呼吸道合胞病毒感染研究现状和未来靶位

1、1会计学呼吸道合胞病毒感染研究现状和未来靶呼吸道合胞病毒感染研究现状和未来靶位位RSV研研究的五大进展究的五大进展2RSVRSV研究研究的的未来靶位未来靶位3RSV研究的重要性研究的重要性1第1页/共51页2022-5-9第2页/共51页2022-5-9第3页/共51页激机体产生血清中和抗体和激机体产生血清中和抗体和呼吸道粘膜的分泌型呼吸道粘膜的分泌型sIgAnN，F，P，NS2和和M等蛋白可等蛋白可诱导机体产生诱导机体产生CD8+细胞毒性细胞毒性T细胞细胞(CTLs)2022-5-9第4页/共51页2022-5-9第5页/共51页门诊住院病例数10501016样本咽拭子咽拭子或鼻咽吸取物检测

2、方法RT-PCR检测53.90%69.70%0%10%20%30%40%50%60%70%80% 总检出率（%）6.3610.110.9 113.830.98.931.723.217.210.45.84.32.611.92.805101520253035RHPAIHHHE门诊(n=1050)住院(n=1016)病毒种类检出率 （%）刘春艳，申昆玲等.2010至2012年门诊和住院儿童急性呼吸道感染病毒病原比较分析J.中华儿科杂志, 2013, 51(4):255-259.第6页/共51页2022-5-9第7页/共51页不明的猝不明的猝死死2022-5-9B. Paes & I. Mit

3、chell & A. Li & K. L. Lanctt Eur J Clin Microbiol Infect Dis (2012) 31:27032711第8页/共51页早产儿早产儿RSVRSV呼呼吸道感染第9页/共51页2022-5-9RSVRSV感感染染 继发继发感感染染 (30%50%) 院院内感内感染染第10页/共51页316见较重病例，男多于女见较重病例，男多于女。n抗抗体不能完体不能完全全防止感染防止感染，合合胞病毒的再感染极为常见，胞病毒的再感染极为常见，再感染发生率高达再感染发生率高达65%2022-5-9第11页/共51页genetic predispos

4、ition for it.2022-5-9第12页/共51页Jackson DJ. et al; Am J Respir Crit Care Med. 2008 Oct 1; 178(7):667-72OR=1.0OR=2.6OR=9.8OR=10.0*P0.05 vs.无+P0.05 vs. 仅RSV3岁前喘息6岁时的哮喘发生率%第13页/共51页Quizon A,Colin AA,Pelosi U,Rossi GA. Curr Pharm Des, 2012,18(21):3061-3085.第14页/共51页RSV感染有重要作用2022-5-9第15页/共51页RSV感染后很少或没有干扰

5、素的产生Respiratory syncytial virus nonstructural proteins decrease levels of multiple members of the cellular interferon pathwaysSwedan S, Musiyenko A, Barik S. PIV感染可抑制内源干扰素的产生Attenuating mutations in the P/C gene of human parainfluenza virus type 1 (HPIV1) vaccine candidates abrogate the inhibition o

6、f both induction and signaling of type I interferon (IFN) by wild-type HPIV1Van Cleve W, Amaro-Carambot E, Surman SR, et al. J Virol. 2009.Virology. 2006.stimulatingnuclearNS proteinRSVIFN stimulatingnuclearP/C genePIVInhibitingInhibitingIFN 第16页/共51页2022-5-9第17页/共51页2022-5-9 RJ Derscheid，MR Ackerma

7、nnVeterinary Pathology, 2013, 50(5):827-841 CME Saleeby，R Li，GW Somes，MK Dahmer，MW Quasney Journal of Pediatrics, 2010, 156(3):409-414第18页/共51页95,178 491 15,173 5,768 5,890 020000400006000080000100000120000RSV感染阳性组运德素雾化利巴韦林腹腔注射喜炎平腹腔注射炎琥宁腹腔注射重组人干扰素1b治疗RSV感染有重要作用雾雾化吸入运德素治疗化吸入运德素治疗RSVRSV感染感染，药药效显著效显著,

8、,且优于利巴韦林与中药注射剂且优于利巴韦林与中药注射剂正常对照正常对照组组感染模型感染模型组组运德素运德素(50 (50 g) g)* *利巴韦利巴韦林林 喜炎平喜炎平炎琥宁炎琥宁利巴韦林与中药注射剂利巴韦林与中药注射剂雾化吸入运德素治疗5天后，肺组织RSV病毒载量及电镜下肺组织切片观察 与腹腔注射利巴韦林、中药注射剂相比： 雾化运德素，肺组织RSV病毒载量下降最为明显； 雾化运德素，肺组织炎性损伤恢复最为显著。第19页/共51页正常对照组正常对照组感染模型组感染模型组运德素运德素(3.125 g)运德素运德素(12.5 g)运德素运德素(50 g)1. 随着药物剂量增加，肺组织病理性炎性损伤

