全P含量的测定

1、全P含量的测定-王水酸熔铝睇抗比色法土壤全磷测定是用强酸高温消化，使不溶性磷酸盐转化为正磷酸状态进入溶液。同时，强酸(王水)是一种强氧化剂，能使土壤中有机质完全分解，使有机磷转化为正磷酸而进入溶液，并使土壤中的二氧化硅脱水沉淀。用水和盐酸溶解熔块，在规定条件下样品溶液与铝睇抗显色剂反应，生成磷铝蓝，用分光光度法定量测定。主要试剂：(1) 5mg/L磷标准溶液：105C下烘2h的KH2PO40.4390g加水消解后，加入5mL浓硫酸，加水定容至1L,即100mg/L母液。取5mL稀释至100mL,即为5mg/L.(2) 2,4-二硝基酚指示剂：溶解0.20g2,4-二硝基酚于100mL95%无水

2、乙醇1(3)铝睇贮存液：126mL浓硫酸加入400mL水中，冷却后另取10g分析纯铝酸俊溶解于60C300mL水中，冷却后，将硫酸溶液缓倒入铝酸溶液中，加100mL0.5%酒石酸睇钾，定容至1000mL,避光贮存。(4)铝睇抗显色剂：称取分析纯抗坏血酸1.5g,溶于100mL铝睇贮存液中，有效期为24ho(5)100g/L碳酸钠溶液：10g无水碳酸钠(GB639)溶于水后，稀释至100mL,摇匀。(6)50mL/L硫酸溶液：吸取5mL浓硫酸(GB625,95.0%98.0%,比重1.84)缓慢加入90mL水中，冷却后加水至100mL0(7)王水：浓盐酸和浓硝酸按3:1配制而成的混合物。(8)浓

3、硝酸溶液(9)浓盐酸溶液(10)1:1盐酸溶液：1体积浓盐酸(一般是38%)与1体积的水混合而配成的盐酸熔样：准确称取风干样品1.0000g,精确到0.0001g,小心放入地竭底部，切勿粘在壁上，将培竭放入高温电炉(马福炉)，550C灰化6h,冷却后加入5mL王水(1份硝酸+3份盐酸)在电热板上低温加热直至蒸干熔液(注意不要太干，恰好干)，然后加5mL1:1的盐酸溶解，过滤于50mL容量瓶中，定容作为待测液。绘制校准曲线分别准确吸取5mg/L磷标准溶液0、2、4、6、8、10mL于50mL容量瓶中，同时加入与显色测定所用的样品溶液等体积的空白溶液二硝基酚指示剂23滴，并用100g/L碳酸钠溶液

4、或50mL/L硫酸溶液调节溶液至刚呈微黄色，准确加入铝睇抗显色剂5mL,摇匀，加水定容，即得含磷量分别为0.0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0mg/L的标准溶液系列。摇匀，于15C以上温度放置30min后，在波长700nm处测定其吸光度，在方格坐标纸上以吸光度为纵坐标，磷浓度为横坐标，绘制校准曲线。测定显色：准确吸取待测样品溶液210mL（含磷0.041.0ug）于50mL容量瓶中，用水稀释至总体积约3/5处，加入二硝基酚指示剂23滴，并用100g/L碳酸钠溶液或50mL/L硫酸溶液调节溶液至刚呈微黄色，准确加入5mL钥睇抗指示剂，摇匀，加水定容，室温15°C以上，放置30m

5、in。比色：显色的样品溶液在分光光度计上，用700nm、1cm光径比色皿，以空白试验为参比液调节仪器为零，进行比色测定，读取吸光度，从校准曲线上查得相应的磷量。结果计算公式如下：全磷（）cvts二6-100m10从校准曲线上查得待测样品溶液中磷的质量浓度显色液体积,、250ts一分取倍数（ts=巴）25烘干样质量全N含量的测定-凯氏半微量定氮法土壤、植株和其它有机体全氮的测定通常都采用凯氏消煮法，用硫酸钾-硫酸铜-硒粉作加速剂。此法虽然消煮时间长，但控制好加速剂的用量，不易导致氮素损失，消化程度容易掌握，测定结果稳定，准确度较高，适用于常规分析。主要仪器和试剂（1）凯氏管（50mL）、全自动凯

