第五章 质量标准及稳定性

1、 第五章第五章 质量标准研究质量标准研究n药品质量标准是国家对药品质量及检验方法所药品质量标准是国家对药品质量及检验方法所作的技术规定，是药品生产、经营、使用、检作的技术规定，是药品生产、经营、使用、检验和监督管理部门共同遵循的法定依据。验和监督管理部门共同遵循的法定依据。我国国家药品标准：我国国家药品标准：n中华人民共和国药典中华人民共和国药典，现行版是，现行版是20102010版，版，分为一部和二部。一部收载常用中药材和中成分为一部和二部。一部收载常用中药材和中成药等传统药；药等传统药；n部颁药品标准部颁药品标准, ,中国生物制品规程中国生物制品规程、药品卫生标准药品卫生标准以及所有未收载

2、入药典的药以及所有未收载入药典的药品标准。品标准。中药新药质量标准研究的技术要求中药新药质量标准研究的技术要求n质量标准中的各项内容都应做细致的考察质量标准中的各项内容都应做细致的考察及试验，各项试验数据要求准确可靠，以及试验，各项试验数据要求准确可靠，以保证药品质量的保证药品质量的可控性可控性和和重现性重现性。 中药质量标准中药质量标准质量标准研究质量标准研究一质量标准设计原则一质量标准设计原则（一）同步进行原则（一）同步进行原则1.1. 制剂用原料研究与质量控制同步：制剂用原料研究与质量控制同步：原料为药材，级别不同，质量不同。原料为药材，级别不同，质量不同。 2.2. 制备工艺研究与质量

3、控制同步：制备工艺研究与质量控制同步： 根据各工艺阶段中所含的有效成分，根据各工艺阶段中所含的有效成分，建立质量监控方法，用来考察药物提建立质量监控方法，用来考察药物提取是否完全，分离、纯化工艺条件是取是否完全，分离、纯化工艺条件是否合适。否合适。（二）样品要有代表性（二）样品要有代表性1.1.原料的代表性：药材品种不同，质量不原料的代表性：药材品种不同，质量不同；产地不同，含量不同；还有药用部位同；产地不同，含量不同；还有药用部位、采收季节、加工炮制方法、储藏条件等、采收季节、加工炮制方法、储藏条件等因素均对质量有影响。因素均对质量有影响。2.2.质量标准所制定的指标应有代表性：质量标准所制

4、定的指标应有代表性： 所制定的指标项目皆应与功能主治相符，所制定的指标项目皆应与功能主治相符，方能保证质量标准所制订的指标具有代表性。方能保证质量标准所制订的指标具有代表性。 3.3.质量标准具有可控性质量标准具有可控性: :它与临床疗效、它与临床疗效、 安全有关，必须对处方中的药材、工艺安全有关，必须对处方中的药材、工艺 中的半成品、成品进行监控。中的半成品、成品进行监控。 4. 4.质量标准所采用的对照物要可靠性：质量标准所采用的对照物要可靠性： 对照物、对照药材注意与制剂研究中的对照物、对照药材注意与制剂研究中的 原料一致。原料一致。（三）对照试验原则（三）对照试验原则 1. 1. 设立

5、对照：所有试验项目（鉴别、含量设立对照：所有试验项目（鉴别、含量测定）必须设立阴性和阳性对照。测定）必须设立阴性和阳性对照。 2. 2. 对照的等量性：供试品与阳性、阴性对照对照的等量性：供试品与阳性、阴性对照应为量化对照（样品的标示量与对照品取量要应为量化对照（样品的标示量与对照品取量要一致）。一致）。（四）重复性原则（四）重复性原则 研究过程中质量控制内容需要有良好的研究过程中质量控制内容需要有良好的重复性：同一人在不同时间、不同仪器重复性：同一人在不同时间、不同仪器上均能重复实验结果。上均能重复实验结果。设计方案设计方案查阅资料查阅资料研究内容研究内容制定草案制定草案反复试验反复试验修改

6、完善修改完善名称名称处方处方制法制法性状性状检查检查浸出物浸出物含量测定含量测定功能主治功能主治用法用量用法用量注意注意 规格规格 贮藏贮藏 二、质量标准研究程序二、质量标准研究程序 质质 量量 标标 准准 研研 究究 路路 线线方方 法法方方 法法 学学 考考 察察HPLCTLCSGC分光光度法分光光度法提取条件提取条件分离分离 纯化纯化测定条件测定条件线性范围线性范围稳定性稳定性精密度精密度重复性重复性回收率回收率鉴别鉴别 质量标准的制定质量标准的制定一、性状：成品的颜色、外形、气味一、性状：成品的颜色、外形、气味等依次描述。即药品内在质量的外等依次描述。即药品内在质量的外在体现。在体现。

