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文档简介
1、文献阅读整理 超声波协同微波提取黑小麦色素的工艺优化1. 最佳提取工艺条件为液料比11.9 mL/g,提取时间121 s和微波功率299 W,在此条件下,吸光值达0.704。工艺稳定可靠,可在生产中应用。2. 超声波协同微波提取作为一种优良的提取方法,具有操作简便快捷、 提取时间短、 提出率高等特点, 目前已广泛应用在生物活性物质的提取方面 。3.原料与试剂黑小麦麸皮,其它试剂均为分析纯4.方法(1)超声波协同微波提取称取3 g黑小麦麸皮于100 mL特制三角瓶中,再加入一定体积一定浓度的乙醇溶液后,抽滤、定容、测定。(2)最大吸收波长的确定用1.0 cm比色皿,在狭缝宽度为2 nm,采样间隔
2、为0.50 nm,扫描速度为快速的仪器条件下,用TU-1810紫外分光光度计对色素从400 nm700 nm进行自动光谱扫描。 由图1可知,该色素在532 nm处有最大吸收。因此,在此波长下测定其吸光度值。(3) 单因素试验分别以乙醇浓度、液料比、提取时间和微波功率为影响因素考察其对吸光值的影响。 根据Box-Behnken试验设计原理,在单因素试验的基础上,选取影响显著的液料比、提取时间和微波功率3个影响因素,采用3因素3水平的响应曲面分析方法,试验因素与水平设计见表1。共17个试验点:其中12个为析因点,5个为中心点。单因素试验2.1.1 2.1.1 乙醇浓度的影响乙醇浓度的影响试验设定液
3、料比10 mL/g、微波时间120 s和微波功率300 W,考虑不同乙醇浓度对得率影响,结果见图2。从图2可知,当乙醇浓度小于50%时,随着乙醇浓度的增加,吸光值随之增加;在50%时达到峰值,这是因为色素是有一定极性的化合物,根据相似相溶原理,当提取剂的极性与此色素的极性更加接近时,从而使吸光值最大。因此在此选择乙醇浓度50%进行后续试验。2.1.2 液料比影响 试验设定乙醇浓度50%、提取时间120 s和微波功率300 W,考虑不同液料比对得率影响,结果见图3。 由图3可知,随着液料比提高,黑小麦色素吸光值先增加后降低,在液料比为12 mL/g时吸光值达到最高。这主要是因为前期溶剂量越大,有
4、效成分浸出越完全,吸光值也就越大;但当溶剂过大时,会造成溶剂和能源的浪费。因此确定液料比为12 mL/g,作为后续试验继续考察。2.1.3 提取时间的影响 试验设定乙醇浓度50%、液料比10 mL/g和微波功率300 W,考虑不同提取时间对得率影响,结果见图4。由图4可知,随着提取时间的增加,黑小麦色素吸光值不断增加,在120 s时达到峰值。再继续增加时间,色素吸光值明显下降,这可能是因为随着超声时 间的增加,温度急剧升高,导致色素分解所致。因此选择提取时间120 s,作为后续试验继续考察。2.1.4 微波功率的影响试验设定乙醇浓度50%、液料比10 mL/g和提取时间120 s,考虑不同微波
5、功率对得率影响,结果见图5。由图5可知,随着微波功率的增加,物质的加热程度随着增加,黑小麦色素的吸光值也增加;在超声功率达到300 W之后,吸光值有减少趋势,这可能是由于高超声功率导致的热效应使得色素分解所致。因此确定超声功率300 W。宁夏枸杞子极性提取物在食用油高温氧化中的作用研究 本试验通过单因素试验和响应曲面分析,得到超声波协同微波提取黑小麦色素的最佳工艺条件为液料比11.9 mL/g,提取时间121 s和微波功率299 W,实际测得的吸光值为0.704,与理论预测值比较误差仅为 0.72%,该方法稳定可靠。黑粒小麦麸皮中花色苷的提取及性质研究 为了对我校自主培育的黑粒小麦麸皮中花色苷
