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1、细菌的革兰氏染色及观察细菌的革兰氏染色及观察生物工程学院生物工程学院 李中媛李中媛2017.10.27一、实验目的一、实验目的了解细菌革兰氏染色的原理了解细菌革兰氏染色的原理学习并掌握革兰氏染色的方法学习并掌握革兰氏染色的方法二、基本原理二、基本原理革兰氏革兰氏染色是染色是细菌细菌鉴定和分类的重要性状鉴定和分类的重要性状 Gram stain 紫色紫色 红色红色 革革兰氏兰氏阳性阳性 革兰氏阴性革兰氏阴性 G+ G- 细胞壁成分和结构不同 肽聚糖+脂质二、基本原理二、基本原理95%酒精脱色酒精脱色 G+ G-固定固定结晶结晶紫初染紫初染碘碘液媒染液媒染番红复染番红复染95%乙醇脱色乙醇脱色三、

2、实验材料 试剂：草酸铵结晶紫，碘液，番红，95%乙醇，载玻片，显微镜等 菌种：大肠杆菌 枯草芽孢杆菌 操作流程：操作流程： (1) 涂片 (2) 固定 (3) 染色：用草酸铵结晶紫染色1min后水洗。 (4) 媒染：加路哥氏碘液作用1min后水洗、吸干。 (5) 脱色：用95%乙醇脱色直至滴加的酒精不呈紫色为止。一般脱色时间约为30s。脱色时可轻轻摇动载片使乙醇分布均匀。水洗、吸干。 (6) 复染：加0.5%的番红染色液染色1030秒，水洗。 (7) 干燥、油镜镜检观察。四、实验结果四、实验结果 通过观察大肠杆菌和枯草芽孢杆菌的染色结果判通过观察大肠杆菌和枯草芽孢杆菌的染色结果判断其是革兰氏阴性菌还是阳性菌断其是革兰氏阴性菌还是阳性菌五：思考题五：思考题1、革兰氏染色的关键步骤是什么？、革兰氏染色的关键步骤是什么？2、当对未知菌进行革兰氏染色鉴定时，如何保证、当对未知菌进行革兰氏染色

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