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文档简介

1、3油镜的操作方法油镜的操作方法2 酵母菌细胞数及细胞大小的测定酵母菌细胞数及细胞大小的测定5普通光学显微镜的构造普通光学显微镜的构造14酵母菌的形态鉴别酵母菌的形态鉴别细菌的简单染色和革兰氏染色细菌的简单染色和革兰氏染色了解了解掌掌握握熟悉熟悉教学内容及要求教学内容及要求一一 普通光学显微镜的构造普通光学显微镜的构造普普通通光光学学显显微微镜镜机械机械部分部分照明部分照明部分光学光学部分部分镜座镜座镜柱镜柱镜臂镜臂镜筒物镜转换器镜筒物镜转换器镜台镜台调节器调节器反光镜反光镜激光激光器器聚光镜聚光镜光圈光圈物镜物镜目镜目镜二、油镜的使用二、油镜的使用 先加一滴柏木油于标本上,从侧面看着油先加一滴

2、柏木油于标本上,从侧面看着油镜头,小心地转动粗调节扭使油镜下降,浸镜头,小心地转动粗调节扭使油镜下降,浸到镜面几乎与玻片接触到镜面几乎与玻片接触 ,但不要碰到玻片,但不要碰到玻片 然后一面将眼转移至目镜处观察,一面然后一面将眼转移至目镜处观察,一面向上徐徐转动粗调节扭,直到视野中出现模向上徐徐转动粗调节扭,直到视野中出现模糊的物象,再用微调节扭调节到找到物象为糊的物象,再用微调节扭调节到找到物象为止。千万不可用强力将镜头下压,这样容易止。千万不可用强力将镜头下压,这样容易压碎玻片和损坏镜头如果光线比较暗时,移压碎玻片和损坏镜头如果光线比较暗时,移动反光镜以调节光线。动反光镜以调节光线。使用后的

3、处理使用后的处理 观察结束,应先将镜筒升高,聚光器下降,再观察结束,应先将镜筒升高,聚光器下降,再取下切片,然后转动物镜转换器,使物镜与通光孔取下切片,然后转动物镜转换器,使物镜与通光孔错开,做好清洁工作。清洁完毕,再下降镜筒,使错开,做好清洁工作。清洁完毕,再下降镜筒,使两个物镜位于载物台上通光孔的两侧,呈两个物镜位于载物台上通光孔的两侧,呈“八八”字字形,将反光镜转至与载物台垂直,罩上防尘罩,仍形,将反光镜转至与载物台垂直,罩上防尘罩,仍用右手握住镜臂,左手平托住镜座,按号放回镜箱用右手握住镜臂,左手平托住镜座,按号放回镜箱中。中。一、细菌的简单染色一、细菌的简单染色 细菌形态微小,肉眼不

4、能直接看到,细菌形态微小,肉眼不能直接看到,必须借助显微镜(普通光学显微镜、电必须借助显微镜(普通光学显微镜、电子显微镜)放大后才能观察。细菌体小子显微镜)放大后才能观察。细菌体小半透明,经染色后才能较清楚的观察。半透明,经染色后才能较清楚的观察。第二节第二节 细菌形态的观察技术细菌形态的观察技术细菌染色用的染料:细菌染色用的染料: 1 1、酸性染料(阴离子染料):、酸性染料(阴离子染料):染染色离子带阴电荷,能与带阳电的物质结色离子带阴电荷,能与带阳电的物质结合,使之着色。降低菌液的合,使之着色。降低菌液的pHpH而使细菌而使细菌带阳电时,就可用酸性染料。带阳电时,就可用酸性染料。(伊红、(

5、伊红、刚果红)刚果红)第二节第二节 细菌形态的观察技术细菌形态的观察技术 2. 2.碱性染料(阳离子染料):碱性染料(阳离子染料):与带与带负电的物质结合,负电的物质结合,细菌一般带负电,细菌一般带负电,所以细菌染色用的染料,常用碱性染所以细菌染色用的染料,常用碱性染料(碱性复红、美兰)料(碱性复红、美兰) 第二节第二节 细菌形态的观察技术细菌形态的观察技术 3.3.中性染料:中性染料:碱性染料和中碱性染料和中性染料的结合物性染料的结合物(伊红美兰、(伊红美兰、伊红天青)。伊红天青)。第二节第二节 细菌形态的观察技术细菌形态的观察技术单染色法:用一种染色剂对涂片单染色法:用一种染色剂对涂片进行

6、染色。进行染色。该方法简单易行,该方法简单易行,但仅能显示细但仅能显示细胞的外部形态,而不能鉴别其内部胞的外部形态,而不能鉴别其内部结构,适用于微生物形态的观察。结构,适用于微生物形态的观察。第二节第二节 细菌形态的观察技术细菌形态的观察技术单染色流程单染色流程二、细菌革兰氏染色二、细菌革兰氏染色革兰氏阳性菌的细胞壁革兰氏阳性菌的细胞壁革兰氏阴性菌的细胞壁革兰氏阴性菌的细胞壁二、细菌革兰氏染色二、细菌革兰氏染色 有丹麦细菌学家格兰有丹麦细菌学家格兰18841884年发明而得名年发明而得名 原理:尚未完全阐明,但与细胞壁结构原理:尚未完全阐明,但与细胞壁结构密切相关:等电点学说、密切相关:等电点

7、学说、通透性学说、通透性学说、化学学说。化学学说。涂片涂片革兰氏染色操作流程流程革兰氏染色操作流程流程干燥干燥固定固定干燥干燥油镜观察油镜观察三、细菌菌落形态鉴别三、细菌菌落形态鉴别 菌落菌落:单个或少数细菌:单个或少数细菌接种到固体培养基表面,接种到固体培养基表面,经培养生长繁殖形成经培养生长繁殖形成 可见的细胞集团。可见的细胞集团。菌台菌台:许多细菌菌体接种在:许多细菌菌体接种在固体培养基上,经培养后固体培养基上,经培养后长成密集的、不规则的片状长成密集的、不规则的片状(块状)的细胞群体。(块状)的细胞群体。(一)细菌菌落:(一)细菌菌落:形状、大小、颜色、透明度、隆起度、形状、大小、颜色、透明度、隆起度、表面形状、血平板上有无溶血环(表面形状、血平板上有无溶血环(P30)等。)等。(二)细菌菌落形态特征(二)细菌菌落形态特征普通平板普通平板 血平板血平板练习题练习题1.革兰氏染色时结晶紫加在已固定的涂片上革兰氏染色时结晶紫加在已固定的涂片上 染色,一般染()分钟水洗。染色,一般染()分钟水洗。2.革兰氏染色最关键的步骤是()。革兰氏染色最关键的步骤是()。3.显微镜的构造有机械

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