7、 二、二、 鉴别鉴别 （一）目的、意义：中药制剂多为复方，（一）目的、意义：中药制剂多为复方，通过鉴别项的检测来确定复方中药材的通过鉴别项的检测来确定复方中药材的存在、真伪、纯度。存在、真伪、纯度。 （二）影响因素：药材品种、药材产地、（二）影响因素：药材品种、药材产地、药用部位、炮制方法。药用部位、炮制方法。（三）项目选择原则：君药、贵重药、毒（三）项目选择原则：君药、贵重药、毒药应首选。药应首选。（四）鉴别方法：经验鉴别、显微鉴别、（四）鉴别方法：经验鉴别、显微鉴别、理化鉴别、色谱鉴别理化鉴别、色谱鉴别1 1色谱鉴别的优点：色谱鉴别的优点：（1 1） 应用量大，适用面广。应用量大，适用面广

8、。（2 2） 信息量大、效率高。信息量大、效率高。（3 3） 设备简单、操作方便、成本低。设备简单、操作方便、成本低。（4 4） 时间短、分离能力强。时间短、分离能力强。（5 5） 样品用量少，不需要特别纯化。样品用量少，不需要特别纯化。（6 6） 文献多，可参考。文献多，可参考。（7 7） 吸附剂和显色剂选择性大。吸附剂和显色剂选择性大。 2.2.薄层板的制备薄层板的制备（1）吸附剂的种类：硅胶、氧化铝、活性炭、聚吸附剂的种类：硅胶、氧化铝、活性炭、聚酰胺等。酰胺等。（2 2）吸附剂选择原则：）吸附剂选择原则： A. A.亲脂性化合物选用硅胶、氧化铝亲脂性化合物选用硅胶、氧化铝 B. B.亲

9、水性化合物选用纤维素、离子交换树脂、亲水性化合物选用纤维素、离子交换树脂、硅藻土、聚酰胺硅藻土、聚酰胺 C. C.酸性物质首选硅胶，碱性物质首选氧化铝，酸性物质首选硅胶，碱性物质首选氧化铝，中性物质两者都可以。中性物质两者都可以。 D.D.含酚羟基的化合物，可选硅胶，聚酰胺更好。含酚羟基的化合物，可选硅胶，聚酰胺更好。3.3.展开剂的选择展开剂的选择A A对待测组分有良好的溶解性对待测组分有良好的溶解性B B 可使待测组分与杂质分开可使待测组分与杂质分开C C 待测组分待测组分R Rf f值在值在0.20.20.80.8之间之间D D 不与待测组分与吸附剂发生化学反应不与待测组分与吸附剂发生化

10、学反应E E 沸点适中，黏度较小沸点适中，黏度较小F F 展开后斑点圆且集中展开后斑点圆且集中G G 混合溶剂最好临用前新鲜配制混合溶剂最好临用前新鲜配制 4.4.试验方法：先用单一溶剂逐个试验，再用试验方法：先用单一溶剂逐个试验，再用混合溶剂系统。混合溶剂系统。 溶剂系统是由基础溶剂和洗脱溶剂两部分组溶剂系统是由基础溶剂和洗脱溶剂两部分组成，基础溶剂常是非极性溶剂，洗脱溶剂是成，基础溶剂常是非极性溶剂，洗脱溶剂是极性较大的。两种溶剂的比例常用极性较大的。两种溶剂的比例常用9 9：1 1，可，可根据吸附剂的活性和根据吸附剂的活性和RfRf值的大小调整，并加值的大小调整，并加入第三种以上的溶剂。

11、入第三种以上的溶剂。5斑点的检视：斑点的检视：（1 1） 被测物质本身有颜色，可展开后直被测物质本身有颜色，可展开后直接观察斑点。接观察斑点。（2 2）可在紫外灯下观察荧光，）可在紫外灯下观察荧光，254254nm, nm, 365nm 365nm 。（3 3）对本身不具有荧光物质，可在荧光板）对本身不具有荧光物质，可在荧光板GF254GF254展开后，展开后，紫外下底版有荧光，被测物质斑点呈暗色。有些物质紫外下底版有荧光，被测物质斑点呈暗色。有些物质虽有荧光，但不强，喷一定物质后，荧光加强。虽有荧光，但不强，喷一定物质后，荧光加强。（4 4）薄层鉴别的判断：选用对照品（或对照药材）与）薄层鉴