6、进行开发利用, 本试验以黑粒小麦麸皮为原料,进行了花色苷的提取条件和理化性质的研究。结果表明, 用 pH 1 0、 40% 的乙醇作提取剂, 在料液比为 1 20(g/mL)、 70 条件下浸提80 min, 提取效果最好, 花色苷得率为14 5%;该花色苷可见光范围内的最大吸收波长为 525 nm, pH 对其影响明显, 温度影响不大, 60 以内比较稳定。Mg 2 + 、 K+和 Al 3 + 对该花色苷有很好的增色、 稳定作用, Ca 2 + 和 Fe 2 + 对其稳定作用影响不大, Cu 2 + 、 Zn 2 + 和 Fe 3 + 使其明显褪色。该花色苷耐氧化性、 耐还原性差, 耐光性
7、好。蔗糖、 柠檬酸对其有明显的褪色作用, 苯甲酸钠在低质量浓度( 0 1 mg/mL)时对其基本无影响, 在高质量浓度( 0 2 mg/mL)时有一定的褪色作用, 盐对其有一定的增色、 稳定作用。1 3 测试方法 花色苷提取率采用比色法:通过测定最大波长处的吸光度来计算总花色苷质量分数, 此方法被用来对黑米色素进行定量分析 5 。 其计算公式为: 总花色苷质量分数(mg/g) =A V N/(982 m) 式中:A 为吸光度;V 为定容体积/mL;98 2 为花第 26 卷第 10 期 李 伟等 黑粒小麦麸皮中花色苷的提取及性质研究色苷色的平均消光系数;N 为比色时的稀释倍数(本试验中 N 都
8、为 2);m 为被测样品的质量。 由上式可看出, 当样品质量、 定容体积、 比色时的稀释倍数相同时, 总花色苷质量分数与吸光度 A成正比, 为了描述方便在本文中直接用吸光度(A)代表花色苷质量分数。1 4 黑粒小麦麸皮中花色苷提取1 4 1 花色苷的提取光谱特征分析 称取黑粒小麦麸皮 0 500 g, 加入 10 00 mLpH 1 0的 40%乙醇溶液, 立即放入 HH 6 数显恒温水浴锅中 70 浸提 120 min。倒出色素液冷却至室温, 离心 10 min(转速4 800 r/min), 上清液为花色苷提取液, 用 UV 2550 紫外可见分光光度计在 200 600 nm 波长内扫描
9、其吸收光谱, 确定最大吸收波长(max )。1 4 2 正交试验 在前期单因素试验确定的最佳提取工艺条件基础上, 选取 L 9 (3 4 )正交试验表, 对乙醇体积分数、 提取温度、 时间和料液比在 4 个不同水平进行优化。1 5 黑粒小麦麸皮中花色苷理化性质的测定1 5 1 pH 对花色苷稳定性的影响取花色苷提取液 20 00 mL 7 份, 用 Na 2 HPO 4 柠檬酸缓冲液配制不同 pH 提取液, 测定溶液在 max处的吸光度(A), 放置室内暗处, 一周后在 max 处测溶液吸光度并观察其颜色变化。1 5 2 温度对花色苷稳定性的影响取花色苷提取液 200 mL 装于 5 个碘量瓶
10、中, 在不同温度水浴中各加热 3 h, 每隔 30 min 取一次样,迅速冷却后测定 max 处的吸光度, 并观察其颜色变化。1 5 3 光照对花色苷稳定性的影响取花色苷提取液 200 mL 分别装于 3 个碘量瓶中, 分别置于阳光直射处(夏季室外晴天)、 室内自然光处、 室内避光处保存, 定期测定其 max 处的吸光度,并观察其颜色变化。 1 5 4 金属离子对花色苷稳定性的影响 分别配制含 Mg 2 + 、 Al 3 + 、 Zn 2 + 、 Cu 2 + 、 K+、 Fe 2 + 、Fe 3 + 、 Ca 2 + 离子浓度达 5 0 104 mol/L 的溶液, 吸取花色苷提取液 5 0
