蛋白酶-磷酸酶抑制剂

1、精选优质文档-倾情为你奉上常用蛋白酶抑制剂和磷酸酶抑制剂的贮存与工作液浓度来源：原创，转载请注明 发布时间：2009-10-20 查看次数：21     在与蛋白相关的检测中，首先最关键的一步便是蛋白质的提取。蛋白质的提取过程中，我们要经常加和蛋白酶抑制剂以防止蛋白质的降解。另外在磷酸化蛋白的研究过程中，磷酸酶抑制剂也是必不可少的，本文总结了常用的蛋白酶抑制剂PMSF，Leupeptin 亮肽素，Aprotinin抑肽酶，Pepstatin胃蛋白酶抑制剂，EDTA-Na2等以及磷酸酶抑制剂NaF氟化钠，Na3VO4 原矾酸钠 ，BETA-glycerophosph

2、ate 甘油磷酸钠，Na2P2O4 焦磷酸钠等。对这些蛋白酶抑制剂的溶解配制，贮存液与工作液浓度，保存都做了详细的说明。 蛋白酶抑制剂PMSF：特性：丝氨酸蛋白酶抑制剂，如胰凝乳蛋白酶，胰蛋白酶和凝血酶，也抑制半胱氨酸蛋白酶如木瓜蛋白酶（可逆的地面处理）。 溶解性：溶于异丙醇，乙醇，甲醇和丙二醇果>10mg/ml。在水溶液中不稳定。在100%异丙醇， +25时稳定至少9个月分子量：174.2使用：贮存浓度：200mM，工作浓度：1mMLeupeptin 亮肽素特性：抑制丝氨酸和半胱氨酸蛋白酶如胰蛋白酶，木瓜蛋白酶，纤溶酶，和组织蛋白酶B溶解性：高度溶于水（1mg/ml）。4一周

3、稳定,分成小份冷冻在-20至少6个月分子量：C20H38N6O4 x 1/2 H2SO4:475.6C20H38N6O4 x 1/2 H2SO4 x H2O:493.6使用：贮存浓度：1mg/ml，工作浓度0.5 ug/ml (1mM)Aprotinin抑肽酶特性：丝氨酸蛋白酶抑制剂，抑制纤维蛋白溶酶， 激肽释放酶，胰蛋白酶，糜蛋白酶的高活性。不抑制凝血酶或因子X。溶解性：易溶于水（10mg/ml）或缓冲液（例如，tris，0.1M，pH8.0）。pH约7-8的溶液在4可保存1周，分装保存在-20可至少保存6个月。避免反复冻融, pH>12.8的碱性环境可使其灭活。分子量：6,512使用

4、：贮存浓度:1mg/ml, 工作浓度：0.062.0 ug/ml(0.010.3 uM)Pepstatin胃蛋白酶抑制剂特性：抑制天冬氨酸（酸）蛋白酶如胃蛋白酶，肾素，组织蛋白酶D，凝乳酶， 许多微生物酸性蛋白酶溶解性：溶于甲醇约1mg/ml； 可溶于乙醇，过夜溶解可达到1 mg/ml；在6当量乙酸中溶解度为300ug/ml。4稳定一周，分装储存于-20时可保存1个月分子量： 685.9使用：贮存浓度：1mg/ml，使用浓度：0.7 g/ml(1 M)EDTA-Na2特性：金属蛋白酶抑制剂溶解性：溶于水至0.5M，在pH8-9的条件下，4稳定至少6个月分子量: 372.24使用：工作浓度：0.

5、20.5 mg/ml(0.51.3 mM)，不需现用现配，在溶液pH值调至8-9时再加入。磷酸酶抑制剂NaF氟化钠 溶解性：溶于水分子量： 41.99使用： 贮存液：5M 工作浓度：10-20mMNa3VO4 原矾酸钠 分子量：183.91溶解性：溶于水，我们购买过来的是原矾酸钠.原矾酸钠需要经过处理以后才能成为激活的矾酸钠,激活的矾酸钠才具有抑制去磷酸化的作用.原矾酸钠变成激活的矾酸钠的过程是:100mM原矾酸钠激活储存液配制(1).取0.183克的原矾酸钠溶解于10ml的双蒸水中,加酸调节PH至10(颜色变黄)(2).煮至无色(3).室温冷却(4).重调PH至10(5)重复（）（）（）（）直至溶液保持无色，并且稳定于10,分装100ul/管,每10ml裂解液加一管.(终浓度为1mM),-20度保存.使用： 贮存液：100mM 工作浓度：1mMBETA-glycerophosphate 甘油磷酸钠溶解性：溶于水分子量：3