保证排气系统、生命支持系统、报警、灯光、进出控制和生物安全柜运转。对于周围实验室;防护服内的气压是正的。相对于相邻区域,防护服区内的气压是负的。备有应急光源和通讯系统。防护服实验区、消毒剂淋浴区、气塞的内壳的所有缝隙都密封。4141212实验开始前,每天检查所有的控制参数(如,气流方向、消毒剂淋浴和生命支持系统,保证实验室按照其运转参数运转。4141213对于传递出防护服实验室的需要消毒的废料,可使用遏制屏障上的双门高压锅。向防护

45、服实验区外面开的高压锅门,必须密封在防护服实验区的外墙上,门自动控制,使得外面的门只有在高压灭菌过程完成后,才能打开。配备用于消毒的浸泡缸、烟熏消毒舱、或通气气塞,以传入不能通过更衣间进入防护服区的物料、用品、设备。这些装置也可用于不能高压消毒的物料、用品、设备从实验室安全传出。4141214防护服区的墙面、地面、天花板建成密封的内壳,以便于烟熏、防止动物和昆虫。内壳的内表面耐液体和化学试剂,便于该区域清洁和消毒。有关结构及表面的所有的裂缝均密封。防护服区地板上的排水管设有存水弯,内有对目标病源显效的化学消毒剂,并和废液消毒系统直接相连。下水道开口和其他管道合有HEPA过滤器。4141215防

46、护服区的内部设施配件,如灯固定器、通气管道、公用管道的安装,应尽量减少水平表面积。4141216实验台表面;体,防水、耐热、耐有机溶剂、耐酸碱和用于工作台面及设备消毒的化学物质。4141217实验室的操作台开口结构简单,能承受预期的重量并符合使用要求。实验台、安全柜以及设备之间的空间应便于清洁、消毒。实验室使用的椅子及其它器具,应覆盖易于消毒的非织物。4141218防护服区设有免接触式或全自动操作的洗手池。应风险评估要求,外内更衣间应有洗手池。4141219若有中央真空系统,防护服区外的区域不需要抽真空。在线的HEPA过滤器应安装在离使用点和供应阀尽可能近的地方。过滤器的安装要便于就地消毒和更

47、换。防护服区其他液体和气体供应系统,应有防回流装置。41412110进入实验室的门可自动关闭,并且可锁。消毒剂淋浴室的内外门和气塞的内外门互锁,防止两房间的门同时打开。41412111任何窗户不会打破,并密封。41412112洗手池、地面排水管(若使用、高压舱、和遏制屏障内其他来源的液流,通过可行的方法消毒(最好是热处理后,才能排入污水管中。来自淋浴室、厕所的液流,可不经过处理而排入污水管中。用于废液消毒的程序,必须在物理上和生物上均有效。41412113设有明确的非循环的通风系统,平衡系统的供风和排风装置,保证气流方向从小危险区到潜在的大危险区。建议有备用供气扇,要求有备用排气扇。能对相邻区之间各自的气压/气流方向监视并报警,以指明系统故障。在无污染的更衣间入口处设有适当的气压可视监视装置,表明、证实各防护服区的气压。监视供气和排气装置气流, H VAC控制系统可以避免实验室持续正向增压。41412114防护服区、消毒淋浴间、消毒气塞的供气通过HEPA过滤器。来自防护服区、消毒淋浴间、消毒气塞的普通房间排气,通过两个排列的HEPA过滤器处理,然后向外释放。在空气入口处进气,从所用空间排气。HEPA过滤器离供应源应尽可能近,以减少可能污染的管道长度。所有HEPA过滤器需要每年测试和确证。HEPA过滤器装置,应适于过滤器取下前就地消毒,或可将过滤器