6、氏定氮仪、100mL三角瓶（2）浓硫酸（相对密度1.84,优级纯（一级）。（3） 40%NaOH:称取固体氢氧化钠400g,放入硬质烧杯中，加入蒸储水，不断搅拌（防止烧杯底部固结），溶解后，定容至1000mL,转入塑料试剂瓶，加塞，防止吸收空气中的CO2。（4） 2%硼酸溶液：称取20g硼酸（分析纯，二级）用热蒸储水（约60°C）溶解，冷却后稀释至1000mL,每升硼酸溶液中加入甲基红-澳甲酚绿指示齐【J20mL,并用稀酸或稀碱调节至紫红色（pH4.5）。（5）甲基红-澳甲酚绿指示剂：0.099g澳甲酚绿和0.666g甲基红与玛瑙研钵中，加入少量95%乙醇，研磨至指示剂完全溶解为止，

7、最后加95%乙醇至100mL。（6） 0.02mol/LHCL标准溶液：取浓盐酸（比重1.19）1.67mL,用蒸储水稀释至1000mL然后用标准碱或硼砂标定。（7） 混合加速剂：K2SO4:CuSO4:Se=100:10:1即100gSO4（分析纯）、10gCuSO4?5H2。（分析纯）、和1gSe粉混合研磨，通过80号筛充分混匀（注意戴口罩），贮于具塞瓶中。操作步骤（1）土样的消煮称取风干土样约1g,将土样送入干燥的开氏瓶（或消煮管）底部，加入加速剂2g和浓硫酸5mL,摇匀，然后，放到石墨消煮仪上消煮，在温度为380C,消煮2.5h-3h,取出冷却。在消煮土样的同时，做两份空白测定，除不加

8、土样外，其他操作皆与测定土样相同。（2）将消煮过后的凯氏瓶放在全自动凯氏定氮仪上，关闭安全门。将100mL三角瓶放在承接管下。设置模式：蒸储水10mL、硼酸20mL、碱液30mL、时间4m30s、淋洗5mL。确认后开始测定。（3）测定完毕后，取出三角瓶，用标准酸滴定至紫红色。计算公式：1_二V-V0c（-H2SO4）14.010土壤全氮（N）量（g?kg_1）=2父103m式中：V滴定试液时所用酸标准溶液的体积（mL）;V0滴定空白时所用酸标准溶液的体积（mL）;c0.01mol?L-1（1/2H2SO4）或HCl标准溶液浓度；14.0氮原子的摩尔质量（g?mo-1）;10-3将mL换算为L;

9、m烘干土样的质量（g）0两次平行测定结果允许绝对相差：土壤全氮量大于1.0g?kg1时，不得超过0.005%；含氮1.00.6g?kg1时，不得超过0.004%；含氮0.6g?kg1时，不得超过0.003%。土壤有机质的测定一重铭酸钾法-稀释加热方法原理稀释热法（水合热法）是利用浓硫酸和重铭酸钾迅速混合时所产生的热来氧化有机质，以代替外加热法中的油浴加热，操作更加方便。由于产生的热，温度较低，对有机质氧化程度较低，只有77%。剩余的重铭酸钾用硫酸亚铁来滴定，从所消耗的重铭酸钾量，计算有机碳的含量。试齐I（1） 1mol?L-1（1/6K2Cr2O7）溶液。准确称取K2Cr2O7（分析纯，105

10、c烘干）49.04g,溶于水中,稀释至1L。（2） 0.4mol?L-1（1/6K2Cr2O7）的基准溶液。准确称取K2Cr2O7（分析纯）（在130c烘3h）19.6132g于250mL烧杯中，以少量水溶解，将全部洗入1000mL容量瓶中，加入浓H2SO4约70mL,冷却后用水定容至刻度，充分摇匀备用其中含硫酸浓度约为2.5mol?L-1（1/2H2SO4）。（3） 0.5mol?L-1FeSO4溶液。称取FeS。?7H20140g溶于水中，加入浓H2SO415mL,冷却稀释至1L。此溶液的准确浓度以0.4mol?L-1（1/6K2Cr2O7）的基准溶液标定之。即准确分别吸取3份0.4mol

