B族链球菌筛查学习教案

1、会计学1B族链球菌筛查族链球菌筛查第一页，编辑于星期五：二十一点 五十三分。是新生儿n在美国，大约25%到40%的孕妇的产道携带这种细菌。n其中40%70%在分娩过程中会传递给新生儿n早发B族链球菌病（小于7天的婴儿）是引起新生儿疾病和死亡的首位感染性疾病第1页/共22页第二页，编辑于星期五：二十一点 五十三分。第2页/共22页第三页，编辑于星期五：二十一点 五十三分。母亲阴道携带GBS是新生儿感染的主要高危因素之一。要降低孕产妇的带菌率以及新生儿的发病率和病死率,就需要先进的GBS诊断技术,这样才能有效地对感染者进行预防和治疗CDC与其他机构共同制定了围产期B族链球菌感染筛查及防治指南，并于

2、2002年和2010年进行了修改，发病率从90年代早期个新生儿降低到了近些年的个新生儿。第3页/共22页第四页，编辑于星期五：二十一点 五十三分。第4页/共22页第五页，编辑于星期五：二十一点 五十三分。第5页/共22页第六页，编辑于星期五：二十一点 五十三分。第6页/共22页第七页，编辑于星期五：二十一点 五十三分。给予青霉素预防(对于青霉素过敏的病患)孕35-37周取阴道和直肠拭子做GBS检测毋须药物预防GBS(+)GBS(-)GBS(+)GBS(-)未做分娩期预防性使用抗生素，以防止围产期B族链球菌感染，B组链球菌的发病率在过去十年中下降70-US 产时高危因素：产时发热38，胎膜早破1

3、8小时进行GBS检测青霉素G首剂480万单位，后每4小时240320万单位静滴直至分娩或阿莫西林首剂2g，后每4小时1g静滴直至分娩患者使用青霉素出现下列症状：过敏反应；血管性水肿；呼吸困难；荨麻疹否是是否对克林霉素和红霉素敏感头孢唑啉首剂2g，后每8小时1g静滴直至分娩万古霉素每12小时1g静滴直至分娩克林霉素900mg每8小时静滴直至分娩是是否否第7页/共22页第八页，编辑于星期五：二十一点 五十三分。GBS检测方法比较显色培养基PCR免疫备注原理培养DNA PCRELISA/胶体金培养方法是细菌检测的金标准操作流程采样-接种-孵育-观察采样-准备样品（震荡离心）-准备对照品-DNA提取-

4、准备反应液和反应管-扩增-分析结果胶体金：采样-稀释-加样-观察结果 ELISA:样品准备-加样-孵育-洗板-底物反应-读数显色培养基操作最简单所需设备无离心机、荧光PCR仪、漩涡混合器、恒温震荡器ELISA:酶标仪、洗板机； 胶体金：无显色培养基检测毋需设备，节省成本作用培养+初步鉴定GBS，培养的菌落可用于后续药敏实验鉴定GBS鉴定GBS显色培养基除可做培养和初步鉴定外，其菌落可用于后续的药敏实验，而PCR和免疫方法则仅用于鉴别，如需药敏实验必须重新做培养可检测样本阴道直肠拭子；尿液；新生儿胃吸出物等阴道直肠拭子血清，血浆等孕妇筛查适用样本为阴道直肠拭子检测时间18-24小时2小时2小时虽

5、然PCR和免疫学方法有速度优势，但对于筛查的病人，并不急于诊断，所以实验室和临床可以接受培养相对较慢的速度用户成本较低较高？一般收费60-8060-100ELISA:30-60 胶体金：10-20GBS检测方法比较第8页/共22页第九页，编辑于星期五：二十一点 五十三分。Todd Hewitt broth + antibiotics（42116） B族链球菌增菌肉汤法国进口（10个月效期）用于孕妇阴道肛肠样本中B族链球菌检测时的选择性增菌培养基中成分有助于含多种微生物标本中链球菌的生长。培养基中含抗生素（萘啶酸和粘菌素）能抑制标本附属菌群中的大部分革兰氏阴性菌的生长。第9页/共22页第十页，编

6、辑于星期五：二十一点 五十三分。第10页/共22页第十一页，编辑于星期五：二十一点 五十三分。阴道口1 / 3 肛门括约肌25cm孕妇：先檫去外阴分泌物，将1根无菌阴道拭子放入阴道下1/3内，旋转1周采取阴道分泌物，再使用1根棉拭子插入肛门，在肛门括约肌上2-3cm处轻轻旋转取得直肠分泌物新生儿：无菌棉拭子在新生儿鼻腔，咽部旋转1周取分泌物。脑脊液、血液、痰液亦可* 新生儿消化胃液在国外临床实验中为有效样本类型第11页/共22页第十二页，编辑于星期五：二十一点 五十三分。Todd-Hewitt增菌肉汤（18-24h）接种到Strepto产色培养基（避光18-24h）接种到Strepto产色培养

7、基（避光18-24h）如24h无生长延长至48小时粉色至红色，圆形&珍珠状菌落 -GBS无生长或蓝色紫色无色不典型菌落-杂菌使用选择性增菌液，可显著提高阳性率，避免50%的GBS携带者出现假阴性结果(US-CDC2010) （有氧，37）第12页/共22页第十三页，编辑于星期五：二十一点 五十三分。Streptococcus agalactiae ATCC NCTC 8190无乳链球菌无乳链球菌 ATCC 12386 + 粪肠球菌粪肠球菌ATCC 29212无乳链球菌无乳链球菌 ATCC 12386 + 白色念珠菌白色念珠菌 ATCC 10231实验室实物拍摄第13页/共22页第十四页

8、，编辑于星期五：二十一点 五十三分。血平板需透光观察少小菌落易漏诊非溶血B链无法观测StreptoB 产色平板颜色典型，清晰可辨所有的B链均可被检出：无论是否具有溶血性第14页/共22页第十五页，编辑于星期五：二十一点 五十三分。第15页/共22页第十六页，编辑于星期五：二十一点 五十三分。n外资医院（GBS筛查指南要求比较严格）n收费情况nGBS筛查/检测（100-200不等）n套用一般性细菌培养与鉴定（60-80不等）第16页/共22页第十七页，编辑于星期五：二十一点 五十三分。郭健飞市场部生物梅里埃第17页/共22页第十八页，编辑于星期五：二十一点 五十三分。采集标本直接接种37有氧，24小时后转运培养基，变浑浊阴道标本，无菌生长肛门标本，蓝色细菌37有氧，24小时后，没有发现浅粉色/红色，圆形珍珠状 菌落。继续培养24小时第18页/共22页第十九页，编辑于星期五：二十一点 五十三分。l阴道标本阴性，48小时，没有细菌生长；l肛门标本阴性，48小时，没有B族链球菌（浅粉/红色，圆形珍珠状）第19页/共22页第二十页，编辑于星期五：二十一点 五十三分。强光照射下下出现疑似菌落，为了验证产色培养基的培养结果，使用Vitek MS （20 Mins）进行快速鉴定lactobacillus salivarius 唾液乳杆菌Enterococcus