感染性疾病的实验诊断

1、精选ppt第八章 感染性疾病的实验诊断精选ppt第六节 肝炎病毒感染标志物的检测 目前已经发现的病毒性肝炎主要有5 型，即甲型（HA）、乙型（HB）、丙型（HC）、丁型（HD）和戊型（HE），它们分别由甲型、乙型、丙型、丁型和戊型肝炎病毒引起。一般实验室可通过检查相关病毒的血清标志物来获取肝炎病毒的感染和转归情况。由于肝炎标志物的种类较多，选择时应结合流行病学特点和临床特点。精选ppt各种类型的肝炎病毒的传播途径消消化化道道传传播，播，引引起起急急性性肝肝炎，炎，不不转转为为慢慢性性肝肝炎炎或或慢慢性性携携带带者。者。 乙乙型型与与丙丙型型肝肝炎炎病病毒毒主主要要由由输输血、血、血血制制品品或

2、或注注射射器器污污染染而而传传播，播，除除引引起起急急性性肝肝炎炎外，外，可可致致慢慢性性肝肝炎，炎，并并与与肝肝硬硬化化及及肝肝癌癌相相关。关。 丁丁型型肝肝炎炎病病毒毒为为一一种种缺缺陷陷病病毒，毒，必必须须在在乙乙型型肝肝炎炎病病毒毒的的存存在在下下才才能能复复制。制。一、甲型肝炎病毒Hepatitis A virus, HAV小小RNA病毒科病毒科 肝肝RNA病毒属病毒属精选ppt 1、标本采集 血清：采集到急性期和恢复期的血清。 粪便：发病前2周内或出现症状后几天采集。 2、参考范围 抗HAV-IgM、抗HAV-IgA：阴性。 HAV抗原：阴性。 HAV-RNA：阴性。 3、检测方法

3、：抗原和抗体的检测用ELISA。 HAV-RNA的检测用PCR。精选ppt 4、临床意义（1）抗 HAV-IgM阳性率在发病后2周最高，约6个月后转为阴性，抗 HAV-IgM阳性说明机体正在感染HAV，它是早期诊断甲肝的特异性指标。（2）抗HAV-IgG阳性提示既往感染，可作为流行病学调查的指标。（3）HAV-RNA阳性对诊断HAV感染具有特异性。精选ppt精选ppt二、乙型肝炎病毒HBV属属 嗜肝嗜肝DNA病毒科病毒科(Hepadnaviridae)土拨鼠肝炎病毒（土拨鼠肝炎病毒（WHV）地松鼠肝炎病毒地松鼠肝炎病毒 (GSHV)鸭乙型肝炎病毒（鸭乙型肝炎病毒（DHBV）苍鹭乙型肝炎病毒（苍

4、鹭乙型肝炎病毒（HHBV） HBV的发现源于表面抗原的研究。的发现源于表面抗原的研究。 1963年年Blumberg首先在澳大利亚土著人血清中发现一首先在澳大利亚土著人血清中发现一种新抗原，称为澳大利亚抗原（种新抗原，称为澳大利亚抗原（Australia antigen）；直至）；直至1968年确定这种抗原与血清型年确定这种抗原与血清型肝炎密切相关，称为肝炎相关抗原（肝炎密切相关，称为肝炎相关抗原（hepatitis associated antigen，HAA）；）；1970年年D.S. Dane在肝炎患者血清中发现具有传染性的颗粒，在肝炎患者血清中发现具有传染性的颗粒，即即Dane颗粒（颗

5、粒（Danes particle）。从而）。从而HBV被确被确认。认。 HBV是是乙型肝炎乙型肝炎病原体，主要经输血、注射、病原体，主要经输血、注射、性行为和母婴传播。起病徐缓，部分患者可转为性行为和母婴传播。起病徐缓，部分患者可转为慢性，少数还可导致肝硬化和肝癌。慢性，少数还可导致肝硬化和肝癌。精选ppt HBV HBV形态结构形态结构大球形颗粒大球形颗粒（Dane颗粒）颗粒）小球形颗粒小球形颗粒管形颗粒管形颗粒电镜下的HBV 1、标本采集：血清 2、检测方法：抗原抗体定性用ELISA。 抗原抗体的定量检测用化学发光免疫分析。 核酸分析（HBV-DNA）用PCR。 3、参考范围 HBsAg和

