正交试验法优选黄柏酒炙的炮制工艺研究

1、正交试验法优选黄柏酒炙的炮制工艺研究马雪松邹兵张凡李峰沈晓庆【摘要】目的优选酒炙黄柏的最正确炮制工艺。要领以盐酸小檗碱和盐酸黄柏碱的含量为评价指标，选择加酒量、炒温制度及炒制时间为观察因素，接纳正交方案l934，优选黄柏酒制的最正确炮制工艺。效果黄柏酒制的最正确炮制工艺为：每20g药材用黄酒按每100kg黄柏药材利用20kg黄酒闷润，在150160下炒制6in。结论酒炙黄柏的最正确炮制工艺公正可行。【关键词】黄柏酒炙盐酸小檗碱盐酸黄柏碱正交实行【abstrat】bjetive：tptiizethebestpreparatintehnlgyphelldendrnshneid.ethd:thent

2、entfberberineandphelldendrineasregardedasevaluatedindex.theauntfaddingine,tiefrpressingandteperaturefrpressingerehsenasresearhfatrs.thepressasseletediththerthgnaldesignl934result:theptialpredureassetasflls：addingauntf15lineper100gphelldendrnshneid.heatingat150160fr6inutes.nlusin:theptialpressingtehn

3、lgyfinefriedphelldendrnshneid.isreasnable【keyrds】phelldendrnshneidinefriedberberinephelldendrinerthgnalexperiental黄柏为芸香科植物黄皮树phelldendrnhinenseshneid的枯燥树皮，药性苦、寒，入肾、膀胱经1。有用身分为生物碱类化合物，另含柠檬苦素以及甾体等身分。在?本草纲目?中纪录：“黄檗性寒而沉，生用那么落实火，熟用那么不伤胃，酒制那么治上，盐制那么治下，蜜制那么治中。此中酒制黄柏可以缓其苦寒之性，借酒力以上腾，能清上焦湿热，且能入血分，治血分之热。可用于治疗肝胆

4、实热引起的头疼，耳鸣，咽喉肿痛，大便秘结等症2。据文献报道其生物碱身分中的盐酸小檗碱3和盐酸黄柏碱具有抗炎和抗癌活性，而黄柏碱同时具有落血压的疗效，其自己也是合成落血压药的母核4，故用小檗碱和黄柏碱作为稽核黄柏酒制工艺的指标是可行的。因酒制法炮制黄柏其炮制工艺、详细工艺参数，文献中未见报道。因此本实行以盐酸小檗碱和盐酸黄柏碱为指标，观察酒制黄柏的炮制工艺及最正确参数，为进一步研究酒制黄柏作用提供科学根据。1仪器与试药1.1仪器安捷伦1100-series液相色谱仪g1314a紫外检测器；ettlerae240型十万分之一阐发天平(瑞士ettler)，kq-250db型数控超声波洗濯器(昆山市超

5、声仪器)，fa1004b电子天平(上海细密科学仪器)，烘箱s70b-型。1.2药材黄柏药材，购自四川省药材公司，经辽宁中医药大学要用植物教研室王冰传授断定为芸香科植物黄皮树phelldendrnhinenseshneid的枯燥树皮。1.3试剂与试药乙腈、甲醇为色谱纯，水为重蒸馏水，别的试剂均为阐发纯。盐酸小檗碱比较品购自中国药品生物成品检定所批号0713-9906。盐酸黄柏碱比较品购自成都曼思特生物技能，供含量测定利用，纯度均大于98%。黄酒绍兴市古泉酿酒厂，批号20220926，酒精度9%。2要领与效果2.1盐酸小檗碱和盐酸黄柏碱的含量测定比较品溶液的制备：细密称取盐酸小檗碱比较品9.52g

6、,置100l量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀,即得每1l含盐酸小檗碱0.0952g的比较品溶液。供试品溶液的制备：称取差异条件下炮成品粉末约0.1g，细密称定，制50l容量瓶中，加甲醇约40l，超声处置惩罚功率250，频率40khz40in，放冷，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，既得。色谱条件：色谱柱t-181504.6，安捷伦；活动相：乙腈-0.1%磷酸溶液体积比1：1每100l加十二烷基硫酸钠0.1g，检测波长为265n；流速：1l/in；柱温为30。理论板数按盐酸小檗碱盘算应不低于40001。比较品溶液的制备：细密称取盐酸小檗碱比较品0.415g,置100l量瓶中，加甲醇稀释至刻度

7、，摇匀,即得每1l含盐酸小檗碱0.00415g的比较品溶液。供试品溶液的制备：称取差异条件下炮成品粉末细密称定0.5g，置具塞锥形瓶中，细密参加1%醋酸甲醇25l，超声处置惩罚功率250，频率40khz30in，放凉，再称定重量，用1%醋酸甲醇补足减失的重量，摇匀，摇匀，取续滤液，即得。色谱条件：色谱柱t-181504.6，安捷伦；活动相：乙腈-0.1%磷酸溶液40：60每100l加十二烷基硫酸钠0.2g，检测波长为284n；流速：1.0l/in；柱温为30，进样量为5l。理论板数按盐酸黄柏碱盘算应不低于60001。2.2单因素实行观察取黄柏饮片5份，每份20g，别离参加黄酒每100kg药材别