12、别的判断：选用对照品（或对照药材）与样品的薄层色谱相比较，在与对照品（或对照药材）样品的薄层色谱相比较，在与对照品（或对照药材）相对应的位置上，显相同颜色的斑点。相对应的位置上，显相同颜色的斑点。 与对照品相比，使用对照药材做鉴别，增加整体与对照品相比，使用对照药材做鉴别，增加整体专属性，新药典中，使用对照药材的占专属性，新药典中，使用对照药材的占61.6%61.6%。 陈皮与枳壳的薄层色谱陈皮与枳壳的薄层色谱 三、三、 检查检查（一）通则：水分、（一）通则：水分、pHpH值、相对密度、灰份、值、相对密度、灰份、重量差异、崩解时限等。重量差异、崩解时限等。（二）灰份、炽灼残渣：控制原料加工或储

13、存（二）灰份、炽灼残渣：控制原料加工或储存过程中其他无机物污染或掺杂。过程中其他无机物污染或掺杂。（三）重金属及砷盐的检查：（三）重金属及砷盐的检查： 重金属重金属1010ppmppm，不列入正文，不列入正文，10 ppm10 ppm，要求检查。要求检查。 砷盐砷盐22ppmppm，不列入正文，不列入正文， 2 2ppmppm，要求检查。要求检查。（四）农药残留的检查：有机氯，有机磷。（四）农药残留的检查：有机氯，有机磷。（半衰期长）（半衰期长） 一般采用一般采用GCGC方法。方法。（五）有毒物质的检查：（五）有毒物质的检查：1 1. .内服酒、酊剂检查甲醇。内服酒、酊剂检查甲醇。2 2. .

14、卫生学检查：对非灭菌药物制剂（包括药材卫生学检查：对非灭菌药物制剂（包括药材与中成药）的生物性污染都有考察。项目包与中成药）的生物性污染都有考察。项目包括：细菌总数、霉菌、活螨。括：细菌总数、霉菌、活螨。3 3. .中药复方制剂中所用原料（有效成分、有效中药复方制剂中所用原料（有效成分、有效部位）或半成品，在提取分离、精制纯化过部位）或半成品，在提取分离、精制纯化过程中有可能引入有害的有机溶剂时，应进行程中有可能引入有害的有机溶剂时，应进行有机溶剂残留量的检查。有机溶剂残留量的检查。四、浸出物：复方中一个有效成分不能代表全四、浸出物：复方中一个有效成分不能代表全方的功能主治，或有效成分含量太低

15、（小于方的功能主治，或有效成分含量太低（小于万分之五），可增加浸出物测定。根据有效万分之五），可增加浸出物测定。根据有效成分的性质选择不同溶剂为浸出物测定的溶成分的性质选择不同溶剂为浸出物测定的溶剂。剂。 溶剂：水、甲醇、乙醇、正丁醇、乙醚等。溶剂：水、甲醇、乙醇、正丁醇、乙醚等。 五五、含量测定含量测定（一）指标的选择（一）指标的选择1.1.主药（君药及臣药）有效成分清楚的，主药（君药及臣药）有效成分清楚的，应针对有效成分定量。应针对有效成分定量。2.2.主药有效成分不清楚的，应进行研究，主药有效成分不清楚的，应进行研究，找出有效成分，建立定量方法或选特征找出有效成分，建立定量方法或选特征成

16、分定量。成分定量。 3.3.主药大类成分清楚的，测定总成分（总主药大类成分清楚的，测定总成分（总黄酮、总皂甙）黄酮、总皂甙） 4. 4.全组方主药有效成分或特征成分不清全组方主药有效成分或特征成分不清楚时，做总有效部位的限量。楚时，做总有效部位的限量。（二）含量测定方法（质量标准的核心）：（二）含量测定方法（质量标准的核心）： 1. 1. HPLCHPLC法定量：快速、准确、灵敏、可排法定量：快速、准确、灵敏、可排除干扰、性能好除干扰、性能好 。 常用方法：外标法，被测样品某组分的峰常用方法：外标法，被测样品某组分的峰面积（峰高）与对照品的峰面积直接比较面积（峰高）与对照品的峰面积直接比较进行

