氨基酸育种及扩大培养

1、1会计学氨基酸育种及扩大培养氨基酸育种及扩大培养CorynebacteriumBrevibacteriumArthrobacterMicrobacterium涂 片干 燥固 定染色1min水洗、吸干镜 检谷氨酸菌种结晶紫染色过程示意图传代数246810遗传标记谷氨酸/g/L79.3479.2679.1779.2179.39天津短杆菌T613的谷氨酸发酵生产培养基成分成分斜面斜面/ %摇瓶种子摇瓶种子/ %二级种子二级种子/ %发酵发酵/ %蛋白质蛋白质1牛肉膏牛肉膏0.5NaCl0.5葡萄糖葡萄糖0.12.52.5(淀粉水解糖淀粉水解糖)1315(淀粉水解糖淀粉水解糖)玉米浆玉米浆0.910.

2、6液液 氨氨K2HPO43H2O0.10.1MgSO47H2O0.040.060.06Na2HPO412H2O0.15KCl0.05琼脂琼脂2pH76.86.87各级种子的质量要求指标指标斜面种子斜面种子一级种子一级种子二级种子二级种子种龄种龄培养培养1824h，斜面菌种，斜面菌种一般只传三次一般只传三次12h78hpH/6.40.16.87.2光密度光密度/净增净增OD0.5以上以上净增净增OD0.5以上以上残糖残糖/0.5%消耗消耗1%左右左右无菌检查无菌检查无无无无无无噬菌体检查噬菌体检查无无无无无无镜检镜检菌体生长均匀、粗壮、菌体生长均匀、粗壮、革兰氏阳性反应革兰氏阳性反应菌体生长均匀

3、、粗壮、菌体生长均匀、粗壮、革兰氏阳性反应革兰氏阳性反应菌体生长均匀、粗壮、菌体生长均匀、粗壮、革兰氏阳性反应革兰氏阳性反应种子一旦移入发酵罐后也能比较容易适种子一旦移入发酵罐后也能比较容易适应发酵罐的培养条件。应发酵罐的培养条件。n发酵培养基一般比较浓，而种子培养基发酵培养基一般比较浓，而种子培养基以略稀薄为宜。以略稀薄为宜。育种标记育种标记育种目的育种目的备注备注Leu-切断切断L-亮氨酸的支路代谢。亮氨酸的支路代谢。Ile-切断切断L-异亮氨酸的支路代谢。异亮氨酸的支路代谢。2-TAr解除解除L-缬氨酸对乙酰羟基酸合成酶的缬氨酸对乙酰羟基酸合成酶的反馈抑制作用；反馈抑制作用； 2-TA是

4、是L-亮氨酸和亮氨酸和L-缬氨酸的结构类似缬氨酸的结构类似物。物。-ABr解除解除L-缬氨酸对乙酰羟基酸合成酶的缬氨酸对乙酰羟基酸合成酶的反馈抑制作用。反馈抑制作用。-AB是是L-缬氨酸的结缬氨酸的结构类似物。构类似物。SGr增强菌体必需生长因子四氢叶酸的生增强菌体必需生长因子四氢叶酸的生物合成，从而促进氨基酸的生物合物合成，从而促进氨基酸的生物合成。成。SG是对氨基苯甲酸的是对氨基苯甲酸的结构类似物。结构类似物。培养基培养基菌株生长情况菌株生长情况基本培养基基本培养基生长生长完全培养基完全培养基生长生长完全培养基完全培养基2%磺胺胍磺胺胍不生长不生长补充培养基补充培养基2%-AB不生长不生长补充培养基补充培养基1%2-TA不生长不生长%100ABA%100BABC原生质体形成率(%)=原生质体再生率(%)=式中A-B为原生质体形成数，C-B为原生质体再生数天津短杆菌T613的谷氨酸发酵生产培养基成分成分斜面斜面/ %摇瓶种子摇瓶种子/ %二级种子二级种子/ %发酵发酵/ %蛋白质蛋白质1牛肉膏牛肉膏0.5NaCl0.5葡萄糖葡萄糖0.12.52.5(淀粉水解糖淀粉水解糖)1315(淀粉水解糖淀粉水解糖)玉米浆玉米浆0.910.6液液 氨氨