选修一一轮复习植物的组织培养电子教案

1、选修一一轮复习植物的组织培养一、植物组织培养的基本过程一、植物组织培养的基本过程 离体器官、 组织或细胞 脱分化 愈伤组织 再分化 根、芽 植物体 二、影响植物组织培养的因素二、影响植物组织培养的因素1、外植体的选取、外植体的选取 不同植物的组织培养难度不同不同植物的组织培养难度不同 同一种植物材料材料的年同一种植物材料材料的年龄保存时间龄保存时间也会影响结果也会影响结果2、培养基的配制、培养基的配制(MS培养基培养基) A大量元素：大量元素：N、P、K、Ca、Mg、S B微量元素微量元素：B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、Co C有机物：有机物：甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等甘氨酸、

2、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等 D 植物激素植物激素 3、不同植物激素使用顺序和使用量、不同植物激素使用顺序和使用量 主要由主要由生长素生长素和和细胞分裂素细胞分裂素控制，在生控制，在生长素存在时，细胞分裂素作用加强。长素存在时，细胞分裂素作用加强。使用顺序使用顺序实验结果实验结果先生长素，后用细胞分先生长素，后用细胞分裂素裂素有利于细胞分裂，但不有利于细胞分裂，但不分化分化先细胞分裂素，后用生先细胞分裂素，后用生长素长素细胞既分裂又分化细胞既分裂又分化同时使用同时使用分化频率提高分化频率提高4、pH、温度、光照、温度、光照菊花：菊花： pH=5.8 温度控制在温度控制在1822 每日光照每日光照

3、12h5、消毒、灭菌消毒、灭菌制备制备MS固体固体培养基培养基外植体消毒外植体消毒 接种接种 培培 养养栽栽 培培三、实验操作三、实验操作 移移 栽栽冲洗冲洗酒精酒精无菌水冲洗无菌水冲洗氯化汞氯化汞无菌无菌水冲洗至少三次之上水冲洗至少三次之上制备制备MS固体培养基固体培养基1 1、配制各种母液、配制各种母液2 2、配制培养基、配制培养基3 3、灭菌、灭菌外植体消毒外植体消毒旺旺盛盛嫩嫩枝枝(流流水水)冲洗冲洗刷洗，冲刷洗，冲洗洗20分钟左分钟左右右(无菌吸水无菌吸水纸纸)吸干表面水吸干表面水分分(70的酒精的酒精)摇动摇动2-3次次6-7秒秒(无菌水无菌水)清清洗洗(无菌吸水无菌吸水纸纸)吸干

4、表面水吸干表面水分分(氯化汞氯化汞)溶液溶液浸泡浸泡12分分钟钟(无菌水无菌水)清洗清洗3次次 1、前期准备 2、接种操作（接种过程中插入外植体时形态学上端朝上）（接种过程中插入外植体时形态学上端朝上） 3、培养过程应该放在无菌箱中进行，并定期进行消毒，保持适宜的温度和光照。 4、移栽前应先打开培养瓶的封口膜，让其在培养间生长几日，然后用流水清洗根部培养基。接种、培养、移栽和栽培接种、培养、移栽和栽培 （二）产生花粉植株的两种途径（二）产生花粉植株的两种途径 有哪两种途径？原因是什么？有哪两种途径？原因是什么？花药中花药中的花粉的花粉花药中花药中的花粉的花粉胚状体胚状体愈伤组愈伤组织织丛芽丛芽

5、丛芽丛芽生根生根移栽移栽花药培养产生花粉植株的两种途径花药培养产生花粉植株的两种途径1 1影响花粉植株能否成功及成功率高低的影响花粉植株能否成功及成功率高低的主要因素主要因素: : 和和 等。等。 阅读“影响花药培养的因素”，回答下列问题：2材料的选择：从花药来看，应当选择（初花期、盛花期、晚花期）的花药；从花粉来看，应当选择（四分体期、单核期、双核期、萌发期）的花粉；从花蕾来看，应当选择（完全未开放、略微开放、完全盛开）的花蕾。材料的选择材料的选择 培养基的组成培养基的组成实验操作实验操作材料的材料的选取选取材料的材料的消毒消毒接种和接种和培养培养（一）材料的选取（一）材料的选取 选择花药时

6、，一般通过选择花药时，一般通过镜检镜检来确定其来确定其中的花粉是否处于适宜的发育期。中的花粉是否处于适宜的发育期。 最常用的方法有最常用的方法有醋酸洋红法醋酸洋红法。但是，某些。但是，某些植物的花粉细胞核不易着色，需采用植物的花粉细胞核不易着色，需采用焙花焙花青青-铬矾法铬矾法，这种方法能将花粉细胞核染成，这种方法能将花粉细胞核染成蓝黑色蓝黑色。材料的消毒材料的消毒花花蕾蕾（70酒酒精）精）大约大约30s无菌无菌水清水清洗洗无菌吸无菌吸水纸吸水纸吸干水分干水分0.1氯氯化汞溶化汞溶液液24min无菌无菌水冲水冲洗洗接种和培养接种和培养 剥取花药剥取花药剥取花药剥取花药接种花药接种花药培养培养分化培养基培养分化培养基培养鉴定和筛选鉴定和筛选不要损伤花药不要损伤花药要彻底除去花丝要彻底除去花丝每个培养瓶接种