系统性硬化症自身抗体研究进展

1、系统性硬化症自身抗体研究进展系统性硬化症(systemicsclerosis,SSc)是一种以皮肤及多脏器纤维化为突出表现的系统性自身免疫性疾病，目前认为炎症和自身免疫应答，血管病变及纤维化是介导SSc发病的重要环节。免疫细胞活化后释放大量促炎、促纤维化因子，合成自身抗体，参与组织损伤和器官功能障碍。针对细胞内、外靶点的自身抗体可作为SSc血清标志物。超过95%的SSc患者在首次诊断时可检测到自身抗体，并与疾病亚型，皮肤病变，内脏受累及预后密切相关。超过90%的SSc患者外周血抗核抗体阳性。而60%80%的SSc患者标志性抗体阳性1,包括抗拓扑异构酶I抗体、抗着丝点抗体和抗RNA聚合酶抗体，三

2、者对SSc诊断具有较高特异性，因而纳入了2013年美国风湿病学会(ACR)/欧洲抗风湿病联盟(EULAR)对SSc的分类标准之中2,并且有助于识别早期或极早期ssC3,4。尽管三种标志性抗体已广泛应用于临床，然而关于抗体功能和临床意义的研究仍不断进展。止匕外，研究发现一系列自身抗体具有功能性序列可参与SSc纤维化和血管病变，如抗血管紧张素II-1型受体和内皮素1受体抗体、抗血小板源性生长因子受体抗体、抗毒蕈碱-3受体抗体等，与SSc临床特征与发病环节密切相关，也为致病机制提供新的见解，而阐明自身抗体介导发病相关通路也有助于寻找潜在治疗靶点。本综述将重点关注SSc相关自身抗体，尤其是新近发现的功

3、能性自身抗体，着重介绍其临床应用价值和潜在致病机制。1抗拓扑异构酶I(TopoisomeraseI/Scl-70抗体抗Scl-70抗体最初在SSc血清中鉴定发现，因其可与70kDa核抗原反应而得名。后来人们认识到全长自身抗原是拓扑异构酶I(TopoisomeraseI,topoI,而70kDa蛋白是天然全长100kDa蛋白分解产物。虽然抗Scl-70的术语仍在使用，但更准确的命名应为抗topoI抗体。抗topoI抗体在SSc中报道的阳性率为9.4%42%,最常见的是IgG亚型，IgA和IgM亚型亦可见。尽管抗topoI抗体对SSc高度特异，但研究报道也可见于SLE5,然而血清识别抗原表位有所不

4、同。抗topoII抗体并非SSc所特异，可见于其他免疫相关疾病，如局灶性硬皮病，特发性肺纤维化，SLE和幼年型类风关等。抗topoI抗体被认为与弥漫性皮肤型（diffusecutaneousSSc,dcSSC高度相关，但也可见于局限性皮肤型（localizedcutaneousSSc,IcSSc患者。抗topoI抗体强烈提示不良预后，病死率增高，与间质性肺病高度相关。另有报道抗topoI抗体与骨骼肌和心肌受累，手指挛缩畸形，及蛋白尿相关6。而抗topoI抗体与月中瘤间的关联仍存在争议。目前研究认为内皮细胞破坏释放拓扑异构酶，或翻译后修饰如乙酰化水平增高7,8,最终导致抗原释放，免疫耐受失衡，机

5、体产生抗topoI抗体。研究支持抗topoI抗体可能是SSc的致病性抗体，而非单纯的伴随抗体：1）使用topoI抗原联合佐剂免疫小鼠可诱导抗topoI抗体产生，导致皮肤和肺组织的炎症和纤维化病变9;2）抗topoI抗体可作用于SSc皮肤成纤维细胞，促进胶原合成，以及单核细胞募集10;3）topoI抗原抗体免疫复合物可刺激原代人皮肤成纤维细胞上调表达促炎、促纤维化和缩血管因子11。因而抗topoI抗体在SSc发生中具有潜在的致病性，可能在SSc自身免疫应答与纤维化间起桥接”作用，然而具体机制有待深入研究。2 抗着丝点（Centromereprotein,CENP抗体抗CENP抗体在SSc中的检出