9、表现逐渐减轻；2. 50 g 剂量组剂量组(人用剂人用剂量量4 g/kg)小鼠肺组织炎性损伤程度趋向正常，治疗效果最佳。1. 气管腔内大量分泌物及炎性细胞渗出；2. 肺泡壁明显增厚，可见大量炎性细胞浸润；3. 毛细血管明显扩张充血。RSV感染病理改感染病理改变变用药后改用药后改善善21重组人干扰素1b治疗第20页/共51页正常对照组正常对照组RSV感染阳性组感染阳性组运德素运德素(12.33 g)腹腔腹腔运德素运德素(12.5 g) 雾化雾化运德素运德素(25g) 雾雾化化利巴韦林腹腔利巴韦林腹腔喜炎平腹腔喜炎平腹腔炎琥宁腹腔炎琥宁腹腔22图示：干扰素图示：干扰素 25g组效果组效果炎琥宁、喜

10、炎平。炎琥宁、喜炎平。第21页/共51页组别组别RSV载量载量阴性对照组阴性对照组RSV感染阳性组感染阳性组95178.2513097.17运德素腹腔注射运德素腹腔注射30704.7812458.06运德素雾化运德素雾化（12.5g）6739.852590.18运德素雾化运德素雾化（25g）491.2155.27利巴韦林腹腔注利巴韦林腹腔注射射15173.072731.50喜炎平腹腔注射喜炎平腹腔注射5768.371973.51炎琥宁腹腔注射炎琥宁腹腔注射5889.681488.29F62.8P0.05运德素运德素25g组组(人用剂人用剂量量2g/kg)病毒载量最低病毒载量最低；抑制病毒效果抑

11、制病毒效果优于利优于利巴韦林、炎琥宁和喜炎巴韦林、炎琥宁和喜炎平平23第22页/共51页24组别CD3+CD4+(%)CD3+CD8+(%)CD3+CD4+/ CD3+CD8+正常对照组71.7001.05025.3751.2302.8330.178感染模型组79.2251.10317.0001.3274.7340.238运德素（3.125g）77.7631.35018.7630.8724.1540.245运德素（12.5g）76.0001.58619.3380.8773.9400.253运德素（50g）72.8251.36823.3131.1263.1330.219F值47.89571.01

12、391.915P值0.010.010.01 随着运德素剂量增加，免疫调节效果更加显著； 50g组（相当于人用4 4 g/kg g/kg ）恢复至正常状态运德素，有效恢复T淋巴细胞亚群的比例失调第23页/共51页25肺、肝、肾放射肺、肝、肾放射计数计数检测检测(单位：单位：CPM/g)雾雾化化吸吸入入肌肌肉肉注注射射 0.5h 2h 4h 8h 12h 0.5h 2h 4h 8h 12h 雾化吸入后，运德素在肺部的浓度高，且雾化吸入后，运德素在肺部的浓度高，且滞留时间长，滞留时间长，更利于发挥局部的治疗作用。更利于发挥局部的治疗作用。肌肉注射后，运德素主要通过肾脏代谢，在肌肉注射后，运德素主要通

13、过肾脏代谢，在肺部浓度很低，进入肺组织慢，且滞留时间肺部浓度很低，进入肺组织慢，且滞留时间短。短。第24页/共51页26肌肉注射雾化吸入研究表明，雾化吸入的运德素也会进入血液，但比肌肉注射缓慢，血药浓度平缓上升，使儿童易于耐受，不良反应更轻。0200040006000800010000120000.5h1h2h3h4h8h12hCPM/g医药导报，2013从血药浓度上看：雾化运德素入血更缓慢，应用更安全第25页/共51页0.6g1.0g1.5g2.0g3.0g4.0g 1组组 2组组 3组组 4组组 5组组 6组组 7组组 8组组 剂剂量量爬爬坡坡0.3g国家注册临床国家注册临床I I期安全试