11、0 mL, 加入金属离子溶液定容至15 00 mL。在室内暗处放置 7 d 后, 测定其 max 处的吸光度并观察其颜色变化。1 5 5 氧化还原剂对花色苷稳定性的影响 取 9 份 10 00 mL 花色苷提取液, 加入不同浓度的 VC(维生素 C)、 H 2 O 2 和 Na 2 SO 3 , 定容为 25 00mL, 测定其在 7 d 后 max 处的吸光度。1 5 6 食品添加剂对花色苷稳定性的影响 取 5 份 10 00 mL 花色苷提取液, 分别加不同浓度的食品添加剂(蔗糖、 盐、 苯甲酸钠、 柠檬酸)溶液15 00 mL, 测定其在 7 d 后 max 处的吸光度。2 结果与分析
12、2 1 光谱特征 由图1 可见, 以 pH 1 0 的乙醇浸提, 所得色素提取液在紫外光区280 285 nm 有较强的吸收峰, 为花色苷酰基结构的特征峰;在可见光范围内的最大吸收在 525 nm 处, 为典型的花青素光谱特性6 。自然界花青素多以与糖苷键结合的形式存在, 所以推断黑粒麸皮色素为花色苷类, 这与前人研究结果相符。图 1 黑粒小麦麸皮色素花色苷紫外全扫描图(200 800 nm) 2 2 提取条件的选择 由表 2 的极差分析可知, 各因素的影响力为B 提取温度 A 乙醇体积分数 D 料液比 C 提取时间, 据表 2 中的吸光度、 K 值和平均值(K/4)可知,最佳提取方案是 A
13、2 B 4 C 2 D 2 , 即乙醇体积分数为40%, 温度为 70 , 时间 80 min, 料液比为 1 20。按此优化条件重做一次试验, 得其平均吸光度值为 0983, 与正交试验最大值 0 997(A 2 B 4 C 3 D 2 )无显著差异(P 0 05), 但却更经济、 实用。此条件下花色苷得率为 14 50%。2 3 黑粒小麦麸皮花色苷理化性质2 3 1 pH 对花色苷稳定性的影响7 d 后在 pH 5 0 时, 该花色苷提取液为红色透明状, 稳定性较好;pH 5 0 时, 花色苷提取液颜色由浅红变黄绿色, 并出现混浊甚至沉淀现象, 说明花色苷在中性和碱性范围内色素稳定性很差,
14、 花色苷结构易发生变化。颜色变化是因为随 pH 变化, 花色苷在水溶液中存在形式为花徉盐式(红色) 查耳酮式(无色) 醌式(蓝色)。pH 越大, 花色苷的降解速度越快。由此说明, 花色苷在酸性条件下稳定性较好, 可作为酸性食品添加剂。2 3 2 温度对花色苷稳定性的影响 从图2 可以看出, 加热温度小于60 时, 温度及受热时间都对花色苷提取液的吸光度影响较小, 即较低温下花色苷对热表现出较好稳定性;而当加热温度高于 80 , 随着时间的延长, 花色苷吸光度明显下降, 说明花色苷在高温下稳定性差, 这可能是花色苷母体结构受热生成无色查尔酮式结构的缘故。 2 3 3 光照对花色苷稳定性的影响由图
15、 3 知, 花色苷溶液光照 3 d 内吸光值变化很小, 说明短时间内花色苷对光照不敏感;随着时间的延长, 花色苷溶液在光照贮存和避光贮存下, 吸光度均有一定幅度降低, 但在阳光直射条件下降低最明显, 说明光对花色苷有一定的破坏作用, 使用时要避光保存。图 3 光照对花色苷稳定性的影响2 3 4 金属离子对花色苷稳定性的影响图 4 结果表明, 金属离子对该花色苷的稳定性作用由大到小为:Mg 2 + K+ Al 3 + Ca 2 + Fe 2 + Cu 2 + Zn 2 + Fe 3 + , 其中 Mg 2 + 、 K+和 Al 3 + 对花色苷有很好的增色、 稳定作用;Ca 2 + 和 Fe 2
16、 + 对花色苷的稳定性影响不大;Cu 2 + 、 Zn 2 + 和 Fe 3 + 使花色苷明显褪色, 并伴有沉淀, 这可能是因为花色苷与金属离子形成了络合物, 因此, 在生产应用中应尽量避免与Cu 2 + 、 Zn 2 + 和 Fe 3 + 等金属离子的接触2 3 5 氧化还原剂对花色苷稳定性的影响由图 5 可见, 随着氧化剂 VC、 H 2 O 2 和还原剂Na 2 SO 3 浓度的增大, 花色苷的吸光度急剧下降, 颜色逐渐消退, 其中 Na 2 SO 3 影响最大, 0 5 mg/mL 就能使花色苷褪色, 原因是 SO 2 作用于花色苷类色素的苯并吡喃环的 4 位碳上, 生成了一种无色物质
