微生物实验课件：实验2 显微镜的使用和细菌形态的观察

1、微生物学实验注意事项： 每次实验前必须对实验内容进行充分预习，以了解实验的目的、原理和方法，做到心中有数，思路清楚； 认真、及时做好实验记录，对于当时不能得到结果而需要连续观察的实验，则需记下每次观察的现象和结果，以便分析； 实验室内应保持整洁，勿高声谈话和随便走动，保持室内安静； 实验时小心仔细，全部操作应严格按规程进行，万一遇有盛菌试管或瓶不慎打破、皮肤破伤或菌液入口等意外发生，应立即报告教师，及时处理，切勿隐瞒； 实验过程中，注意火险。 使用显微生物或其它贵重仪器时，要求细心操作，特别爱护。消耗材料和药品用毕后放回原处。 每次实验完毕，必须把所用的仪器抹净放妥，将实验室收拾整齐，擦净桌面

2、。 每次实验需进行培养的材料，应标明自己的组别及处理方法，放于教师指定的地点进行培养。实验室中的菌种和物品等，未经教师许可，不得携出室外。 每次实验的结果，应以实事求是的科学态度填入报告表中，力求简明准确，认真回答思考题，并及时交教师批阅。 离开实验室前将手洗净，注意关闭火、水、电、门窗等。课前准备 实验大衣 实验记录本、白纸、 绘图工具：铅笔、橡皮、圆规等 部分实验需自备样品 女生请将长发扎起，控制好刘海长度玻璃器皿的清洗、包扎和干热灭菌显微镜的使用及细菌形态的观察细菌涂片制备及染色常用培养基的制备和湿热灭菌细菌的分离、接种和培养霉菌的形态观察酵母菌的形态与计数，放线菌的形态观察细菌生理生化

3、实验质粒DNA转化实验细菌总数的测定大肠菌群的测定酸奶的制做实验报告格式 实验目的 实验原理 实验材料 实验方法过程 实验结果 讨论 思考题实验二、显微镜的使用及细菌形态的观察 实验目的 学习并掌握显微镜的构造及使用方法。 观察细菌形态。 实验材料 菌种：大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、柠檬色葡萄球菌染色片。 显微镜、标本片、香柏油、清洗液、擦镜纸。实验原理 普通光学显微镜是利用目镜和物镜两组透镜系统来放大物像的。由机械部分和光学部分组成。 物镜的焦距、工作距离与虹彩光圈的关系。 油镜的使用。 显微镜的分辫率、放大倍数。显微镜的构造显微镜的构造 1.光学部分光学部分: :目镜目镜 、 物物镜镜 、 照

4、明装置照明装置(聚光镜、聚光镜、 虹彩光圈、虹彩光圈、 反光镜等反光镜等)。它使检视物放大它使检视物放大, ,生成物生成物象。象。2.机械部分机械部分: :镜座、镜臂、镜筒、镜座、镜臂、镜筒、物镜转换器、载物台、载物台物镜转换器、载物台、载物台转移器、粗调节器、细调节器转移器、粗调节器、细调节器等部件等部件. .它起着支持它起着支持 调节调节 固定固定等作用等作用. .图图1-1-2 光学显微镜的成像原理光学显微镜的成像原理倒立的虚像倒立的虚像 显微镜的放大倍数和分辨率显微镜的放大倍数和分辨率 1.放大倍数放大倍数：物镜放大倍数：物镜放大倍数目镜放目镜放大倍数大倍数 2. 显微镜的分辨率显微镜

5、的分辨率:是表示显微镜辨析是表示显微镜辨析两点之间距离的能力。可用公式表示两点之间距离的能力。可用公式表示为：为： D=/2nsin(/2 ) 式中式中D D：物镜分辨出物体两点间的最短距离。物镜分辨出物体两点间的最短距离。 ：可见光的波长（平均可见光的波长（平均0.550.55 m) m) n:n: 物镜和被检标本间介质的折射率。物镜和被检标本间介质的折射率。 ：镜口角（即入射角）。镜口角（即入射角）。D值越小，分辨率越高，看到的物象越清晰值越小，分辨率越高，看到的物象越清晰 油镜使用的原理油镜使用的原理 油镜，即油浸接物镜。当光油镜，即油浸接物镜。当光线由反光镜通过玻片与镜头线由反光镜通过

6、玻片与镜头之间的空气时，由于空气与之间的空气时，由于空气与玻片的密度不同，使光线受玻片的密度不同，使光线受到曲折，发生散射，降低了到曲折，发生散射，降低了视野的照明度。若中间的介视野的照明度。若中间的介质是一层油（质是一层油（其折射率与玻其折射率与玻片的相近片的相近），则几乎不发生），则几乎不发生折射，增加了视野的进光量，折射，增加了视野的进光量，从而使物象更加清晰。从而使物象更加清晰。u根据公式根据公式D=/2nsin(/2 ) ，增大分母，使得增大分母，使得D值值减小，分辨率增大。减小，分辨率增大。1.不准擅自拆卸显微镜的任何部件不准擅自拆卸显微镜的任何部件, ,以免损坏。以免损坏。2.镜

7、面只能用擦镜纸擦，不能用手指或粗布，镜面只能用擦镜纸擦，不能用手指或粗布，以保证光洁度以保证光洁度3.观察标本时，必须依次用低、中、高倍镜，观察标本时，必须依次用低、中、高倍镜，最后用油镜。当目视接目镜时，特别在使用最后用油镜。当目视接目镜时，特别在使用油镜时，切不可使用粗调节器，以免压碎玻油镜时，切不可使用粗调节器，以免压碎玻片或损伤镜面。片或损伤镜面。4.拿显微镜时，一定要右手拿镜臂，左手托镜拿显微镜时，一定要右手拿镜臂，左手托镜座，不可单手拿，更不可倾斜拿。座，不可单手拿，更不可倾斜拿。5.显微镜应存放在阴凉干燥处，以免镜片滋生显微镜应存放在阴凉干燥处，以免镜片滋生霉菌而腐蚀镜片霉菌而腐蚀镜片。显微镜保养和使用中的注意事项显微镜保养和使用中的注意事项实验步骤1观察前的准备观察前的准备1）显微镜的安置2）光源调节3）目镜调节4）聚光器数值孔径的调节2 2显微观察显微观察物镜的作用“先低倍、后高倍、再油镜”。调焦的规律“由上而下”。勿使物镜镜头碰触玻片，以免引起损坏。3 3显微镜用毕后的处理显微镜用毕后的处理1）清洁油镜镜头2）清洁其它部件3）物镜成“八”字形，载物台下移至最低处。4）放回原处。实验报告实验报告图示所观察的细菌，标明菌名（拉丁文）、放大倍数、菌体形状、颜