14、验证明：期安全试验证明：雾化（雾化（4g/kg4g/kg）、肌注（）、肌注（2g/kg2g/kg），安全性），安全性、耐受性良好、耐受性良好 单剂量组：0.3-4.0g/kg 多剂量组：每日2次，间隔6h以上，连续雾化给药7日；观察指标结 果1. 生命体征呼吸、血压、脉搏均正常，且给药前后波动很小，极个别轻度发烧2. 胸片、心电图均基本正常3. 血、尿常规尿常规检查结果正常。一小部分受试患儿血小板高于正常值，判断为原感染疾病引起，与运德素药物治疗无关4. 血清生化未见有临床意义的改变5. 局部刺激呼吸道粘膜检查用药前后亦无变化第26页/共51页序号序号研究单位研究单位主要研究者主要研究者1 中

15、国医科大学附属盛京医院（PI）尚云晓2首都儿科研究所附属儿童医院曹玲3 上海市儿童医院陆敏4南京医科大学附属南京儿童医院赵德育5重庆医科大学附属儿童医院黄英6昆明医科大学附属儿童医院吴澄清7武汉市儿童医院王莹8江西省儿童医院 李岚9 兰州大学第一医院李宇宁10绵阳市中心医院余静11四川大学华西第二医院刘瀚旻雾化吸入重组人干扰素1b治疗小儿急性毛细支气管炎多中心研究中国实用儿科杂志. 2014第27页/共51页29病例入选：2岁（最小患儿45d），发病96h内的毛支患儿；无其他合并症 对照组 ：100例，基础用药：雾化吸入5%沙丁胺醇0.25ml和布地奈德0.5mg。 低剂量组 ：100例，基础

16、用药+ 运德素2.0g /kg次雾化吸入 ，每日2次，疗程5-7天，观察7天。 高剂量组 ：100例，基础用药+ 运德素4.0g /kg次雾化吸入，每日2次，疗程5-7天，观察7天。 第28页/共51页1. 提高全部疗效指标（喘息、喘鸣音、三凹症、咳嗽、水泡音）的总改善率2. 对主要疗效指标（喘息、喘鸣音、三凹症）的改善更明显；3. 4 g / k g 组 疗 效 优 于 2 g/kg组*组间比较P0.05尚云晓等中国实用儿科杂志，2014.7580859095100所有疗效指标 主要疗效指标总改善率（%）对照组2g/kg组4g/kg组*第29页/共51页0.0 0.2 0.4 0.6 0.8

17、 1.0 1.2 1.4 治疗前第1天第2天第3天第4天第5天第6天第7天对照组低剂量组用药组和对照组主要症状改善每日评分均值 0.0 0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 治第第第对照组低剂量组0.0 0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 治第第第对照组低剂量组喘喘息息喘鸣喘鸣音音三凹三凹征征u 雾化运德素第2天，症状评分呈现明显的下降；u 治疗至第34天时，用药组疗效指标改善最为明显；u 治疗结束时，用药组的改善仍显著优于对照组。31第30页/共51页喘息喘鸣音三凹征毛细支气管患儿主要症状消失时间的比较对照组（n=109）2g组（n=110）4g组（n=110）1.0-1.6天0.9-

18、1.7天1.4-2.1天第31页/共51页1.早期用药和晚期用药均呈现出良好的改善率；2.早期用药优于晚期用药，并且高、低剂量组之间也有显著性差异P0.05。所有疗效指标总改善率75.0%80.0%85.0%90.0%95.0%100.0%发发对照组* * * * * 组间比较p0.05-9%-12.3%-7.8%-5.9%33早期用药和晚期用药的疗效比较第32页/共51页主主要要疗疗效效指指标标总总改改善善率率70.0%75.0%80.0%85.0%90.0%95.0%100.0%RSV阳性RSV阴性对照组2g 组4g 组* * * * * * 组间比较组间比较p0.0534RSV阳性或RS

19、V阴性，雾化运德素治疗组较对照组均有显著差异RSV阳性毛支患儿疗效更显著第33页/共51页受染严重细胞：(清除）整体水平上，免疫清除病毒正常细胞（防御）激发抗病毒状态已感染细胞（抑制）抑制病毒复制35第34页/共51页36干扰素受干扰素受体体干扰素干扰素2-5A合成合成酶酶磷酸二酯磷酸二酯酶酶蛋白激酶蛋白激酶CTLCTL细胞细胞免疫应答免疫应答NKNK细胞细胞巨噬细胞巨噬细胞病毒病毒mRNAmRNA降解降解病毒蛋白病毒蛋白翻译抑制翻译抑制病毒蛋白病毒蛋白合成起始合成起始抑制抑制促进增殖促进增殖激活杀伤激活杀伤增强吞噬增强吞噬清除病毒清除病毒组组织织细细胞胞抗病毒蛋白抗病毒蛋白免免疫疫细细胞胞抑