17、,表明该色素耐氧化、 耐还原性差, 在使用时应尽量避免与氧化性或还原性物质接触。2 3 6 食品添加剂对花色苷稳定性的影响从表 4 可见, 加入一定浓度的 NaCl, 该花色苷溶液的吸光度从 0.849(对照)上升到 0 985, 增加了1284%, 说明 NaCl 对该花色苷有一定增色、 稳定作用;加入蔗糖和柠檬酸后, 该花色苷溶液的吸光分别降低了82 85% 和64 05% , 说明蔗糖和柠檬酸对表 4 食品添加剂对花色苷稳定性的影响该花色苷有明显的褪色作用, 且褪色作用随浓度增大而加强;当苯甲酸钠质量浓度低于 0 1 mg/mL 时,花色苷溶液吸光度基本无变化, 高于 0 2 mg/mL
18、 时,吸光度降低了 6 42%, 但随着加入浓度的增大基本保持不变, 说明苯甲酸钠质量浓度在高于0 2 mg/mL时对该花色苷有一定的褪色作用。3 结论 黑粒小麦麸皮中花色苷提取的最佳工艺为:pH 1 0、 40% 的乙醇作提取剂, 在料液比为 1 20(g/mL)、 70 条件下恒温浸提 80 min, 提取效果较好, 得率可达 14 50%。黑粒小麦麸皮中花色苷可见光范围内的最大吸收波长为 525 nm, pH 对其影响明显, 在酸性溶液中稳定, 而在碱性溶液中不稳定;该花色苷耐氧化性、耐还原性差, 而耐光性好, 对热有一定的耐受性;Mg 2 + 、 K+、 Al 3 + 对其有很好的增色
19、稳定作用, Ca 2 + 和Fe 2 + 对其影响不大, Cu 2 + 、 Zn 2 + 、 Fe 3 + 对其有明显的褪色作用。NaCl 对该花色苷有一定的增色、 稳定作用, 蔗糖、 柠檬酸对其有明显的褪色作用, 苯甲酸钠在低质量浓度(0 1 mg/mL)时对其基本无影响, 在高质量浓度(02 mg/mL)时对其有一定的褪色作用。蓝、紫粒小麦籽粒花色苷组成分1.1 试验材料 黑小麦 76、蓝粒小麦、紫繁 3、远 5987-88 共 4个小麦品种(系)均由山西省农业科学院作物遗传研究所孙善澄先生提供.1.2 小麦花色苷样品提取与净化 花色苷从全麦粉中超声波提取 24,28 ,称取全麦粉2.00
20、 g,加入 10 mL 90%甲醇水溶液(含 0.5%甲酸),超声提取 10 min,2 000 r/min 离心 5 min,重复提取 3次,合并上清液。40条件下减压浓缩去除甲醇,然后在 40水浴条件下氮吹,尽量除尽甲醇,再加入含5 mL 0.1%甲酸的酸化水, 旋涡震荡, 使色素完全溶于水中,待净化处理。SPE C 18 柱依次用 0.1%甲酸酸化甲醇 5 mL、 0.1%甲酸酸化水 5 mL 活化,上样,C 18 吸附花色苷,然后用 0.1%甲酸的酸化水 10 mL 清洗柱,最后用含 0.1%甲酸的酸化甲醇 5 mL 洗脱花色苷,在 40水浴的氮吹仪上氮气吹干。用 2 mL 含 0.1
21、%甲酸的酸化水溶解沉淀,经 0.22 m 滤膜过滤后上样。1.3 花色苷分离与鉴定梯度洗脱,流动相 A:6%甲酸水溶液, 流动相 B: 乙腈, 06.0 min 由 100%的A变为4%的B, 6.010.0 min由96%的A变为12%的 B,10.030.0 min 由 88%的 A 变为 25%的 B,30.035.0 min 由 75%的 A 变为 90%的 B, 35.038.0min 由 10%的 A 变为 4%的 B, 38.040.0 min 由 96%的 A 变为 100%的 A。 流速 0.3 mLmin -1 , 进样体积 10.0L。 光电二极管阵列检测器扫描范围为 2