6、和HBeAg和抗和抗HBe、HBV-DNA以及抗以及抗HBcIgM和抗和抗HBcIgG均为阴性，均为阴性， 抗抗HBs阴性或者阴性或者10IUL，注射乙肝疫苗后阳性为，注射乙肝疫苗后阳性为接种成功。接种成功。 乙肝抗原抗体检测乙肝抗原抗体检测HBsAg/抗抗HBsHBeAg/抗抗HBe 抗抗HBc 俗称“二对半” 或“乙肝五项”。 检测“二对半”的目的是判断有无HBV感染及其感染状态如何。 精选ppt 4、临床意义（1）乙型肝炎病毒表面抗原（乙型肝炎病毒表面抗原（HbsAg） HbsAg为为HBV中中Dane颗粒外层的脂蛋白囊膜，其编颗粒外层的脂蛋白囊膜，其编码基因位于码基因位于HBV双链双链

7、DNA的的S区。区。HbsAg在感染后在感染后1- 2个个月出现于血清中，可持续数周数月甚至数年。月出现于血清中，可持续数周数月甚至数年。 慢性乙型肝炎及携带者慢性乙型肝炎及携带者HBsAg 可呈阳性。可呈阳性。 患急性乙肝后患急性乙肝后HBsAg阳性持续阳性持续6个月以上、肝功能异常、个月以上、肝功能异常、HBV-DNA阳阳性者可能发展为慢性乙肝或者肝硬化，应积极治疗。性者可能发展为慢性乙肝或者肝硬化，应积极治疗。 HBsAg无症状持续阳性无症状持续阳性6个月以上或者持续多年，肝功能个月以上或者持续多年，肝功能正常、正常、HBV-DNA阴性者，可进行医学观察，不必治疗。阴性者，可进行医学观察

8、，不必治疗。精选ppt（2）乙肝病毒表面抗体（）乙肝病毒表面抗体（ HBsAb） HBsAb是目前公认的针对是目前公认的针对HBsAg的保护的保护性抗体，性抗体， 它对它对HBsAg有一定的中和作用，是机体具有免有一定的中和作用，是机体具有免疫力的标志。疫力的标志。 【临床意义】【临床意义】 阳性见于阳性见于既往感染过既往感染过HBV，现已恢复，现已恢复，阳性可持续阳性可持续 多年。多年。注射过乙肝疫苗或者注射过乙肝疫苗或者HBsAb免疫球蛋白者。免疫球蛋白者。精选ppt （3）乙肝病毒）乙肝病毒e抗原（抗原（HBeAg) HBeAg是是HBV核心颗粒中的一种可溶核心颗粒中的一种可溶性蛋白质，

9、具有抗原性。性蛋白质，具有抗原性。 【临床意义】【临床意义】 HBeAg阳性表明乙肝病毒处于复制期，阳性表明乙肝病毒处于复制期，具有较强的传染性。具有较强的传染性。如患者如患者HBeAg持续阳持续阳性，表明肝细胞损害较重，可发展为慢性性，表明肝细胞损害较重，可发展为慢性乙型肝炎或者肝硬化，孕妇则可以引起垂乙型肝炎或者肝硬化，孕妇则可以引起垂直传播给新生儿。直传播给新生儿。精选ppt （4）乙肝病毒）乙肝病毒e抗体（抗体（HBeAb) HBeAb是乙肝患者或者携带者经是乙肝患者或者携带者经HBeAg刺激后产生的一种特异性抗体，继刺激后产生的一种特异性抗体，继HBsAb后出现于血液中，后出现于血液

10、中，未具有保护性未具有保护性。 HBeAb阳性表示大部分乙肝病毒被消除，病毒复制减少，传染性减低。一些慢性乙型肝炎、肝硬化、肝癌患者可阳性。精选ppt （5）乙肝病毒核心抗体（）乙肝病毒核心抗体（HBcAb) HBcAb有有IgM、IgG、IgA三种，一般三种，一般实验室通常检测抗实验室通常检测抗HBc总抗体和总抗体和IgM类抗体。类抗体。 抗HBc总抗体对机体无保护作用，阳性可持续数年甚至终生，见于急、慢性乙肝，肝癌病人及部分HBsAg阴性者。 抗HBc-IgM抗体阳性是HBV近期感染的敏感指标，也是HBV在体内持续复制的指标，提示病人有传染性，抗HBc-IgM抗体阴转，提示乙肝逐渐恢复。精

11、选ppt（6）HBV血清学标志物检测常见结果的解释精选ppt三、丙型肝炎病毒 丙型肝炎病毒（丙型肝炎病毒（Hepatitis C virus，HCV）引起丙型肝炎。引起丙型肝炎。 HCV主要经血或血制品传播，目前占输主要经血或血制品传播，目前占输血后肝炎的血后肝炎的80%90%。在我国丙型肝炎。在我国丙型肝炎流行率为流行率为2.1%。其临床和流行病学特点类。其临床和流行病学特点类似乙型肝炎，但症状较轻，演变为慢性者似乙型肝炎，但症状较轻，演变为慢性者多见，部分患者可发展为肝硬化或肝癌。多见，部分患者可发展为肝硬化或肝癌。 精选ppt 目前对目前对HCV尚不能通过血清分型，而根据尚不能通过血清分