20、制病毒复抑制病毒复制制增强免疫清增强免疫清除除第35页/共51页撰稿专家重重组人干扰素组人干扰素1b1b在儿在儿科科的的 临临床应用专家共床应用专家共识识第36页/共51页疾病给药方法用药方案推荐剂型疗程推荐等级毛细支气管炎雾化24 g/（kg次），2次/d推荐IFN-1b注射液57dA级肌注1 g/（kg次），1次/d35dB级病毒性肺炎雾化轻型：12 g/（kg次）,2次/d重型：24 g/（kg次）,2次/d推荐IFN-1b注射液57dA级肌注轻型：1 g/（kg次），1次/d重型：2 g/（kg次），1次/d57dA级手足口病雾化轻型：12 g/（kg次）,2次/d重型：24 g/（k

21、g次）,2次/d推荐IFN-1b注射液37dA级肌注轻型：1 g/（kg次），1次/d重型：2 g/（kg次），1次/d35 dA级轮状病毒性肠炎肌注1 g/（kg次），1次/d 35dA级“共识”首次规范化干扰素1b（运德素）合理用药第37页/共51页疾病给药方法用药方案推荐剂型疗程推荐等级病毒性脑炎肌注1 g/（kg次），1次/d 35dB级传染性单核细胞增多症肌注12 g/（kg次），1次/d57dB级 雾化24 g/（kg次），2次/d推荐IFN-1b注射液57d C级水痘肌注12 g/（kg次），1次/d 35dB级麻疹肌注12 g/（kg次），1次/d 35dC级流行性腮腺炎肌注1

22、 g/（kg次），1次/d 35dC级慢性乙肝肌注12 g/（kg次），3 次/周 24-48周C级慢性丙肝肌注12 g/（kg次），3次/周， 24-48周C级“共识”首次规范化干扰素1b（运德素）合理用药第38页/共51页2022-5-9第39页/共51页。女将自然将抗体转移给胎儿，可以早期被女将自然将抗体转移给胎儿，可以早期被动保护婴儿免受动保护婴儿免受RSV感染。感染。n葛葛兰素史克兰素史克GlaxoSmithKline的的RSV疫苗进疫苗进入一期临床，该疫苗为真核入一期临床，该疫苗为真核CHO细胞表达细胞表达的可溶性的可溶性RSVF多肽多肽2022-5-9第40页/共51页的治的治疗

23、的疗的效效应和后效应应和后效应n重组人干扰素重组人干扰素1b1b治疗治疗RSVRSV感感染及干染及干预哮喘进程预哮喘进程的作用的作用2022-5-9第41页/共51页感谢聆听Thank you！第42页/共51页激机体产生血清中和抗体和激机体产生血清中和抗体和呼吸道粘膜的分泌型呼吸道粘膜的分泌型sIgAnN，F，P，NS2和和M等蛋白可等蛋白可诱导机体产生诱导机体产生CD8+细胞毒性细胞毒性T细胞细胞(CTLs)2022-5-9第43页/共51页门诊住院病例数10501016样本咽拭子咽拭子或鼻咽吸取物检测方法RT-PCR检测53.90%69.70%0%10%20%30%40%50%60%70

24、%80% 总检出率（%）6.3610.110.9 113.830.98.931.723.217.210.45.84.32.611.92.805101520253035RHPAIHHHE门诊(n=1050)住院(n=1016)病毒种类检出率 （%）刘春艳，申昆玲等.2010至2012年门诊和住院儿童急性呼吸道感染病毒病原比较分析J.中华儿科杂志, 2013, 51(4):255-259.第44页/共51页门诊住院病例数10501016样本咽拭子咽拭子或鼻咽吸取物检测方法RT-PCR检测53.90%69.70%0%10%20%30%40%50%60%70%80% 总检出率（%）6.3610.110.9 113.830.98.931.723.217.210.45.84.32.611.92.805101520253035RHPAIHHHE门诊(n=1050)住院(n=1016)病毒种类检出率 （%）刘春艳，申昆玲等.2010至2012年门诊和住院儿童急性呼吸道感染病毒病原比较分析J.中华儿科杂志, 2013, 51(4):255-259.第45页/共51页门诊住院病例数10501016样本咽拭子咽拭子或鼻咽吸取物检测方法RT-PCR检测53.90%69.70%0%10%20%30%40%50%60%70%80% 总检出率（%）6.3610.110.9 113.