22、00800 nm蓝、紫粒小麦中的花色苷种类 分别对黑小麦 76、蓝粒小麦、紫繁 3、远 5987-88小麦籽粒的花色苷提取物进行全扫描、母离子扫描和子离子扫描(表),在蓝、紫粒小麦中鉴定出 14 种不同的花色苷,其中 6#和 14#、7#和 12#、8#和 15#具有相似的质谱特性,但在色谱保留时间和光谱学特性上不同的花色苷单体。其中 6#和 14#为芍药素己糖苷,7#和 12#为芍药素芦丁苷,8#和 13#为锦葵色素芦丁苷。3 讨论花色苷的一般质谱特性 本研究应用液相色谱串联质谱法,通过液相色谱分离,质谱全扫描、母离子扫描,子离子扫描,对蓝、紫粒小麦籽粒中的花色苷进行了分离与鉴定。子离子扫描
23、具有选择性,质谱中的子离子只来自特定的母离子,通过分析母离子的特征碎片以获得化合物的结构信息。子离子扫描技术已被广泛应用于花色苷的鉴定及表征。在蓝、紫粒小麦籽粒中花色苷的子离子质谱碎片与花色苷标准品生成的子离子质谱碎片相同,进一步印证所分离鉴定的蓝、紫粒小麦籽粒中花色苷的组成。母离子扫描,质谱中所有的母离子只能来自于产生相同子离子特定的母离子,母离子扫描技术用以确证子离子扫描所获得的结构信息。 全扫描 (full scan)用来寻找花色苷的特征母离子。这些技术的应用对复杂基质中不同的花色苷化合物鉴定及表征提供有力的技术手段。4 结论 蓝、紫粒小麦籽粒花色苷组成成分的研究对于揭示蓝、紫粒小麦保健
24、功能的物质基础和作用机制具有重要意义,同时对于充分发掘花色苷含量丰富的小麦品种,提高小麦的营养品质和保健功能,为小麦育种和相关基因克隆提供理论依据也具有重要的现实意义。 应用超高效液相色谱配以串联质谱和二极管阵列检测技术, 在蓝、 紫粒小麦籽粒中共鉴定出 14 种花色苷类化合物,分别为飞燕草色素-己糖苷、飞燕草色素芦丁苷、矢车菊-己糖苷、矢车菊素-芦丁苷、牵牛花色素-芦丁苷、芍药素-己糖苷、芍药素-芦丁苷、锦葵色素-芦丁苷、矢车菊素-丙二酰葡萄糖苷、芍药素-丙二酰-葡萄糖苷、矢车菊-(未鉴定出)、芍药素-芦丁苷、锦葵色素-芦丁苷、芍药素-己糖苷。4 个不同品系的小麦花色苷含量相比:蓝粒小麦紫繁
25、 3远 5987-88黑小麦 76。矢车菊-己糖苷、矢车菊素-芦丁苷为 4 个小麦品系中共同含有的单体花色苷。蓝粒小麦、远 5987-88 与紫繁 3 中均含有锦葵色素-芦丁苷,远 5987-88 中含量最高,蓝粒小麦次之,紫繁 3 中最少。小麦黑 76 和远 5987-88 中芍药素赵善仓等:蓝、紫粒小麦籽粒花色苷组成分析 4079-丙二酰-葡萄糖苷第 1 主要单体花色苷,而紫繁 3 的第 1 主要单体花色苷则为矢车菊素-丙二酰葡萄糖苷,蓝粒小麦的第 1 主要单体花色苷为飞燕草色素-己糖苷。天 然 黑 小 麦 色 素 研 究 进 展1 黑小麦色素结构与性质1.1 化学结构 经紫外光谱、 红外
26、光谱、 质谱、 核磁共振等分析仪器鉴定, BKWP 属花色苷类色素。蓝粒小麦中飞燕草色素 3 葡萄糖苷 (delphinidin 3 glucoside)是主要花色苷; 紫粒小麦中矢车菊 3 葡萄糖苷 (cyanidin glucoside) 是主要花色苷, 黑粒小麦中芍药素丙二酰葡萄糖苷是主要花色苷。不同粒色、 不同品种黑小麦, 其 BKWP 花色苷单体种类也有所不同1.2 理化性质1.2.1 物理性质溶解性: 该色素易溶于水、 甲醇、 乙醇、 乙酸、 甲醛等极性溶剂, 并呈现不同程度红色; 不溶于乙醚、 石油醚、 氯仿、 CCl 4 、 丙酮、 正丁醇、 异戊醇、 异丙醇、 吡啶等非极性、