12、型，而根据基因序列同源性及亲缘关系分析可将世界基因序列同源性及亲缘关系分析可将世界各地分离到的毒株分为各地分离到的毒株分为型型6个基因型，个基因型，每个型又可分为亚型每个型又可分为亚型 (a、b、c表示表示)。欧美。欧美流行株多为流行株多为型，而亚洲和我国流行的多型，而亚洲和我国流行的多为为型。型。精选ppt 1、标本采集：血清 2、检测方法 抗体检测用ELISA或者化学发光免疫分析。 HCV-RNA检测用PCR。 3、参考范围：HCV抗体为阴性， HCV-RNA阴性。HCV的形态结构精选ppt 4、临床意义 1、抗 HCV-IgM阳性见于急性HCV感染，具传染性，约6个月后转为阴性，否则容易

13、转为慢性丙型肝炎； 2、抗HCV-IgG阳性提示既往感染； 3、在疾病早期如果HCV抗体阴性，可做HCV-RNA检测，以排除HCV感染。精选ppt四、丁肝病毒 HDV是一种缺陷病毒，必须是一种缺陷病毒，必须依赖嗜肝依赖嗜肝DNA病毒才能复制。病毒才能复制。由由HBsAg构成其外壳构成其外壳 HDV定位于肝细胞核内，在血液中由定位于肝细胞核内，在血液中由HBsAg包被，形成包被，形成35-37nm颗粒颗粒 单负链环状单负链环状RNAHDV的结构的结构精选ppt 丁肝特点 精选ppt五、戊型肝炎病毒 1989年在美国夏威夷召开的国际肝癌会上，年在美国夏威夷召开的国际肝癌会上，将肠道传播的非甲非乙型

14、肝炎病毒正式命将肠道传播的非甲非乙型肝炎病毒正式命名为名为戊型肝炎病毒（戊型肝炎病毒（hepatitis E virus, HEV），是戊型肝炎（，是戊型肝炎（hepatitis E，HE）的病原体。的病原体。 戊型肝炎主要经粪口途径传播常引起戊型肝炎主要经粪口途径传播常引起大流行，其临床和流行病学特点类似甲型大流行，其临床和流行病学特点类似甲型肝炎。肝炎。精选ppt项目甲型肝炎乙型肝炎丙型肝炎丁型肝炎戊型肝炎病毒HAVHBVHCVHDVHEV病毒分类小RNA病毒嗜肝DNA病毒黄病毒（缺陷病毒）原为杯状病毒病毒大小27nm42nm3060nm40nm2734nm基因组ss RNA（+） 7.5

15、kbdsDNA 3,2kbssRNA(+) 10kbssRNA(-) 1.7kbssRNA(+) 7.5kb抗原HAVAg （VP14）HBsAg HBcAg HBeAgHCVAgHDVAgHEVAg传播途径肠道传播母婴、血液及性传播多数血液传播血液及性传播肠道传播潜伏期(范围）25天（1545天）75天（40120天）50天（1590天）50天（2575天）40天（2030天）慢性化无310%4070%70%无暴发性肝炎0.2%0.2%0.2%220%0.210%精选ppt第七节 性传播疾病（STD）的实验诊断精选ppt性传播疾病性传播疾病(STD) (STD) 传统性病传统性病- -通过性

16、交传染通过性交传染- -主要病变发生在外生主要病变发生在外生殖器殖器-梅毒梅毒-淋病淋病-软下疳软下疳-性病性淋巴肉芽肿性病性淋巴肉芽肿-腹股沟肉芽肿腹股沟肉芽肿现代性病现代性病- -各种性接触各种性接触- -主要病变发生在外生殖器及非生主要病变发生在外生殖器及非生殖殖器部位器部位-20-20余种余种-AIDS AIDS -非淋菌尿道炎非淋菌尿道炎-尖锐湿疣尖锐湿疣-生殖器疱疹生殖器疱疹-念珠菌病念珠菌病-滴虫滴虫-巨细胞病毒感染巨细胞病毒感染-疥疮疥疮-阴虱阴虱 -乙肝乙肝 精选ppt概概 况况 每年新发每年新发3.43.4亿亿 位居传染病第位居传染病第3 3位位 梅毒增长梅毒增长 艾滋病扩