17、定量。进行定量。 外标一点法：标准曲线通过原点外标一点法：标准曲线通过原点 外标二点法：标准曲线不通过原点外标二点法：标准曲线不通过原点 C =b x + a a = 0 C =b x + a a = 0 时时 一点法，一点法， 当当b/a 100b/a 100时，可近似认为时，可近似认为a a 值很小，值很小， 可用一点法。可用一点法。 （1 1） HPLCHPLC法的步骤法的步骤 A:A:文献查阅：首选君药、臣药。该药或文献查阅：首选君药、臣药。该药或有效成分是否有文献报道，药典、部颁有效成分是否有文献报道，药典、部颁有否报道，是否有法定对照品（供含量有否报道，是否有法定对照品（供含量测定

18、用）测定用） B B：色谱柱：首选色谱柱：首选ODSODS柱（柱（C18C18）、）、然后然后硅胶、腈基、氨基柱。硅胶、腈基、氨基柱。 C C：流动相：反相首选甲醇流动相：反相首选甲醇水，少用缓冲盐水，少用缓冲盐流动相，试剂要用色谱纯。流动相，试剂要用色谱纯。 D D：用流动相配制供制品，避免出现溶剂峰。用流动相配制供制品，避免出现溶剂峰。 E E：一般用一般用UVUV检测器，选最佳波长，没有紫外检测器，选最佳波长，没有紫外吸收的采用蒸发光检测器。吸收的采用蒸发光检测器。 （4 4）方法学研究：）方法学研究： a. a.标准曲线（对照品溶液的配制、曲线标准曲线（对照品溶液的配制、曲线方程、线性

19、、测量范围）方程、线性、测量范围） b.b.样品供试品溶液的制备样品供试品溶液的制备( (提取方法、提提取方法、提取溶剂、溶剂用量、提取时间、取溶剂、溶剂用量、提取时间、pHpH值、值、精制纯化除杂方法等精制纯化除杂方法等) ) e.e.稳定性试验：考察不同时间是否对测稳定性试验：考察不同时间是否对测定方法和测定结果有影响，用同一被测定方法和测定结果有影响，用同一被测样品的供试液在不同间隔时间用同一测样品的供试液在不同间隔时间用同一测定方法所得到的测定结果，计算含量的定方法所得到的测定结果，计算含量的平均值，平均值，RSD%3%RSD%3%，时间考察，一般要求时间考察，一般要求在一个工作日内。

20、在一个工作日内。 f.f.加样回收率试验（准确度试验）：至加样回收率试验（准确度试验）：至少少5 5次或次或3 3组平行试验。指对照品加入样组平行试验。指对照品加入样品（已知量）中，从供试液（前处理）品（已知量）中，从供试液（前处理）制备起，至含量测定所得到的值，计算制备起，至含量测定所得到的值，计算回收率，一般要求回收率在回收率，一般要求回收率在95%95%105% 105% 。 测得量测得量- -样品量样品量 加样回收率（加样回收率（% %）= = * * % % 对照品量对照品量 h. h. 样品测定：样品测定：1010批样品、批样品、2020个数据。个数据。 i. i. 含量限度的制定

21、：根据含量限度的制定：根据1010批样品测批样品测定数据制定，数据应在定数据制定，数据应在20%20%范围内。范围内。 2 2. . 分光光度法（可见分光光度法（可见- -紫外、比色法）紫外、比色法） 可见可见- -紫外分光光度法：灵敏度紫外分光光度法：灵敏度1010-4-4-10-10-7-7，可定性、定量。可定性、定量。 注意的问题：定量要排除干扰，一般采用注意的问题：定量要排除干扰，一般采用薄层色谱洗脱法，或柱色谱洗脱法。薄层色谱洗脱法，或柱色谱洗脱法。第六章第六章 稳定性试验稳定性试验n中药的稳定性是指中药（原料或制剂）的化中药的稳定性是指中药（原料或制剂）的化学、物理及生物学特性发生

