分光光度计的使用

1、分光光度计的使用分光光度计的使用张国川光源光源单色器单色器吸收池吸收池检测系统检测系统稳压电源稳压电源通过棱镜或光栅得到一束近似的单色光通过棱镜或光栅得到一束近似的单色光.波长可调波长可调, 故选择性好故选择性好, 准确度高准确度高.分光光度法的主要部件框架分光光度法的主要部件框架（1 1）分光光度计的主要部件）分光光度计的主要部件光源光源：发出所需波长范围内的连续光谱，有足够：发出所需波长范围内的连续光谱，有足够 的光强度的光强度, ,稳定。稳定。 可见光区：可见光区：钨灯，碘钨灯钨灯，碘钨灯(320(3202500nm)2500nm) 紫外区：紫外区：氢灯，氘灯氢灯，氘灯(180(1803

2、75nm)375nm)单色器单色器：将光源发出的连续光谱分解为单色光的：将光源发出的连续光谱分解为单色光的 装置。装置。棱镜棱镜: :玻璃玻璃3503503200nm, 3200nm, 石英石英1851854000nm4000nm光栅光栅: :波长范围宽波长范围宽, , 色散均匀色散均匀, ,分辨性能好分辨性能好, , 使用方便使用方便吸收池吸收池：( (比色皿比色皿) )用于盛待测及参比溶液。用于盛待测及参比溶液。 可见光区：光学玻璃池可见光区：光学玻璃池 紫外区：石英池紫外区：石英池检测器检测器：利用光电效应，将光能转换成：利用光电效应，将光能转换成 电流信号。电流信号。 光电池，光电管，

3、光电倍增管光电池，光电管，光电倍增管指示器指示器： 低档仪器：刻度显示低档仪器：刻度显示 中高档仪器：数字显示，自动扫描记录中高档仪器：数字显示，自动扫描记录（2）分光光度计的类型）分光光度计的类型722722型分光光度计结构方框图型分光光度计结构方框图光光源源吸收池吸收池检测系统检测系统分光分光系统系统 分光光度计的使用分光光度计的使用 （1）选择波长）选择波长拧动此旋钮拧动此旋钮至所需波长至所需波长（2）将测试溶液装入吸收池（操作如下）将测试溶液装入吸收池（操作如下） 手拿毛玻璃面，手拿毛玻璃面， 先用待装液漂洗先用待装液漂洗 3 遍，遍， 装入量为吸收池高度的装入量为吸收池高度的 3 /

4、 4， 透光面透光面毛面毛面容容量量的的3/4用镜头纸擦净透光面，用镜头纸擦净透光面，不要将纸团成球，不要将纸团成球，不要来回擦，不要来回擦，而要向同一方向擦。而要向同一方向擦。所有关于吸收池的操作所有关于吸收池的操作均在实验台面之上的空均在实验台面之上的空间进行，这样可保证一间进行，这样可保证一旦吸收池滑落时掉在台旦吸收池滑落时掉在台面上，不至于摔破。面上，不至于摔破。通过手柄将池架推到头，通过手柄将池架推到头，此时黑体对着入射光。此时黑体对着入射光。遮光遮光黑体黑体2 号号1 号号0 号号放入吸收池架（透光面向着透光窗一侧）。放入吸收池架（透光面向着透光窗一侧）。放置顺序为：放置顺序为：

5、透透光光窗窗然后盖上盖子。然后盖上盖子。按按 MODE 键键（3）调节投射比为）调节投射比为 0.000至投射比（至投射比（T）灯亮）灯亮T 方式方式“0%”键键按一下按一下“0%”键，此时仪器自动校正后显示键，此时仪器自动校正后显示“0.000”。（有的分光光度计没有黑体，需要在打开试样（有的分光光度计没有黑体，需要在打开试样室盖（起黑体的作用）的情况下调室盖（起黑体的作用）的情况下调 T = 0.000）（4）调透射比为）调透射比为 100%将手柄向操作者方向拉出一档（听到将手柄向操作者方向拉出一档（听到“咔嚓咔嚓”一一声），此时参比（声），此时参比（0 号）溶液进入光路。号）溶液进入光路

6、。按一下按一下“100% T”键，键，此时仪器显示此时仪器显示“BLA”表示仪器正在自动校表示仪器正在自动校正，校正完毕后显示正，校正完毕后显示“100.0”。100% TB L A100.0（5）重复（验证）（）重复（验证）（3）、（）、（4）两步，直至透）两步，直至透射比为射比为 0.000 和和 100% 不变。不变。 按按“MODE”键至键至“ABSORBANCE”灯亮（此灯亮（此时转换到测吸光度功能上）。时转换到测吸光度功能上）。将手柄向操作者方向再拉出一档（听到将手柄向操作者方向再拉出一档（听到“咔嚓咔嚓”一声），此时被测（一声），此时被测（1 号）溶液进入光路。号）溶液进入光路。

7、此时仪器所显示的数值即为此时仪器所显示的数值即为 1 号被测溶液的吸光号被测溶液的吸光度值（记录下来）。度值（记录下来）。- 0.0000.186再拉出一档，仪器所显示的数值为再拉出一档，仪器所显示的数值为 2 号溶液的吸号溶液的吸光度值。光度值。 将将 1、2 号吸收池换装入号吸收池换装入 3 、4 号溶液（黑体号溶液（黑体和和 0 号参比溶液不动），然后同法测定各溶液的号参比溶液不动），然后同法测定各溶液的吸光度、并一一记录下来，记录格式如下表。吸光度、并一一记录下来，记录格式如下表。1Lmg/(Fe) 1Lmg/(Fe) 吸吸光光度度(A)绘制标准曲线：绘制标准曲线： 根据未知溶液（根据未知溶液（6 号号溶液）的吸光度从标准溶液）的吸光度从标准曲线上查得试液浓度。曲线上查得试液浓度。原试液含铁质量浓度原试液含铁质量浓度 = 查得的浓度查得的浓度 稀释倍数稀释倍数1Lmg550 查查得得 实验报告格式实验报告格式一、实验目的一、实验目的 二、实验原理二、实验原理 三、实验步骤三、实验步骤mL/ClNH4V四、数据记录四、数据记录1Lmg/(Fe) 五、标准曲线（图）五、标准曲线（图） 六、从标准曲线上查得的六、从标准曲线上查