17、大艾滋病扩大 严峻考验严峻考验 社会问题社会问题精选ppt一 梅毒 是由梅毒螺旋体感染引起的一种慢性全身是由梅毒螺旋体感染引起的一种慢性全身性性传播疾病性性传播疾病 主要通过性交或从母体通过胎盘传入主要通过性交或从母体通过胎盘传入 侵犯多系统多脏器侵犯多系统多脏器 重点防治重点防治STD之一之一二期梅毒二期梅毒精选ppt 梅毒分期梅毒分期 根据传播途径根据传播途径-获得性获得性-胎传胎传 根据病期根据病期 (2年或年或2岁为界岁为界) -早期早期(一期一期,二期二期) -晚期晚期(三期三期)一期梅毒一期梅毒精选ppt 1、标本采集 （1）病灶渗出物：用以电镜观察及荧光抗体染色。 （2）血清、脑

18、脊液：用于抗体检测。 2、检测方法：显微镜检查、血清学实验、PCR。三期梅毒三期梅毒精选ppt 3、临床意义 （1）显微镜检查：显微镜检查： 暗视野显微镜检查 是诊断早期梅毒唯一可靠的实验室方法，特别是血清学反应阴性者，镜检阳性有确诊意义。 直接免疫荧光检查 弥补了暗视野显微镜法的缺点，可用于口腔病灶的检查。 镀银染色法 梅毒螺旋体染成棕黑色，背景染成淡棕色。 早期先天梅毒精选ppt （2）血清学实验血清学实验 是诊断梅毒的主要方是诊断梅毒的主要方法分为两大类法分为两大类 ： 非梅毒螺旋体抗原血清试验 （筛选实验） 性病研究实验室试验（VDRL） ：主要用于脑脊液的检测，因抗原制备复杂，已少用

19、。 不加热血清反应素试验（USR）：为VDRL的改良方法 快速血浆反应素环状卡片试验（RPR）：胶体炭作为指示剂（常用） 甲苯胺红不加热血清试验（TRUST）：甲苯胺红作为指示剂（常用）精选ppt 梅毒螺旋体抗原血清试验 以梅毒螺旋体膜蛋白为抗原，检测梅毒IgG和IgM抗体。（确诊实验） 荧光梅毒螺旋体抗体吸收试验（FTA-ABS）：是一种间接免疫荧光法，被认为是检测梅毒的金标准。 梅毒螺旋体血凝试验（TPHA）和梅毒螺旋体明胶凝聚实验（TPPA）。 PCRPCR：是最为理想的梅毒初筛方法。它可以最大限度的检出各期梅毒。同时保证了敏感性和特异性。 精选ppt 常见的实验室检查为初筛实验+确诊实

20、验同时检测。如TRUST+TPHA检测。结果意义如下：1、TRUST-,TPPA- 可基本排除梅毒。极早期梅毒（无任何抗梅毒抗体产生）。极晚期梅毒。艾滋病病人合并梅毒感染。 2、TRUST+,TPPA+ 现正梅毒，应考虑治疗。3、TRUST-,TPPA+ 极早期梅毒、|晚期梅毒、治愈的早期梅毒（应询问病人是否有既往的梅毒感染和治疗史;若病人否认有既往史）。解释漏检4、TRUST+,TPPA- TRUST 假阳性 精选ppt梅毒螺旋体TPHA试验精选ppt二、获得性免疫缺陷综合征（艾滋病、AIDS）精选ppt什么是艾滋病？什么是艾滋病？ 艾滋病 艾滋病病毒 简称：AIDS简称：HIV AIDS是

21、一种由HIV侵入人体后破坏人体免疫功能，使人体发生多种不可治愈的感染和肿瘤，最后导致感染者死亡的一种严重传染病。精选ppt概概 念念 主要侵犯主要侵犯CD4+TCD4+T淋巴细胞淋巴细胞-机体细胞免疫功能部分或全部丧失机体细胞免疫功能部分或全部丧失-发生条件致病菌感染及恶性肿瘤发生条件致病菌感染及恶性肿瘤精选ppt艾滋病离我们并不遥远 存活感染者存活感染者 自己知道自己知道 自己不知道自己不知道全球：全球： 38003800万万 800800万万 30003000万万中国：中国： 8484万万 6 6万万 7878万万哇！有这么多人哇！有这么多人不知道自己感染。不知道自己感染。我是否我是否.