6、率为20%40%,CENP-B是一类80kDa的着丝粒蛋白，是与几乎所有抗CENP阳性血清反应的主要抗原，而抗CENP-A抗体比抗CENP-B抗体对SSc更具特异性12,两种亚型具有相似的临床特征13。其他抗CENP亚型也被陆续发现，抗CENP-C抗体与干燥综合征相关，而抗CENP-I抗体可能是自身免疫性肝病的血清标志物。抗CENP抗体与lcSSc密切相关，尤其是CREST综合征（钙质沉着，雷诺现象，食管运动障碍，指硬化和毛细血管扩张）。严重的间质性肺病和肾危象少见13。约20%的抗CENP阳性患者合并肺动脉高压（pulmonaryarterialhypertension,PAH）,约50%该

7、类患者死亡归因于PAH14。抗CENP抗体阳性的孤立性雷诺未来发展为SSc的风险显著升高15,然而合并严重指端溃疡的发生率并未增加13。抗CENP抗体阳性SSc患者较其他标志性抗体阳性患者总体预后相对较佳，死亡率较低16。3 抗RNA聚合酶(RNApolymerase,RNAP)抗体针又tRNAPI和RNAPIII的自身抗体经常共存，且对SSc高度特异。SSc中的阳性率约为20%。然而中国汉族SSc患者中阳性率仅为1.3%,远低于美国高加索人群17.4%,推测与种族基因背景相关17。针又tRNAPII的抗体少见，且并不特异于SSc,可在SLE和重叠综合征患者中检出18。抗RNAPIII抗体在传

8、统以Hep-2细胞为底物的间接免疫荧光中显示为斑点核仁型，但缺乏特异性，常与其他自身抗体同时检出，因而采用酶联免疫吸附测定(Enzymelinkedimmunosorbentassay,ELISA测定可能是优选方法19。抗RNAPI和III抗体与弥漫皮肤型SSc相关，且罹患肾危象的风险更高。值得关注的是，基于EUSTAR队列进行的病例对照研究，结果显示抗RNAPIII抗体除了与肾脏受累、弥漫皮肤亚型、胃窦血管扩张，快速进展的皮肤病变相关外，还与伴随的月中瘤发生(-6+12月)密切相关(OR7.38,95%CI1.61-33.8)20。而JohnsHopkins队列数据也应证了这一结果，抗RNA

9、PIII抗体阳性患者中3年月中瘤标化发病比为2.84(95%CI1.894.10),而乳腺癌和肺癌分列抗RNAPIII抗体阳性的dcSSc和lcSSc患者之首21。因而对于抗RNAPIII抗体阳性的SSc患者而言，除需密切随访肾脏病变外，还应加强月中瘤筛查。4抗血管紧张素II-1型受体(angiotensinIItype1receptor,AT1R)和内皮素1受体(endothelin-1typeAreceptor,ETAR抗体AT1R和ETAR广泛表达于脉管系统及免疫细胞。针对AT1R和ETAR的抗体可激活相应受体参与多种血管病变，两者高度相关且可发生交叉反应。85%的SSc患者抗AT1R和

10、ETAR的抗体阳性22,与指端溃疡23及PAH24密切相关，也可见于其他结缔组织病合并的PAH,可作为提示预后的血清标志物24。体内实验证实抗AT1R和ETAR抗体可作用于血管内皮细胞导致中性粒细胞黏附及胶原合成25,也可促进内皮细胞和免疫细胞分泌促炎症因子26o体内实验中过继回输抗AT1R和ETAR抗体IgG至小鼠体内，可出现气道血管壁增厚和间质细胞浸润24,从而提示了抗AT1R和ETAR抗体在SSc血管病变中的致病性。5 抗血小板源性生长因子受体(Platelet-derivedgrowthfactorreceptor,PDGFR抗体PDGF通过作用于成纤维细胞或平滑肌细胞受体PDGFR,

11、诱导活性氧(reactiveoxygenspecies,ROS产生，促进胶原合成。有研究将来自SSc患者的生物工程皮肤移植至免疫缺陷小鼠，同时输注针对PDGFR的刺激性抗体，证实这一抗体可促进并维系SSc皮肤纤维化病变27。止匕外，抗PDGFR抗体可诱导人肺血管平滑肌细胞的增殖和迁移，可能参与SSc血管病变28。有研究报道SSc来源的抗PDGFR抗体发挥激活作用参与发病，虽然健康对照、SLE和原发性雷诺患者外周血中均可检出抗PDGFR抗体，然而并不能发挥类似效应29,推测可能是天然存在的抗体，其作用表位与致病性抗体有所不同。已有研究通过区分刺激性和非刺激性抗PDGFR抗体结合的抗原表位，绘制功

