浙江省20某年四次选考生物试卷试题分类汇编：选一第一、二章大肠杆菌的培养和分离【含答案及解析】

1、浙江省2019年四次选考生物试卷分类汇编：选一第一、二章大肠杆菌的培养和分离【含答案及解析】姓名_ 班级_ 分数_题号一总分得分一、综合题1. 请回答从土壤中分离产脲酶细菌和脲酶固定化实验的有关问题 （1）LB固体培养基：取适量的蛋白胨、酵母提取物、NaCl，加入一定量的蒸馏水溶解，再加 _ ，灭菌备用。 （2）尿素固体培养基：先将适宜浓度的尿素溶液用 _ 灭菌过的G 6 玻璃砂漏斗过滤，因为G 6 玻璃砂漏斗 _ ，故用于过滤细菌。然后将尿素溶液加入到已经灭菌的含有酚红的培养基中，备用。 （3）取适量含产脲酶细菌的10 -4 、10 -5 两种土壤稀释液，分别涂布接种到LB固体培养基和尿素固

2、体培养基上，培养48h，推测固体培养基上生长的菌落数最少的是 _ （A. 10 -5 稀释液+尿素固体培养基 B. 10 -5 稀释液+LB固体培养基 C. 10 -4 稀释液+尿素固体培养基 D. 10 -4 稀释液+LB固体培养基）。在尿素固体培养基上产脲酶细菌菌落周围出现 _ ，其原因是细菌产生的脲酶催化尿素分解产生 _ 所致。 （4）制备固定化脲酶时，用石英砂吸附脲酶，装柱。再用蒸馏水洗涤固定化酶柱，其作用是 _ 。 2. 生活饮用水的微生物安全性日常检测是很重要的。请回答下列问题： （1）培养大肠杆菌所用的LB培养基一般用 _ 法灭菌。检验大肠杆菌的含量时，通常将水样用 _ 进行一系

3、列的梯度稀释。 （2）将稀释后的水样分别用玻璃刮刀 _ 到LB固体培养基， _ 于恒温培养箱，在 _ 条件进行培养。用该方法统计样本菌落数时 _ （填需要或不需要）设置对照组。 （3）下图表示培养和纯化大肠杆菌的部分操作步骤，下列相关叙述正确的是 _ 。 A步骤倒平板操作时，倒好后应立即将其倒过来放置 B步骤接种环火焰上灼烧后迅速蘸取菌液后划线 C步骤多个方向划线，使接种物逐渐稀释，培养后出现单个菌落 D.步骤恒温培养箱培养后可用来对大肠杆菌进行计数 3. 在“分离以尿素为氮源的微生物”的实验中，配制好的尿素固体培养基加上封口膜后用 _ 方法灭菌，冷却后加入用G6玻璃纱漏斗过滤的尿素溶液。玻璃

4、纱漏斗角后需用适宜浓度的 _ 浸泡，再用 _ 冲洗，干燥后保存。 4. 随着社会的发展，石油产品的使用越来越多，石油烃污染也越来越严重。为了筛选出分解石油烃能力强的微生物，人们不断地进行研究。下图为获取能分离出分解石油烃的微生物的土壤样品后的研究过程，请回答有关问题： (1)获取土壤样品的取样地点最好选在 _ 。为了能有效地分离出分解石油烃的微生物,过程所用的选择培养基只能以石油烃作为唯一碳源，其原因是 _ 。 (2)根据平板上生长的菌落，对进行接种采用的方法是 _ ,若发现在中无法区分菌落，可以将图中取出的菌液 _ 。 (3)纯化菌株时，通常使用的划线工具是 _ 。采用 _ 方法对其进行灭菌

5、。划线的某个平板培养后,第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌落,第二划线区域所划的第一条线上无菌落，其他划线上有菌落。造成划线无菌落可能的操作失误是 _ (写出一点即可)。 5. 脲酶是催化尿素分解的特异性水解酶。该酶主要从刀豆等豆科植物提取，现被广泛应用于尿素废水的净化过程。请分析回答以下问题： (1)脲酶可以催化尿素分解为 _ ，其中碱性物质可以能使酚红指示剂变为 _ 。 (2)为了提高脲酶的利用效率，可以釆用固定化酶技术将其固定。酶的固定化方法有：吸附法、共价偶联法、包埋法和 _ 。 (3)实验室中可以采用吸附法将该酶制成固定化酶柱，让尿素废水过柱前，先用10倍体积的蒸馏水洗涤酶柱，目

6、的是 _ 。 (4)脲酶除了从植物获取外，还可以来源于土壤中的微生物。为了从土壤中分离得到队尿素为氮源的微生物,采用的分离方法操作最简便的是 _ 。下列有关该分离方法的操作叙述错误的是 _ 。 A.必须使用固体培养基 B.必须在酒精灯火焰旁接种 C.必须将接种后的培养皿倒置培养 D.必须将接种前的培养皿、培养基、土壤悬浮液等进行灭菌处理 6. 漆酶属于木质降解酶类，在环境修复、农业生产等领域有着广泛用途。下图是分离、纯化和保存漆酶菌株的过程。 (1)在步骤中，用 _ 稀释制成不同浓度的样品悬液。 (2)步骤中将保存在70%酒精中的 _ 放在酒精灯火焰上，待火焰熄灭，将菌液涂布到整个平面，将培养

7、皿 _ 在37C恒温培养箱中培养2448小时，观察菌落数。 (3)步骤应选择挑取涂布平板上长出的 _ ，再通过划线进一步 _ 。 (4)步骤中，将菌种接种在 _ 培养基中，在37C恒温培养箱中培养24h后，置于 _ 冰箱中保存。 (5)若该漆酶大量应用于环境修复，可先用石英砂对漆酶进行 _ (A.包埋B.共价偶联C.吸附D.交联)法固定，再进行工业化使用。 7. 下表是用于从土壤中分离纯化细菌的培养基配方。 请回答： （1）培养基的类型很多，按照“细菌喜 _ ，霉菌喜 _ ”的原则配制上述 培养基后，一般还要调节 pH 并对培养基进行 _ 处理。 （2）分离纯化微生物最常使用的划线分离法中，接种环在菌液中蘸菌液 _ （A一 B二 C三 D四）次；若用涂布分离法，则制备细菌悬液时，一般需进 行 _ 处理，为确保操作过程不被杂菌污染，接