22、变化的程度。学、物理及生物学特性发生变化的程度。n通过稳定性试验，考察在不同环境条件（如通过稳定性试验，考察在不同环境条件（如温度、湿度、光线等）下药品特性随时间变温度、湿度、光线等）下药品特性随时间变化的规律，以认识和预测药品的稳定趋势，化的规律，以认识和预测药品的稳定趋势，为药品生产、包装、贮存、运输条件的确定为药品生产、包装、贮存、运输条件的确定和有效期的建立提供科学依据。和有效期的建立提供科学依据。 研究内容：研究内容：1.1.影响因素试验影响因素试验: :在剧烈条件下探讨药物的稳定性、了在剧烈条件下探讨药物的稳定性、了解影响其稳定性的因素及所含成份的变化。为制剂解影响其稳定性的因素及

23、所含成份的变化。为制剂处方设计、工艺筛选、包装材料和容器的选择、贮处方设计、工艺筛选、包装材料和容器的选择、贮存条件的确定、有关物质的控制提供依据。并为加存条件的确定、有关物质的控制提供依据。并为加速试验和长期试验应采用的温度和湿度等条件提供速试验和长期试验应采用的温度和湿度等条件提供参考。参考。2.2.加速试验加速试验: :在加速条件下进行的稳定性试验，其目的在加速条件下进行的稳定性试验，其目的是在较短的时间内，了解原料或制剂的化学、物理是在较短的时间内，了解原料或制剂的化学、物理和生物学方面的变化，为制剂设计、质量评价和包和生物学方面的变化，为制剂设计、质量评价和包装、运输、贮存条件等提供

24、试验依据，并初步预测装、运输、贮存条件等提供试验依据，并初步预测样品的稳定性。样品的稳定性。3 3. .长期试验长期试验: :在接近药品的实际贮存条件下进行的稳定在接近药品的实际贮存条件下进行的稳定性试验，为制订药物的有效期提供依据。性试验，为制订药物的有效期提供依据。 （一）影响因素试验（一）影响因素试验1.1.高温试验：高温试验： 供试品置密封洁净容器中，在供试品置密封洁净容器中，在6060条件下条件下放置放置1010天，于天，于0 0、5 5、1010天取样检测。与天取样检测。与0 0天天比较，若供试品发生显著变化，则在比较，若供试品发生显著变化，则在4040下同法进行试验。如下同法进行

25、试验。如6060无显著变化，则无显著变化，则不必进行不必进行4040试验。试验。 2.2.高湿试验高湿试验: : n供试品置恒湿设备中，于供试品置恒湿设备中，于2525、RH92.5RH92.55 5条件下放置条件下放置1010天，在天，在0 0、5 5、1010天取样天取样检测。检测项目应包括吸湿增重等。若吸湿检测。检测项目应包括吸湿增重等。若吸湿增重在增重在5%5%以上，则应在以上，则应在2525、RH75RH755 5下同法进行试验；若吸湿增重在下同法进行试验；若吸湿增重在5%5%以下，且以下，且其他考察项目符合要求，则不再进行此项试其他考察项目符合要求，则不再进行此项试验。验。 3.3

26、.强光照射试验强光照射试验: : n供试品于照度为供试品于照度为4500lx4500lx500lx500lx条件下放置条件下放置1010天，在天，在0 0、5 5、1010天取样检测。天取样检测。n此外，根据药物的性质必要时应设计其他此外，根据药物的性质必要时应设计其他试验，探讨试验，探讨pHpH值、氧及其他条件（如冷冻值、氧及其他条件（如冷冻等）对药物稳定性的影响。等）对药物稳定性的影响。 （二）加速试验（二）加速试验 加速试验一般应在加速试验一般应在404022、RH75RH755 5条件下进行试验，在试验期间第条件下进行试验，在试验期间第0 0、1 1、2 2、3 3、6 6个月末取样检

27、测。若供试品经检测不个月末取样检测。若供试品经检测不符合质量标准要求或发生显著变化，则应符合质量标准要求或发生显著变化，则应在中间条件下，即在在中间条件下，即在303022、RH65RH655 5条件下进行试验。条件下进行试验。 （三）长期试验（三）长期试验 长期试验是在接近药品的实际贮存条件长期试验是在接近药品的实际贮存条件下进行的稳定性试验，建议在下进行的稳定性试验，建议在252522、RH60RH601010条件下，分别于条件下，分别于0 0、3 3、6 6、9 9、1212、1818个月取样检测，也可在常温条件下个月取样检测，也可在常温条件下进行。进行。（四）药品上市后的稳定性考察（四）药品上市后的稳定性考察 药品注册申请单位应在药品获准生产上药品注册申请单位应在药品获准生产上市后，采用实际生产规模的药品进行留样市后，采用实际生产规模的药品进行留样