11、?L-1（1/6KzCrzO?）的基准溶液各25mL于150mL三角瓶中，加入邻啡罗咻指示剂23滴，然后用0.5mol?L-1FeSO4溶液滴定至终点，并计算出的准FeSO4确浓度。硫酸亚铁（FeSQ）溶液在空气中易被氧化，需新鲜配制或以标准的K2Cr2O7溶液每天标定之。（4）邻啡罗咻指示剂：称取邻啡罗咻（GB1293-77,分析纯）1.6g与FeFeSQ?7H2O0.7g,溶于100mL水中。操作步骤准确称取0.5000g土壤样品于500mL的三角瓶中，然后准确加入1mol?L-1（1/6K2Cr2O7）溶液10mL于土壤样品中，转动瓶子使之混合均匀，然后加浓H2SO420mL,将三角瓶缓

12、缓转动1min,促使混合以保证试剂与土壤充分作用，并在石棉板上放置约30min,然后加水220mL,力口34滴邻啡罗咻指示剂，用0.5mol?L-1FeSO4标准溶液滴定至近终点时溶液颜色由绿变成暗绿色，逐渐加入FeSQ直至生成砖红色为止。用同样的方法做空白测定（即不加土样）。如果K2Cr2O7被还原的量超过75%,则须用更少的土壤重做。结果计算土壤有机碳（gkg-b=皿一二.；3.0"33'©。烘干土重土壤有机质（gkg-1）二土壤有机碳（gkg-1）>1.724式中：1.33为氧化校正系数；c为0.5molL-1FeSO4标准溶液的浓度;Vo空白滴定用去F

13、eSO4体积（mL）;V样品滴定用去FeSO4体积（mL）;i一一一一，一一1、3.01/4碳原子的摩尔质重（gmol）;10-3将mL换算为L;注释：注1.泥碳称0.05g,土壤有机质含量低于10gkg-1者称2.0g土壤微生物生物有机碳、氮含量微生物有机碳、氮均采用氯仿熏蒸法，并结合德国耶拿TOCMultiN/C3100总碳-总氮分析仪进行测量。实验仪器真空干燥器，水循环式真空泵，培养皿，150ml三角瓶，烧杯，恒温摇床，德国耶拿TOCMultiN/C3100总碳一总氮分析仪。实验药品0.5mol/lK2SO4溶液，无乙醇氯仿，NaOH溶液，黄油；其中无乙醇氯仿为国家公安管制类药品，实验室

14、内使用均为氯仿分析纯，所以使用前应进行提纯。将氯仿试剂按1:2与蒸储水混合放入分液漏斗内，充分摇动1min,慢慢放出底层氯仿于烧杯中，反复洗涤三次。每次使用前洗涤适量氯仿，并保存与暗色试剂瓶中。在熏蒸时为了更好的降低氯仿沸点，在盛有氯仿的烧杯内加入适量CaCL2/沸石，吸取洗涤时残留的蒸储水。操作方法称取过2mm筛的土样（10g粉）四份，分别作氯仿熏蒸处理和无氯仿熏蒸处理于培养皿中，比烧杯盛装更能很好的被氯仿熏蒸。将土样放入真空干燥器，并放置无乙醇氯仿（内有CaCL2）,同时放入盛有1mol/LNaOH稀溶液的烧杯，用于吸收熏蒸过程中释放出来的CO2。用凡士林对真空干燥剂进行密封，水循环式真空泵抽真空，使氯仿沸腾5min。关闭真空干燥器阀门，于25c黑暗条件下培养24h。熏蒸结束后，打开真空干燥器应听到空气进入的声音，否则为熏蒸不完全，应重新熏蒸。熏蒸完全后，应先取出氯仿溶液和NaOH稀溶液，再密封真空干燥器反复抽真空，将土壤中残留的氯仿抽出。在氯仿熏蒸和无氯仿熏蒸的土样中加入40ml0.5mol/lK2