22、.你呢你呢? ?我国有我国有94%的感染的感染者处于无关怀、无者处于无关怀、无指导的状态，成为指导的状态，成为活跃的传染源。活跃的传染源。精选ppt艾滋病艾滋病的发现的发现精选pptAIDSAIDS全球流行情况全球流行情况 近近2020年年AIDSAIDS全球流行全球流行 20032003年底艾滋病感染者及年底艾滋病感染者及AIDSAIDS存活者存活者 40004000万，其万，其中新感染中新感染500500万万( (儿童儿童7070万万) ) 2007200732003200万万 大多数在发展中国家大多数在发展中国家-AIDS-AIDS全球流行形式严峻全球流行形式严峻-医学问题医学问题-社会

23、问题社会问题精选ppt艾滋病流行已成为全球第四位死亡原因艾滋病流行已成为全球第四位死亡原因精选pptAIDSAIDS中国流行情况中国流行情况 我国我国8585年第一例年第一例 20012001，9 9，HIV/AIDSHIV/AIDS2813328133例，死例，死641641例例 20032003年底艾滋病感染者及年底艾滋病感染者及AIDS AIDS 已达到已达到8585万万 2007-2007- AIDSAIDS中国流行形式严峻中国流行形式严峻 快速增长期及艾滋病期快速增长期及艾滋病期精选ppt MSM 同性同性恋恋Drug Users 吸毒者吸毒者Sex workers性工作者性工作者G

24、eneral Population 一般人群一般人群Family家庭家庭Children儿童儿童Source Population 源头人群源头人群Bridge Population 桥梁人群桥梁人群传播模式传播模式由高危人群开始，传播到一般人群由高危人群开始，传播到一般人群全球共同模式全球共同模式精选ppt口腔毛状粘膜白斑口腔毛状粘膜白斑脂溢性皮脂溢性皮炎炎卡波西肉瘤（卡波西肉瘤（KS）肺部卡氏肺曩虫肺炎肺部卡氏肺曩虫肺炎精选ppt诊断诊断 流行病学流行病学 临床表现临床表现 病原体实验室检查病原体实验室检查-HIV-HIV病毒分离培养病毒分离培养-抗体检测抗体检测-抗原抗原-病毒核酸（病毒

25、核酸（PCRPCR） 免疫缺陷实验室检查免疫缺陷实验室检查-外周血淋巴细胞或外周血淋巴细胞或CD4+CD4+细细胞计数胞计数( (小于小于0.20.210109 9/L)/L)精选ppt诊断诊断 HIVHIV感染感染-初筛及确证试验阳性初筛及确证试验阳性 AIDSAIDS-HIV-HIV抗体（抗体（+ +）加下述一项）加下述一项确诊确诊-减重减重10%+10%+发热一月发热一月 或减重或减重10%+10%+腹泻腹泻 或明显霉菌及其它致病菌或明显霉菌及其它致病菌感染感染 或卡氏肺曩虫肺炎或卡氏肺曩虫肺炎 或或KSKS 青年呆痴青年呆痴精选ppt 我国艾滋病病例诊断标准 1、HIV感染者：受检血清

26、初筛试验阳性，确证试验如蛋白印迹法阳性。2、确诊病例：（1）艾滋病病毒抗体阳性，又具有下述任何一项者，可为确诊艾滋病病人。精选ppt近期内（36个月）体重减轻10%以上，且持续发热达38度C1个月以上。近期内（36个月）体重减轻10%以上，且持续腹泻（每日达35次）1个月以上。卡氏肺囊虫性肺炎（PCP）。卡波济肉瘤（Kaposi）。明显的霉菌或其它条件致病菌感染。精选ppt（2）若HIV抗体阳性者体重减轻、发热、腹泻症状接近上述第1项标准且具有以下任何一项时，可为确诊艾滋病病人。CD4 /CD8淋巴细胞计数比值1，CD4细胞计数下降。全身淋巴结肿大。明显的中枢神经系统占位性病变的症状和体征、出现痴呆，辨别能力丧失、或运动神经功能障碍。精选ppt精选ppt三、生殖器疱疹 生殖器疱疹是由单纯疱疹病毒（HSV）引起的生殖器部位感染的一种性病，好发于中青年人，主要通过性接传播，也可通过母婴传播，其它途径传播较为少见。临床上以肛门及外生殖器部位反复发生成群的小水疱为特征。孕妇患病，可通过胎盘或产道将疾病传染给胎儿或新生儿，引起死胎、死产或新生儿疱疹病毒感染等。精选ppt生殖器疱疹主要根据有婚外性接触史或配偶感染史结合临床表现而做出初步诊断。要进一步确诊则需做如下检查 ： 1 1、细胞学检查细胞学检查(Tzank(Tzank涂片涂片) ) 2 2、病毒抗原检测病毒抗原检测 3 3、病毒培