27、 弱极性溶剂。光谱特性: 蓝、 紫、 黑粒小麦色素溶液在可见光区最大峰值都在 530 nm 左右, 在紫外区域有两个强烈吸收峰, 分别在 320 nm 和 270 nm 附近。实验条件或黑麦品种不同, 最大吸收波长有所变化。对乌麦 526、漯珍 1 号、 黑麦 76 品种研究表明, 在 pH3 时, 以乙醇为提取剂, 往往红移 10 nm, max 较高; 以水为溶剂, 往往蓝移 15 nm, max 较低。 1.2.2 pH 值对色素影响 BKWP对酸碱性变化较敏感, 符合花色苷类色素通性。在 pH3 时性能稳定, BKWP 保持鲜亮红色; pH4时色素不稳定, 色素溶液逐渐有絮状物出现并沉
28、积,而后逐渐整体混浊; pH7时, 吸收峰消失, 颜色变暗。色素在酸性条件下呈红色; 碱性条件下为绿色。随 pH增大, 颜色依次为红色浅红色绿色.2.3 耐热性和耐光性 该色素在 80 以下保持稳定, 耐低温、 不耐高温。pH=2、 75 处理 1 h, 色素保存率 96.33%; 85 处理1 h, 色素保存率 93.35% 。pH=3 时, 20 80 处理 3 h, 色素吸光值和颜色变化不明显, 温度升至 100 时, 色素吸光值和颜色发生明显变化。在 pH=1 时热稳定性强, 在 pH=35 时稍有降解, 在 65 95 范围内降解逐渐加强。加入 SO 2 对色素有稳定效果,SO 2
29、最佳浓度为 13 mg/g 。 对光照较敏感, 随光照时间和光照方式不同, 会发生不同程度降解。在 pH=1 时, 色素乙醇溶液在阳光直射、 日光灯下和暗处, 5.5d 色素保存率分别为84.0%、 94.1% 和 95.7% 11 。pH=3 色素乙醇溶液, 处室温、 自然光下放置 45 d, 吸光度下降不超过 5% 21 。但也有研究表明, 在pH3时, BKWP水溶液对光较敏感,在光照条件下易分解, 会产生褪色现象, 5 d 后色素保存率约 20% 左右。在避光条件下其稳定性较好。 1.2.4 1.2.4 氧化剂与还原剂影响氧化剂与还原剂影响 氧化剂、 还原剂对 BKWP 具有一定降解作
30、用。在pH=3 时, 加入 1040 mg/mL H 2 O 2 后, 色素吸光值下降, 且浓度越大, 色素吸光值越低, 色素色泽越浅。这是因 H 2 O 2 进攻花色苷 C 2 位, 使花色苷开环, 生成查尔酮, 从而进一步降解为无色酯和香豆酸衍生物。加入 1040 mg/mL NaHSO 3 后, 色素吸光值明显下降,并使该色素迅速变淡, 且随浓度增加, 色素保留率越低; 可能是亚硫酸氢根作用于花色苷 C 4 位生成无色复合物缘之故。因此, 使用 BKWP 时应避免与强氧化剂、 还原剂接触。1.2.5 1.2.5 金属离子影响金属离子影响 K + 、 Na + 、 Ca 2+ 、 Mg 2
31、+ 、 Zn 2+ 、 Fe 2+ 对色素无不良影响, 能稳定保持色素鲜艳色泽, 主要是花色苷与金属元素发生络合, 形成络合物缘故。Cu 2+ 对色素有一定影响, 可使溶液变绿色; Ba 2+ 、 Al 3+ 、 Fe3+影响较大,加入20 g/mL放置24 h后, 色素溶液出现浑浊。因此, 在 BKWP 加工、 使用及储藏过程中应避免与铁、铜等容器接触。1.2.6 1.2.6 食品添加剂影响食品添加剂影响1040 mg/mL 食盐、 蔗糖、 柠檬酸对 BKWP 有一定增色、 稳定作用, 增色作用随浓度增大而增强。色素对 Vc 较敏感, 在 Vc 含量小于 1% 低浓度下影响较小, 加入 Vc
