沪科版生物高中第二册6.3《基因工程与转基因生物》.ppt课件

1、微生物基因工程植物基因工程动物基因工程基因治疗转基因产品的平安性磷磷酸酸二二酯酯键键目的基因目的基因切口切口切口切口EcoRIEcoRI例1、下面是4种限制性内切酶对DNA分子的识别序列和剪切位点图表示剪切点、切出的断面为黏性末端，写出酶切后产生的结果：限制酶1GATC限制酶2CATG限制酶3GGATCC限制酶4CCCGGGCATGCTAGCCTAG GGGGCCCCCCGGG例2、用限制酶EcoR、Mbo单独或结合切割同一种质粒，得到的DNA片段长度如以下图(1kb即1000个碱基对)，请在以下图中画出质粒上EcoR、Mbo的切割位点。先尝试先尝试再验算再验算衔接的部位：磷酸二酯键衔接的部位

2、：磷酸二酯键一样一样DNADNA衔接酶衔接酶的作用表示图的作用表示图DNADNA聚合酶聚合酶的作用表示图的作用表示图在两个在两个DNADNA片段之片段之间构成磷酸二酯键间构成磷酸二酯键将单个脱氧核苷酸加将单个脱氧核苷酸加到已存在的核酸片段到已存在的核酸片段上构成磷酸二酯键上构成磷酸二酯键质粒质粒EcoR酶酶EcoR酶酶 DNA衔接酶衔接酶重组质粒重组质粒质粒自连质粒自连目的基因自连目的基因自连AATTCAATTC G G目的基因目的基因AATTCAATTC G GG GCTTAACTTAAG GCTTAACTTAAGAATTCGAATTCCTTAAGCTTAAGGAATTCGAATTCCTTA

3、AGCTTAAG思索：构成的重组思索：构成的重组DNADNA分子过程中，质粒与目的基分子过程中，质粒与目的基因衔接构成的产物有哪些种类？因衔接构成的产物有哪些种类？ 酶切方法：单酶切和双酶切酶切方法：单酶切和双酶切 双酶切法优点：可以防止双酶切法优点：可以防止DNADNA衔接酶催衔接酶催化时被切割后的质粒本身环化的景象，化时被切割后的质粒本身环化的景象，并能保证质粒与目的基因的定向衔接。并能保证质粒与目的基因的定向衔接。例3、如图是利用基因工程技术培育转基因植物，消费可食用疫苗的部分过程表示图，其中Pst、Sma、EcoR、Apa为四种限制性核酸内切酶，以下说法正确的选项是 ()A要用Pst限

4、制酶切割含抗原基因的DNA、质粒B要用Sma限制酶切割含抗原基因的DNA、质粒C要用Pst和EcoR这两种限制酶分别去切割含抗原基因的DNA、质粒D要用Pst和EcoR这两种限制酶去切割含抗原基因的DNA、用EcoR限制酶去切割质粒1 1、作为运载体须具备的条件：、作为运载体须具备的条件： 可以在宿主细胞中复制并稳定地保管； 具有限制酶切点，以便与外源基因衔接； 具有适宜的选择标志标志基因，如抗生素的抗性基因便于重组DNA的鉴定挑选。2 2、类别：、类别： 质粒常用、病毒等质粒常用、病毒等21当带有抗生素抗性基因的载体进入受体菌后，受体菌才干生长。不带有抗生素抗性基因的受体菌不能在含有抗生素的

5、培育基选择培育基中生长。抗生素选择原理活死抗性基因抗生素无抗性基因标志基因，可用含特标志基因，可用含特定抗生素的培育基鉴定抗生素的培育基鉴定挑选定挑选特定限制酶特定限制酶的切割位点的切割位点例1、下面是5种限制性内切酶对DNA分子的识别序列和剪切位点图表示剪切点、切出的断面为黏性末端：限制酶1：GATC；限制酶2：CATG；限制酶3：GGATCC；限制酶4：CCGCGG；限制酶5：CCAGG。请指出以下哪组表达正确 A限制酶2和4识别的序列都包含4个碱基对 B限制酶3和5识别的序列都包含5个碱基对 C限制酶1和3剪出的黏性末端一样 D限制酶1和2剪出的黏性末端一样例4基因工程中，需运用特定的限

6、制酶切割目的基因和质粒，便于重组和挑选。知限制酶I的识别序列和切点是GGATCC，限制酶的识别序列和切点是GATC。根据图示,判别以下操作正确的选项是 ( ) A质粒用限制酶切割，目的基因用限制酶切割B质粒用限制酶切割，目的基因用限制酶切割C目的基因和质粒均用限制酶切割D目的基因和质粒均用限制酶切割例3、如图是利用基因工程技术培育转基因植物，消费可食用疫苗的部分过程表示图，其中Pst、Sma、EcoR、Apa为四种限制性核酸内切酶，Sma的识别序列和切点是CCCGGG。以下说法错误的选项是()A图中质粒分子经Sma切割前后，分别含有0、2个游离的磷酸基团B要用Pst和EcoR这两种限制酶分别去切割含抗原基因的DNA、质