8、离用黄酒10kg、15kg、20kg、25kg至密闭容器内，闷润4h后，在温度为150160下炒制5分钟后出锅，放凉，备用。表2加酒量观察效果效果表白，差异的加酒量下，盐酸小檗碱和盐酸黄柏碱的含量有所差异，说明，加酒量是影响黄柏生物碱的重要因素。且从表2可以看出，在加酒量为每100kg药材用黄酒20kg是，生物碱的综合评分最高，因此每100kg药材用黄酒20kg举行下一组单因素观察。上式x为盐酸小檗碱含量，y为盐酸黄柏碱含量，并对黄柏酒成品的综合评分的两个指标的参数各设为50%，下同。取黄柏5份，每份20g，参加黄酒按每100kg药材用黄酒20kg至密闭容器内，别离闷润1h、2h、4h、6h、

9、8h后，在温度为150160下，别离炒制5in后出锅，放凉，备用。表3闷润时间观察效果效果表白不消闷润时间下，只要闷润时间凌驾1h以上，生物碱的含量变革不大，说明闷润时间不是影响黄柏中生物碱的重要因素。因此在正交试验中不选择闷润时间为观察因素。取黄柏5份，每份20g，参加黄酒按每100kg药材用黄酒20kg至密闭容器内，闷润4h后，别离在温度为120130、130140、140150、150160、160170炒制5in后出锅，放凉，备用表4炒制温度观察效果效果表白差异温度下，生物碱的含量有所差异，说明炒制的温度是影响生物碱含量的因素。从表4可以看出在温度为150160下炒制的酒黄柏，生物碱的

10、综合评分最高，因此选炒制温度为150160举行下一组单因素观察。取黄柏5份，每份20g，参加黄酒按每100kg药材用黄酒20kg至密闭容器内，闷润4h后，在温度为150160下别离炒制3in、4in、5in、6in、7in后出锅，放凉，备用。表5炒制时间观察效果效果表白在差异炒制时间下，生物碱的含量有所不消，说明炒制时间是影响生物碱含量的因素。从表5可以看出在炒制时间为5in时间的酒黄柏，生物碱的综合评分最高。2.3正交试验由上述单因素观察可以看出酒炙黄柏虚思量的重要因素有加酒量、炒制温度、炒制时间3个因素，故以加酒量、炒制温度、炒制时间为观察因素，以盐酸小檗碱和盐酸黄柏碱的含量为指标，按照单

11、因素观察方案正交试验因素程度表，按l934正交试验表举行实行，其因素程度表见表6，正交试验方案见表7，方差阐发表见表8表6因素程度表表7正交试验方案表表8含量方差阐发表注：f0.05(2,2)=19.00由以上方差阐发效果可以得出，酒制黄柏的影响因素为(炒制时间)b(炒制温度)a(加酒量)，且b因素和因素对黄柏酒炙生物碱的含量有明显的影响，而a因素对黄柏酒炙的生物碱含量无明显影响。结合直不雅阐发表并思量消费现实，确定其炮制的最正确工艺为a2b23,即药材参加黄酒每100kg药材用黄酒20kg润透，锅底温度为150160，炒制6in。2.4验证明行为进一步观察最正确炮制工艺的可靠性以及不变，按上

12、述最正确工艺举行2次验证明行。取黄柏2份，每份20g，参加黄酒每100kg药材用黄酒20kg润透，在锅底温度为150160时，别离炒制6in后出锅，放凉，备用。取上述2份炮成品，并按2.1项下的实行步调对其举行含量测定。表9验证明行效果由表9可知，样品1和样品2的盐酸小檗碱和盐酸黄柏碱的含量均较高且不变，与正交实行效果相符合，说明本文最正确炮制工艺可行。3讨论与结论3.1本实行在单因素观察之前，举行了预实行，既将酒制黄柏、清炒黄柏以及生黄柏的生物碱含量举行比力。两种炮成品的黄柏比生黄柏的生物碱有所低落，但将酒制黄柏与清炒黄柏比力，酒制黄柏的生物碱含量比清炒黄柏的含量要高，可以说明参加黄酒作为辅

13、料炮制后的黄柏，对生物碱起到了助溶的作用，能有利于药材中有用身分的溶出，使得酒炒过的黄柏比清炒品种的生物碱含量高5。3.2本实行在单因素观察中，别离以加酒量、炒制温度和炒制时间为影响黄柏酒制的工艺的重要因素，而闷润时间对黄柏的生物碱含量影响不大，只要凌驾2h小时即可。别的闷润时间也随季候而差异，夏日室温高，酒挥散的较快且较多，而到了冬季那么恰好相反，导致影响闷润时间的因素许多。以是只要在每次润药时，只要药材将酒吸尽润透即可。3.3加酒量、炒制温度、炒制时间对酒制黄柏的生物碱含量都有影响，且随着加酒量的增长、温度的升高和时间的延伸，酒制黄柏的生物碱含量均大抵出现先升高后低落的趋势。3.4本实行以为加酒量、炒制温度、炒制时间为影响黄柏炮制的重要因素，并以三种因素举行正交方案，以盐酸小檗碱以及盐酸黄柏碱为指标，对酒制黄柏的最正确炮制工艺举行优选，挑选出最正确工艺为药材参加黄酒每100kg药材用黄酒20kg润透，锅底温度为150160，炒制6in。本实行效果