12、能性表位图谱，从而推动临床应用30o6 抗毒蕈碱-3受体(Muscarinic-3receptor,M3R)抗体包括胃食管反流在内的消化道病变是SSc患者常见且突出的临床表现，既往认为食管蠕动障碍，平滑肌萎缩，胶原沉积和纤维化是引起胃食管反流的重要原因，而Goldblatt等发现来自SSc患者的IgG可特异性阻断肠肌层中的毒蕈碱-3受体对胆碱的应答，并与SSc消化道症状密切相关31o进一步发现来自SSc的自身抗体首先阻断神经节胆碱能神经传递引起神经病变，随着疾病进展，可改变平滑肌细胞膜上乙酰胆碱功能引起肌肉病变。抗M3R抗体主要作用于靶点为M3R的第二胞外段，静脉用丙种球蛋白(Intraven

13、ousgammaglobulin,IVIG)可阻断抗M3R抗体Fab段的特异性作用，包括对神经病变和肌肉病变的双重调控32。抗M3R抗体除了可见于SSc患者，还可见于干燥综合征及重症肌无力患者，但抗M3R抗体阳性的SSc中，64%的患者有营养吸收障碍和/或胃肠道假性梗阻330因而抗M3R抗体的发现有助于加深我们对SSc消化道病变的认识，在临床应用中，不但可以提示消化道合并症，并为IVIG等免疫治疗提供理论依据。7 抗干扰素诱导基因16(Interferon-induciblegene16,IFI16)抗体IFI16是HIN-200家族成员，构成性表达于血管内皮细胞和角质形成细胞，过表达IFI1

14、6可导致血管内皮凋亡和促炎症因子释放340研究发现SSc外周血中存在抗IFI-16抗体，其阳性率在21%25%35,36,IcSSc中更高35,且与肢端溃疡相关37,抗CENP和抗IFI-16抗体双阳性性患者的肢端血管事件风险增加。目前研究推测抗IFI-16抗体作用于内皮细胞特异性抗原，参与SSc血管病变38。8 抗RuvBL1和RuvBL2抗体RuvBL1和RuvBL2是ATP酶同源物，参与转录、DNA修复及染色质结构重塑等生理过程39。最近在SSc中发现抗RuvBL1和RuvBL2抗体，其在日本和北美人群中阳性率约为2%,与dcSSc和骨骼肌受累相关40o9 抗真核起始因子-2B(Euka

15、ryoticInitiationFactor-2B,eIF-2B)抗体eIF-2B是一种细胞质多聚体蛋白，参与真核细胞蛋白质合成，帮助tRNA与核糖体结合41。Betteridge等首先在ANA阴性的SSc患者血清中发现此抗体，报道的阳性率为1%7%,临床上与dcSSc和间质性肺病相关阳43。有研究提出抗eIF2B抗体的形成可能与EB病毒分子模拟相关44。小结：SSc经典的特异性抗体如抗拓扑异构酶I抗体、抗着丝点抗体和抗RNA聚合酶抗体虽然已经广泛应用于SSc的诊断分型和预后判断中，然而对于其临床意义和致病机制仍不断在拓展和深入，因而在此温故而知新。此外，一些功能性抗体靶向于SSc重要致病环节

16、，日前也备受关注，抗AT1R和ETAR抗体可促进血管内皮细胞收缩，进而导致内皮细胞凋亡和促炎症因子释放参与血管病变，针对PDGFR抗体可改变氧化应激平衡，促进细胞外基质合成，而针对M3R抗体在消化道病变中发挥重要作用。因此功能性自身抗体不但可提示临床，还有助于揭示潜在发病机制，也为IVIG、B细胞靶向治疗、干细胞移植等免疫调节和重塑策略提供理论依据。最后，新近发现的SSc自身抗体，如抗IFI-16抗体、抗Ruv1/2抗体和抗eIF2B抗体等，与SSc特定临床表型相关，有望应用于临床，然而其潜在作用机制有待深入。参考文献：1 MECOLICA,CASCIOLA-ROSENL.Anupdateon

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