32、(1040 mg/mL) 1 h 后, 色素溶液吸光度下降、 颜色变淡; 浓度越大、 褪色越明显, 这可能是高浓度 Vc 被氧化后, 生成 H 2 O 2 , H 2 O 2 进攻花色苷 C 2 位, 引起花色苷降解.黑小麦色素抗氧化活性 黑粒小麦提取物具有很强清除 DPPH自由基活性, 抗氧化能力麦麸皮比全麦高 2 倍。黑小麦籽粒色素、 总黄酮、 氨基酸、 SOD 活性与抗活性氧、 抗超氧阴离子自由基和总抗氧活化能力存在量效关系, 且呈显著正相关。细胞内抗氧化实验表明细胞内抗氧化实验表明: 黑小麦提取物显著抑制 H 2 O 2 诱导细胞内氧化 ( 0.01)和细菌脂多糖诱导 NO 产生 (
33、0.05) ; 其中 69% 抗氧化粮食与油脂12ls1303-0948 2013 年第 26 卷第 3 期能力来自以矢车菊素 3 葡萄糖苷为主花色苷。从蓝粒小麦中分离出四种花色苷, 具有很强清除DPPH、 ABTS 自由基活性和抑制人体血清低密度脂蛋白胆固醇氧化能力。BKWP BKWP 具有良好清除 OH自由基和抑制 NH 4 NO 2 合成、 清除 NaNO 2 能力, BKWP 含量为 35 g/mL 时对DPPH清除率为 85.47%, 在 0.32 g/mL 时对 OH清除率分别为 33.60%, 实验体系中含 BKWP 含量为 4.78g/mL 时, 对 NH 4 NO 2 合 成
34、 阻 断 率 最 高 达77.99%, 对 NaNO 2 清除率达 85.09% 。微波辅助提取蓝、 紫粒小麦麸皮中色素的研究材料及预处理材料及预处理 蓝粒小麦品种为珍珠绿和法国蓝; 紫粒小麦品种为初 91 和初 97, 均由西北农林科技大学小麦所生物技术研究室提供。微波辐射提取蓝、微波辐射提取蓝、 紫粒小麦麸皮色素的方法紫粒小麦麸皮色素的方法 乙醇作为提取剂,并借鉴前人 11, 13, 14 的经验, 用 1 mol/ L 的盐酸将乙醇调至 pH = 2. 0 备用。按试验设计, 称取一定量的麸皮, 置于具塞三角瓶中, 加入相应量的酸性乙醇溶液, 选用强度较好的塑料薄膜密封瓶口。采取间断辐射
35、加热( 即: 加热 冷却 加热) , 加热最高温度控制在? 75 ( 78 酒精沸腾) 。最后水冷至室温。微波辅助提取蓝、微波辅助提取蓝、 紫粒小麦麸皮色素的单因素试验和正交试验紫粒小麦麸皮色素的单因素试验和正交试验 选择与浸提效果直接相关的微波功率、 辐射时间、 提取剂浓度以及原料与提取剂配比( 料液比) 等因素做单因素对提取率的影响实验。用 UT?750 型紫外可见分光光度计对酸性乙醇水溶液浸提的蓝、 紫粒小麦色素溶液进行扫描, 得出蓝粒色素溶液 ? max =530 nm, 紫粒色素溶液 ? max = 520nm。因此, 采用530 nm 和 520 nm 波长单色光测定浸提液的吸光值
36、。 色素提取率的计算色素提取率的计算在最佳提取条件下做浸提实验, 测定各次实验的提取率。具体操作方法是: 在最优提取条件下, 分别多次提取一定量的蓝、 紫粒小麦麸皮, 直至提取液为无色, 分别收集各提取溶液并测定其体积 V i 和吸光度A i , 然后合并各次提取液, 测出总体积 V 总 和总吸光度 A 总 。提取率的计算公式为: 提取率= A i *V i / (A 总*V 总 ) 100%。微波辐射功率对色素提取效果的影响微波辐射功率对色素提取效果的影响 称取 2. 00 g 麸皮, 加入 20 mL( 紫粒麸皮用24 mL) 体积分数为 70% 的酸性乙醇溶液, 蓝粒按1!10、 紫粒按 1 !12( 料液比) 作为浸取体系, 在消耗能量相同的前提下, 分别在 90 W、 270 W、450 W、 720 W 和 900 W 的微波功率下间断辐射120 s、 40 s、 24 s、 15 s、 12 s, 将最高温度控制在
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